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ABO新生兒溶血病血清學(xué)檢查
邵長(zhǎng)峰韓樂(lè)樂(lè)
2012-10-22ABO新生兒溶血病血清學(xué)檢查1ABO新生兒溶血病
ABO新生兒溶血病血(HDN)是由于母嬰ABO血型不合,母體的IgG抗A或抗B經(jīng)過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血循環(huán)破壞胎兒紅細(xì)胞所引起。此病多見(jiàn)于O型母親所生A型或B型嬰兒,與O型母親血清中所含IgG抗A(B)抗體有關(guān)。新生兒溶血病血清學(xué)檢查主要是進(jìn)行三項(xiàng)試驗(yàn):直抗試驗(yàn)、游離試驗(yàn)和釋放試驗(yàn)。ABO新生兒溶血病ABO新生兒溶血病血(HD2試劑
抗人球蛋白血清
患兒5%紅細(xì)胞懸液
患兒血清
A型、B型、O型紅細(xì)胞懸液
酶處理A型、B型、O型試劑紅細(xì)胞懸液試劑抗人球蛋白血清3抗人球蛋白的原理抗人球蛋白的原理4一直接抗人球蛋白試驗(yàn)本試驗(yàn)用于檢測(cè)受檢者紅細(xì)胞上是否存在不完全抗體。1.取小試管2支,按下表標(biāo)記及加樣 試劑被檢管陰性對(duì)照管
患兒5%紅細(xì)胞懸液1滴1滴
0.9%生理鹽水—1滴
抗球蛋白血清1滴—
2.混勻,3400rpm,離心15s,輕輕搖動(dòng),觀察結(jié)果。一直接抗人球蛋白試驗(yàn)5二游離試驗(yàn)
本試驗(yàn)用于檢查新生兒血清中是否有游離的IgG型抗體1.取小試管3支,按下表標(biāo)記及加樣
試劑
Ac管Bc管Oc管
患兒血清1滴1滴1滴A型試劑紅細(xì)胞懸液1滴B型試劑紅細(xì)胞懸液1滴O型試劑紅細(xì)胞懸液1滴2.混勻后37℃水浴30min,用生理鹽水洗滌3次,最后一次吸盡鹽水,然后向各管中加1滴抗球蛋白試劑,3400rpm/分,離心15s,輕輕搖動(dòng),觀察結(jié)果。二游離試驗(yàn)本試驗(yàn)用于檢查新生兒血清中是否有游離的6三釋放試驗(yàn)
本試驗(yàn)和直抗試驗(yàn)相同,也是檢測(cè)新生兒紅細(xì)胞上的致敏的血型抗體,只是方法有所不同。釋放試驗(yàn)首先利用特殊的方法將致敏在新生兒紅細(xì)胞上的抗體放散下來(lái),然后再檢測(cè)放散液中的抗體。1、取洗滌后的壓積紅細(xì)胞,加等量鹽水。2、混勻后,置于56℃水浴中不停搖動(dòng)7-10min。3、取出后立即高速離心,3000rpm/分2-3min,如果有可能,則使用預(yù)先加熱過(guò)的離心杯。4、離心后馬上吸出上清液置于小試管中再次離心3000rpm/分1min。取上清液分成3等份于3個(gè)小試管中,分別標(biāo)記上“A”、“B”、“O”。按下表標(biāo)記及加樣三釋放試驗(yàn)本試驗(yàn)和直抗試驗(yàn)相同7試劑
A管B管O管酶處理A型紅細(xì)胞懸液1滴酶處理B型紅細(xì)胞懸液1滴酶處理O型紅細(xì)胞懸液1滴
5、混勻后37℃水浴30min,用生理鹽水洗滌3次,最后一次吸盡鹽水,然后向各管中加1滴抗人球蛋白試劑,3400rpm/分,離心15s,輕輕搖動(dòng),觀察結(jié)果。試劑8注意事項(xiàng)
[1]、離心后要輕搖觀察結(jié)果,搖動(dòng)時(shí)不要使勁地甩試管,要輕搖或用手指輕彈。
[2]、加抗球蛋白之前要3次洗滌,最后一次在倒掉上清后不要再倒轉(zhuǎn)試管,而是直接置于吸水紙上吸盡鹽水。
[3]、熱放散時(shí)應(yīng)嚴(yán)格注意溫度和時(shí)間,溫度過(guò)高,細(xì)胞易溶解,過(guò)低抗體
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