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一、儀器構(gòu)造二、儀器工作原理三、朗伯比爾定律四、含量測(cè)定方法一、儀器構(gòu)造吸收池光源單色器吸收池檢測(cè)器顯示器光源:提供足夠強(qiáng)度、穩(wěn)定的連續(xù)光譜01常用鎢絲燈和鹵鎢燈,穩(wěn)定光源波長(zhǎng)為400~780nm。常用氫、氘等放電光源,可用波長(zhǎng)為160~375nm。可見(jiàn)光源紫外光源氘燈—紫外鹵鎢燈--可見(jiàn)單色器02單色器是將復(fù)合光分散成單色光的裝置,包括入射狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件、聚焦透鏡、出射狹縫等。吸收池03吸收池又叫比色皿,是用于盛裝分析試液并提供一定光程長(zhǎng)度的器皿。適用于可見(jiàn)光及紫外光區(qū)。適用于可見(jiàn)光區(qū)。石英吸收池玻璃吸收池檢測(cè)器04將通過(guò)吸收池的透射光的光通量轉(zhuǎn)變成電信號(hào)的裝置。常用硒電池,壽命短。分為藍(lán)敏和紅敏兩種。光電池光電管檢測(cè)微弱強(qiáng)度光,最常見(jiàn)的光電元件。光電倍增管顯示器05把檢測(cè)到的光信號(hào)顯示出來(lái)的裝置。透光率(T)吸光度(A)濃度(C)二、儀器工作原理三、朗伯-比爾定律:式中:A為吸光度;K為吸收系數(shù);C為溶液濃度;L為液層厚度。A=KCL當(dāng)一束平行的單色光通過(guò)均勻非散射體系的低濃度溶液時(shí),在單色光強(qiáng)度、溶液溫度等條件不變的情況下,吸光度與液層的厚度和吸光物質(zhì)濃度的乘積成正比吸收系數(shù)01摩爾吸收系數(shù):在一定λ下,c=1mol/L,L=1cm時(shí)的吸光度。單位:L/(mol.cm)02百分吸收系數(shù)/比吸光系數(shù)
:1g/100ml03兩者關(guān)系:《中國(guó)藥典》采用百分吸收系數(shù):一定λ下,c=1%(W/V),L=1cm時(shí)的吸光度。單位:100ml/g.cm
四、含量測(cè)定(1)標(biāo)準(zhǔn)曲線法(2)對(duì)照品法(3)吸收系數(shù)法(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線法(工作曲線法):配制一系列不同濃度的對(duì)照品溶液測(cè)定各對(duì)照品溶液的吸光度以吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo)繪制A-C曲線,稱(chēng)為標(biāo)準(zhǔn)曲線,并求出回歸方程測(cè)定樣品溶液的吸光度,代入回歸方程,求出樣品溶液的濃度標(biāo)準(zhǔn)系列:濃度(mg/L)吸光度A(3)對(duì)照品法:按藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,分別配制供試品溶液和對(duì)照品溶液,在規(guī)定的波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度,按下式計(jì)算供試品溶液中待測(cè)組分的濃度。
式中:AR為對(duì)照品溶液的吸光度;AX為供試品溶液的吸光度;CR為對(duì)照品溶液的濃度;CX為供試品溶液的濃度。(3)吸收系數(shù)法:按藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法配制供試品溶液,在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度(A);根據(jù)
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