2023年生物技術(shù)期末復(fù)習(xí)-基因工程原理（生物技術(shù)）歷年重點(diǎn)考題集錦附有答案

（圖片大小可自由調(diào)整）2023年生物技術(shù)期末復(fù)習(xí)-基因工程原理（生物技術(shù)）歷年重點(diǎn)考題集錦含答案第1卷一.綜合考核題庫(共100題)1.在用單一限制酶切載體和目的基因并進(jìn)行連接時，為防止載體自身環(huán)化，常用____________處理載體。2.下列不是Southern印跡步驟的是（）A、DNA與載體的連接B、用凝膠電泳分離DNA片段C、DNA片段轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上D、用限制酶消化DNA3.克隆基因目的蛋白的表達(dá)形式主要有哪些類型？4.試述基因敲除技術(shù)的原理？5.用載體制作轉(zhuǎn)基因植物時，最常用的載體是下列哪種質(zhì)粒。A、pBR322質(zhì)粒B、pSCl01質(zhì)粒C、農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒D、pUC質(zhì)粒6.通過原位菌落雜交得到的陽性克隆即是重組體，但不能判斷插入的外源基因是否進(jìn)行了表達(dá)。7.PCR的衍生技術(shù)包括A、反轉(zhuǎn)錄PCRB、實時熒光定量PCRC、反向PCRD、巢式PCRE、RACE-PCR8.基因工程又叫A、分子克隆B、基因克隆C、遺傳育種D、遺傳工程E、重組DNA技術(shù)9.影響限制性核酸內(nèi)切酶酶切的反應(yīng)條件有哪些A、溫度B、鹽離子濃度C、緩沖體系D、反應(yīng)體積和甘油濃度E、限制性核酸內(nèi)切酶反應(yīng)的時間10.I型和III型限制性核酸內(nèi)切酶在同意蛋白酶分子中兼有甲基化酶及依賴ATP的限制性核酸內(nèi)切酶活性。11.基因工程以_________為基本材料。12.下列哪一項不是逆轉(zhuǎn)錄病毒的特點(diǎn)A、基因組很小B、表達(dá)時間短C、可感染分裂細(xì)胞D、可整合到宿主染色體上13.分離既定組織或者細(xì)胞的_____________是構(gòu)建cDNA文庫的首要步驟。14.下列哪種酶的發(fā)現(xiàn)是PCR反應(yīng)能迅速發(fā)展和廣泛應(yīng)用的主要原因A、TaqDNA聚合酶B、核酸內(nèi)切酶C、T4多核苷酸激酶D、S1核酸酶15.某學(xué)生在用EcoRI切割外源DNA片段時，出現(xiàn)了星號活性，請分析可能的原因？16.釀酒酵母表達(dá)系統(tǒng)常用啟動子有哪些？17.染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)是研究生命體組織或細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA相互作用的一種技術(shù)方法18.下列哪一種疾病是獲得性免疫缺陷綜合癥A、血友病BB、心血管疾病C、艾滋病D、囊性纖維化19.根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能特性，可將DNA限制性內(nèi)切酶分為幾類A、I型酶B、II型酶C、III型酶D、IV型酶E、V型酶20.下面關(guān)于細(xì)菌人工染色體(BAC)的特征描述，不正確是（）。A、BAC載體在細(xì)菌中以環(huán)形超螺旋狀態(tài)存在，使分離操作起來相對容易B、BAC載體在大腸桿菌宿主保持高拷貝C、克隆到BAC載體上的外源片段可以直接進(jìn)行測序以獲得末端序列

D、通過電激法將大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌比酵母的轉(zhuǎn)化率提高了10~100

倍21.生命科學(xué)發(fā)展的歷史場合中，經(jīng)歷了從描述生物學(xué)、_________到創(chuàng)造生物學(xué)三個發(fā)展階段。22.根據(jù)Northern印跡的結(jié)果可以說明_________。23.下列含有內(nèi)含子的生物是A、青霉B、放線菌C、藍(lán)藻D、大腸桿菌24.根據(jù)外源DNA片段的來源不同，可將基因文庫分為：基因組DNA文庫和cDNA文庫。25.逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的優(yōu)點(diǎn)不包括A、高效感染宿主細(xì)胞B、拷貝數(shù)高C、侵染范圍廣D、基因組小并且簡單26.雙脫氧末端終止法測定DNA序列是基于()A、DNA的連接反應(yīng)B、DNA的降解反應(yīng)C、聚合單體2‘和5’位的脫氧D、DNA的聚合反應(yīng)27.PCR反應(yīng)中常用的酶是______。28.有關(guān)基因工程的敘述正確的是A、限制性內(nèi)切酶只在獲得目的基因時才用B、重組質(zhì)粒的形成在細(xì)胞內(nèi)完成C、質(zhì)粒都可以作為運(yùn)載體D、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可為合成目的基因提供資料29.同尾酶即識別位點(diǎn)不同但切出的DNA片段具有相同的末端序列。30.植物基因轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)應(yīng)具備的條件？31.下列哪種克隆載體對外源DNA的容載量最大A、黏粒B、酵母人工染色體(YAC)C、λ噬菌體D、質(zhì)粒32.不是克隆質(zhì)粒的是A、pSC101質(zhì)粒B、pBR322質(zhì)粒C、M13噬菌體顆粒D、pUCl833.在分離DNA時，要戴手套操作，原因是手上常有________。34.在微生物遺傳學(xué)和分子遺傳學(xué)研究領(lǐng)域中的理論上的三大發(fā)現(xiàn)對基因工程的誕生起到了決定性的作用，這三大發(fā)現(xiàn)是下列哪些A、發(fā)現(xiàn)了生物的遺傳物質(zhì)是DNA而不是蛋白質(zhì)B、明確了DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)和半保留復(fù)制機(jī)制C、遺傳密碼子的破譯D、質(zhì)粒改造成載體以攜帶DNA片段克隆E、逆轉(zhuǎn)錄酶的使用35.在微生物遺傳學(xué)和分子遺傳學(xué)研究領(lǐng)域中的技術(shù)上的三大發(fā)明對基因工程的誕生起到了決定性的作用，這三大發(fā)明是下列哪些A、利用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶體外切割和連接DNA片段B、遺傳密碼子的破譯C、質(zhì)粒改造成載體以攜帶DNA片段克隆D、逆轉(zhuǎn)錄酶的使用E、明確了DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)和半保留復(fù)制機(jī)制36.質(zhì)粒作為載體使用時必須具備如下條件A、拷貝數(shù)較高B、分子量較小C、具有選擇標(biāo)記D、具有較多的限制性酶切位點(diǎn)E、具有復(fù)制起始點(diǎn)37.cDNA克隆與基因組克隆有何不同？38.基因表達(dá)載體中啟動子的本質(zhì)是_________。39.基因工程藥物的特點(diǎn)是高技術(shù)，短周期，高投入，高風(fēng)險，高收益。40.一般來說，識別序列的堿基對越多，則這種酶在DNA上出現(xiàn)的頻率越高。41.基因工程最知名的也是飽受爭議的應(yīng)用之一是_____________。42.獲得DNA重組體后，還需進(jìn)一步鑒定，可采用的方法有A、DNA序列測定B、PCR鑒定C、酶切鑒定D、表達(dá)產(chǎn)物的鑒定E、進(jìn)行定點(diǎn)突變43.Ti質(zhì)粒44.質(zhì)粒載體的裝載容量為10Kb-20Kb。45.westernblot雜交時，探針與膜上的（）雜交A、DNAB、RNAC、蛋白質(zhì)D、染色體46.在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'含有一個6bp的Ⅱ類限制性內(nèi)切核酸酶的識別序列，該位點(diǎn)的序列可能是什么？47.Muller的PCR反應(yīng)同大腸桿菌體內(nèi)的DNA復(fù)制有哪些不同？你認(rèn)為根本的差別在哪里？48.關(guān)于cDNA的最正確的說法是A、同mRNA互補(bǔ)的單鏈DNAB、同mRNA互補(bǔ)的雙鏈DNAC、以mRNA為模板合成的雙鏈DNAD、以上都正確

49.主要用來提高擴(kuò)增特異性的特殊PCR是A、反轉(zhuǎn)錄PCRB、Real-TimePCRC、巢式PCRD、反向PCR50.1986年第一例植物基因工程產(chǎn)品----_________問世。51.YAC載體具有什么樣的功能性DNA序列？為什么在克隆大片段時，YAC具有優(yōu)越性？52.酵母人工染色體含有下列哪些元件A、酵母染色體的端粒序列B、酵母染色體的復(fù)制子C、酵母染色體的中心粒序列D、酵母系統(tǒng)的選擇標(biāo)記E、大腸桿菌的復(fù)制子和選擇標(biāo)記53.在細(xì)菌中增殖來自某一生物的染色體DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合體叫做A、基因文庫B、基因庫C、基因組文庫D、cDNA文庫54.限制性內(nèi)切酶可特異性識別A、雙鏈DNA的特定堿基對B、雙鏈DNA的特定堿基序列C、單鏈RNA的特定堿基序列D、單鏈DNA的特定堿基序列55.黏粒（Cosmid)是一種人工構(gòu)建的載體，A、它具有cos位點(diǎn)，因而可進(jìn)行體外包裝B、它具有質(zhì)粒DNA的復(fù)制特性C、進(jìn)入受體細(xì)胞后，可引起裂解反應(yīng)D、進(jìn)入受體細(xì)胞后，可引起溶原化反應(yīng)E、能承載大于自身大小的DNA片段56.利用DNA自動測序時通常進(jìn)行標(biāo)記的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP57.常規(guī)Sanger雙脫氧鏈終止法標(biāo)記的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP58.Kan表示A、氨芐青霉素B、卡那霉素C、潮霉素D、四環(huán)素59.利用噬菌體或動物病毒作為載體轉(zhuǎn)化細(xì)胞的過程稱為轉(zhuǎn)移。60.抗性基因（Resistant？gene）是目前使用的最廣泛的選擇標(biāo)記，常用的抗生素抗性有哪幾種？61.________主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的氨基酸序列設(shè)計一組混合引物來合成相應(yīng)的基因。62.欲將一真核生物的結(jié)構(gòu)基因克隆后轉(zhuǎn)移到原核生物(如E．coli)中進(jìn)行表達(dá)，克隆時應(yīng)注意哪些問題？63.大腸桿菌作為外源基因表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)是A、繁殖迅速B、操作方便C、基因克隆機(jī)表達(dá)系統(tǒng)成熟完善D、全基因組測序完成E、被美FDA批準(zhǔn)為安全的基因工程受體生物64.下列屬于基因工程步驟的是（）A、提取目的基因B、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合C、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞D、目的基因的表達(dá)65.在cDNA的合成中要用到_________，其作用是切除在第二鏈合成時形成的發(fā)夾環(huán)。66.cDNA文庫包括該種生物的A、某些結(jié)構(gòu)基因B、內(nèi)含子C、所有的結(jié)構(gòu)基因D、內(nèi)含子和調(diào)控區(qū)67.用Sanger雙脫氧法進(jìn)行DNA測序時，凝膠上讀出的序列是A、模板鏈的互補(bǔ)鏈B、mRNA的C、cDNA的D、模板鏈的68.能通過分泌或運(yùn)輸方式定位于細(xì)胞周質(zhì)甚至穿過外膜進(jìn)入培養(yǎng)基中的外源蛋白是A、包涵體型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、復(fù)合蛋白69.如何提高克隆基因的表達(dá)水平？70.可以在切口部位起作用的酶是A、外切酶IIIB、λ外切核酸酶C、Bal核酸酶D、S1核酸酶71.原核啟動子是由兩端緊密連接且又高度保守的核苷酸序列組成。72.連接反應(yīng)中，下列哪項物質(zhì)是T4DNA連接酶所必須的輔助因子A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP73.pUCl8質(zhì)粒是目前使用較為廣泛的載體,pUC系列的載體是通過________和M13兩種質(zhì)粒改造而來。74.下列哪一項不具有吸附DNA的功能A、經(jīng)特殊處理的濾紙B、尼龍膜C、玻璃膜D、硝酸纖維素膜75.黏粒(cosmid)質(zhì)粒中，COS位點(diǎn)的功能是A、限制酶切位點(diǎn)B、參與包裝進(jìn)入病毒外殼C、選擇標(biāo)記D、復(fù)制起點(diǎn)76.接合質(zhì)粒77.HIV為逆轉(zhuǎn)錄病毒。78.同尾酶79.限制性核酸內(nèi)切酶是由細(xì)菌產(chǎn)生的，其生理意義是A、修復(fù)自身的遺傳缺陷B、促進(jìn)自身的基因重組C、強(qiáng)化自身的核酸代謝D、提高自身的防御能力80.T4DNA連接酶和E．coli連接酶作用時都需要ATP和NAD+作為輔助因子。81.將含有一個mRNA的DNA拷貝的克隆稱作一個cDNA克隆，源于同一批RNA制備物的克隆群則構(gòu)建了一個______。82._________---阿爾茨海默病神經(jīng)系統(tǒng)疾病模型。83.用藍(lán)白斑篩選重組子時，白斑表示外源基因插入到載體中了。84.T4DNA連接酶和E．coli連接酶都能催化平末端和黏性末端的連接。85.限制性內(nèi)切酶通常保存在_________濃度的甘油溶液中。86.列舉質(zhì)粒載體必須具備的4個基本特性。87.核酸雜交探針就是帶有放射性標(biāo)記的DNA分子。88.EcoRI切割載體DNA和供體DNA所產(chǎn)生的片段在用于重組連接前要A、用CIP處理載體DNA防止自身環(huán)化B、進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測C、上述說法都正確D、用65℃處理5～10min使限制性內(nèi)切核酸酶失活89.任何一種質(zhì)粒都可以用氯霉素擴(kuò)增的方法，增加它的拷貝數(shù)。90.進(jìn)行體外重組時，外源片段和載體分子之間的物質(zhì)的量比值一般為A、（1-5）:1B、（3-10）:1C、1：（3-10）D、1：（1-5）91.請寫出Southern雜交的操作過程。92.波莉綿羊的誕生是通過體細(xì)胞核移植法制備的。93.核酸分子雜交探針必須滿足的條件不包括A、單鏈結(jié)構(gòu)B、足夠長度C、不含互補(bǔ)區(qū)D、只能是DNA94.外源基因經(jīng)pET載體的表達(dá)，其表達(dá)量往往超過總蛋白的A、40%B、20%C、30%D、50%95.真核生物基因組上有些DNA序列能將基因及基因簇隔開，阻止鄰近基因之間的相互作用，這些功能序列被稱為_________。96.cDNA克隆較之基因組克隆最重要的優(yōu)越性就是它們含有一個基因的完整序列。97.試述限制性核酸內(nèi)切酶的命名原則。98.PCR反應(yīng)中DNA模板量一般為A、100-10000拷貝B、100-100000拷貝C、1000-10000拷貝D、10-100拷貝99.在cDNA技術(shù)中，所形成的DNA發(fā)夾環(huán)可用A、限制性內(nèi)切核酸酶切除B、3’切核酸酶切除C、S1核酸酶切除D、5’切核酸酶切除100.末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶在基因工程的操作中主要是防止載體自連。第1卷參考答案一.綜合考核題庫1.正確答案:堿性磷酸酶2.正確答案:A3.正確答案:表達(dá)蛋白按溶解特性通常包括：不溶性蛋白和可溶性蛋白兩類，具體包括如下幾種結(jié)構(gòu)形態(tài)：包涵體型蛋白、融合型蛋白、分泌型蛋白。4.正確答案:是一種遺傳工程技術(shù)，針對某個序列已知但功能未知的序列，改變生物的遺傳基因，令特定的基因功能喪失作用，從而使部分功能被屏蔽，并可進(jìn)一步對生物體造成影響，進(jìn)而推測出該基因的生物學(xué)功能。5.正確答案:C6.正確答案:正確7.正確答案:A,B,C,D,E8.正確答案:A,B,D,E9.正確答案:A,B,C,D,E10.正確答案:正確11.正確答案:DNA12.正確答案:B13.正確答案:mRNA14.正確答案:A15.正確答案:鹽離子濃度不對，溫度不對，甘油濃度過高。16.正確答案:糖酵解途徑中關(guān)鍵酶的強(qiáng)啟動子，受葡萄糖誘導(dǎo)；半乳糖激酶啟動子，受半乳糖誘導(dǎo)、葡萄糖抑制；PHO4TS-PHO5啟動子，受低溫誘導(dǎo)、磷酸鹽抑制。17.正確答案:正確18.正確答案:C19.正確答案:A,B,C20.正確答案:C21.正確答案:實驗生物學(xué)22.正確答案:外源基因是否進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄23.正確答案:A24.正確答案:正確25.正確答案:B26.正確答案:D27.正確答案:TaqDNA聚合酶28.正確答案:D29.正確答案:正確30.正確答案:（1）高效穩(wěn)定的再生能力；（2）較高的遺傳穩(wěn)定性；（3）具有穩(wěn)定的外植體來源；（4）對選擇性抗菌素敏感；（5）對農(nóng)桿菌侵染有敏感性。31.正確答案:B32.正確答案:C33.正確答案:核酸酶34.正確答案:A,B,C35.正確答案:A,C,D36.正確答案:A,B,C,D,E37.正確答案:基因組克隆包含所有不在cDNA中出現(xiàn)的內(nèi)含子。38.正確答案:一段DNA片段39.正確答案:錯誤40.正確答案:錯誤41.正確答案:轉(zhuǎn)基因食品42.正確答案:A,B,C,D43.正確答案:是根癌農(nóng)桿菌染色體外的遺傳物質(zhì)，為共價閉合雙鏈環(huán)狀DNA分子。44.正確答案:錯誤45.正確答案:C46.正確答案:回文序列是：5'-CATATG-3'。47.正確答案:PCR用雙引物，體內(nèi)復(fù)制用單引物。48.正確答案:C49.正確答案:C50.正確答案:除草劑耐受煙草51.正確答案:YAC帶有天然染色體所有的功能元件，包括一個著絲粒，一個DNA復(fù)制起點(diǎn)，兩個端粒。YAC能夠容納長達(dá)幾百kb的外源DNA，這是質(zhì)粒和黏粒辦不到的。大片段的插入更有可能包含完整的基因，在染色體步移中每次允許更大的步移距離，同時能夠減少完整基因組文庫所需的克隆數(shù)目。52.正確答案:A,B,C,D,E53.正確答案:A54.正確答案:B55.正確答案:A,B,D56.正確答案:A57.正確答案:B58.正確答案:B59.正確答案:正確60.正確答案:氨芐青霉素抗性基因、四環(huán)素抗性基因、氯霉素抗性基因、卡那霉素和新霉素抗性基因以及琥珀突變抑制基因。61.正確答案: