HIV檢測質量保證杭州

HIV檢測的質量控制

中國CDC性艾中心肖瑤xiaoyao@

規(guī)范化的實驗室檢測全國艾滋病檢測技術規(guī)范，2009修訂版艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標準實驗室安全通用要求臨床基因擴增實驗室管理暫行辦法《檢測和校準實驗室能力認可準則》CD4+T淋巴細胞檢測質量保證指南HIV－1病毒載量檢測及質量保證指南HCV檢測指南？嬰幼兒HIV檢測指南？02年 03年 04年 05年 06年07年抗體 CD4病毒載量亞型 BED耐藥

2009

20062006全國艾滋病檢測實驗室質控體系發(fā)展20062008質量控制

質量控制：是指為確保實驗工作正常進行而在每一次實驗過程中必須采取的各種措施。以保證檢驗結果達到允許的準確度。實驗前質量控制

正確的標本采集和處理正確及時的運送樣品實驗前正確地處理和保存樣品實驗中質量控制

選擇正確的檢測方法質控品的準備開展質控圖質控Levey-Jennings（或“即刻法”質控）。

實驗后質量控制①實驗后準確填寫檢驗結果；②及時發(fā)出報告；③正確地解釋檢驗結果的臨床意義。質量控制實驗前質量控制正確的標本采集和處理檢測目的（抗體（BED），VL，CD4，DBS等）抗凝和不抗凝數(shù)量正確及時的運送樣品運輸包裝檢測目的檢測方法

實驗前質量控制運輸采用WHO提出的三級包裝系統(tǒng)

第一層容器：裝樣品，要求防滲漏第二層容器：要求耐受性好、防滲漏、容納并保護第一層容器，可以裝若干個第一層容器。第三層容器：放在一個運輸用外層包裝內，應易于消毒觀察窗溫度計實驗前質量控制正確地保存樣品

長期（血清，血漿，全血），短期，不保存

問題：抗體：短期（？）保存2－8C。長期（？）度保存CD4：全血最長時間（？）處理好樣品怎樣保存？VL：（？）分離血漿長期（？）中期（？）短期（？）保存時間凍溶不能超過（？）次實驗前質量控制選擇正確的檢測方法不同檢測方法對樣品有不同要求檢測方法提高準確性質控品的準備商用和自制開展質控圖質控（Levey-Jennings，或“即刻法”質控）。

中部三省27個VCT點10310名咨詢者樣本檢測結果檢測策略與WB+符合率漏檢（數(shù)）RT192.57%1RT291.94%3RT1+RT298.72%1RT1+RT2+EIA99.74%第四代EIA試劑的使用現(xiàn)場調研時發(fā)現(xiàn)，在CDC實驗室工作中存在著HIV漏檢的潛在危險因素，應引起高度重視。許多血站開始開始使用第四代EIA，CDC仍然用第三代EIA復檢，因此，有導致窗口期漏檢的可能。建議：確證實驗室對來自血站的篩查陽性的樣品使用第四代試劑進行復檢。HIV發(fā)病率研究的方法BED計算發(fā)病率與隊列觀察發(fā)病率比較文獻列表

3.14.3③155001092IDU中國8.88.2③4247534225IDU中國1.13.4③447528267FSW中國1.76.1③..39151鄉(xiāng)村居民非洲917.3②..113594IDUc泰國3.43.5①②d2349589123234VA試驗非洲4.612.2①19397.19FSW非洲1.361.44①.1113..入伍官兵泰國0.51①19482216FSW非洲3.12.91①1271805101111MSMaFSWb北美荷蘭隊列觀察發(fā)病率/100人年BED計算發(fā)病率/100人年BED檢測樣本來源隊列血清陽轉人數(shù)隊列隨訪人數(shù)新感染數(shù)BED檢測的樣本量人群地區(qū)標注：①隊列中期和隨訪間隔；②樣本來自隊列篩檢人群；③與隊列目標人群相同的橫斷面調查；a:男同性戀人群；b:商業(yè)女性工作者；c:靜脈吸毒人群d:該文獻給出隊列篩檢人群由BED-CEIA計算的發(fā)病率6.0/100人年

“.”表示數(shù)據(jù)缺失實驗中質量控制質控圖1、抗體檢測2、抗原檢測3、病毒載量檢測4、免疫表型（CD4＋T淋巴細胞）的檢測EIA檢測質控室內質控內部對照：試劑盒提供外部對照：自己制備或購買用質控圖監(jiān)測變化趨勢試劑盒內部對照試劑盒內部對照質控品陽性和陰性對照血清用于判斷每次實驗的有效性，但不能作為室內質控品使用。每一次檢測臨床樣品時，必須有試劑盒內部對照，而且只能在同批號的試劑盒中使用。內部對照結果無效，必須重新試驗。室內質控品為非試劑盒組份的外部質控品，是為了監(jiān)控檢測的重復性而設置的，包括強陽性、弱陽性和陰性質控血清。也可以只設置一個弱陽性質控，以該試劑盒臨界值（Cut-off）的2～3倍為宜。外部質控品的是判斷該批臨床樣品檢測的有效性，因此，每次實驗必須包含室內質控品，其結果無效，必須重新試驗。室內質控品可以是商品或實驗室自行制備。

EIA質控圖算術平均值X：至少20天測得的外部對照血清S/CO值結果的平均值標準差S：是描述樣品于均值之間離散程度的指標，是與對照血清S/CO值有關的預測范圍。

變異系數(shù)CV：是反映各次S/CO值相對于均值離散程度的?？梢杂脕砗饬繖z測的重復性和精密性。實驗中質量控制質控圖

XX+SX-SX-2SX+2SWestgard標準

多標準質控13S標準均值+1s+2s+3s-3s-2s-1s1234567891022S標準均值+1s+2s+3s-3s-2s-1s1234567891041S標準均值+1s+2s+3s-3s-2s-1s12345678910R4S標準均值+1s+2s+3s-3s-2s-1s12345678910CD4＋T淋巴細胞檢測質控室內質控：內部對照：廠家提供外部對照：購買用質控圖監(jiān)測變化趨勢流式細胞儀檢測質控圖質控圖質控圖VL質控室內質控：每次實驗需同時使用試劑盒內的質控品以及一個HIV-1RNA為5000-15000拷貝/毫升的外部質控品內部對照：廠家提供外部對照：自制，個別實驗室使用實驗后質量控制實驗后準確填寫檢驗結果；及時發(fā)出報告；正確地解釋檢驗結果的臨床意義?？贵w檢測中的問題初篩實驗中的假陽性血液惡性病變自身免疫性疾病多發(fā)性膽汁型肝硬化酒精性肝炎疫苗接種（流感，乙肝）多發(fā)性骨髓瘤腎移植或慢性腎衰竭瘧疾或絲蟲病其他

抗體檢測中的問題

初篩實驗中的假陰性窗口期免疫移植換血輸血惡性腫瘤免疫功能喪失（B細胞功能缺損）其他（試劑或操作原因）影響CD4細胞數(shù)的因素1.季節(jié)性和晝夜差異：如每日最低水平在中午12點30分，峰值在下午8點30分（JAIDS，1990，3：144）。2.腎上腺皮質激素對CD4細胞數(shù)有較大的影響，短期服用可能使CD4從900/ul下降到300/ul.Clinimmunopath,1983,28:101).3.合并感染HTLV-1的病人可能造成CD4的假性升高（AnnInternMed,1993,119:55).4.急性改變可能由于淋巴細胞在外周循環(huán)和骨髓、脾及淋巴結中的再分布(ClinExpimmunol,1990,80:460)。影響CD4細胞數(shù)的因素

免疫缺陷狀況也可以有輔助性T-淋巴細胞數(shù)量減少的結果:

-丙球蛋白缺乏癥

-胸腺發(fā)育不全(DiGeorge氏綜合癥)

-嚴重的聯(lián)合免疫缺陷影響CD4細胞數(shù)的因素檢測的儀器PT與室內質控室內質控是對檢驗結果的即時性評價，通過對室內質控結果的連續(xù)觀察，監(jiān)測實驗室檢驗結果的可靠性。PT是對檢驗結果的回顧性評價，其主要目的是評價和修正實驗室檢驗結果的準確性，并與各參評單位結果比較，了解本室結果的偏倚程度，是發(fā)現(xiàn)實驗室系統(tǒng)誤差的重要手段之一。HIV抗體檢測診斷依據(jù)：金標準？謝謝第一節(jié)活塞式空壓機的工作原理第二節(jié)活塞式空壓機的結構和自動控制第三節(jié)活塞式空壓機的管理復習思考題單擊此處輸入你的副標題，文字是您思想的提煉，為了最終演示發(fā)布的良好效果，請盡量言簡意賅的闡述觀點。第六章活塞式空氣壓縮機

piston-aircompressor壓縮空氣在船舶上的應用：

1.主機的啟動、換向；

2.輔機的啟動；

3.為氣動裝置提供氣源；

4.為氣動工具提供氣源；

5.吹洗零部件和濾器。

排氣量:單位時間內所排送的相當?shù)谝患壩鼩鉅顟B(tài)的空氣體積。單位：m3/s、m3/min、m3/h第六章活塞式空氣壓縮機

piston-aircompressor空壓機分類：按排氣壓力分：低壓0.2～1.0MPa；中壓1～10MPa；高壓10～100MPa。按排氣量分：微型<1m3/min；小型1～10m3/min；中型10～100m3/min；大型>100m3/min。第六章活塞式空氣壓縮機

piston-aircompressor第一節(jié)活塞式空壓機的工作原理容積式壓縮機按結構分為兩大類：往復式與旋轉式兩級活塞式壓縮機單級活塞壓縮機活塞式壓縮機膜片式壓縮機旋轉葉片式壓縮機最長的使用壽命-

----低轉速（1460RPM），動件少（軸承與滑片），潤滑油在機件間形成保護膜，防止磨損及泄漏，使空壓機能夠安靜有效運作；平時有按規(guī)定做例行保養(yǎng)的JAGUAR滑片式空壓機，至今使用十萬小時以上，依然完好如初，按十萬小時相當于每日以十小時運作計算，可長達33年之久。因此，將滑片式空壓機比喻為一部終身機器實不為過。滑(葉)片式空壓機可以365天連續(xù)運轉并保證60000小時以上安全運轉的空氣壓縮機1.進氣2.開始壓縮3.壓縮中4.排氣1.轉子及機殼間成為壓縮空間，當轉子開始轉動時，空氣由機體進氣端進入。2.轉子轉動使被吸入的空氣轉至機殼與轉子間氣密范圍，同時停止進氣。3.轉子不斷轉動，氣密范圍變小，空氣被壓縮。4.被壓縮的空氣壓力升高達到額定的壓力后由排氣端排出進入油氣分離器內。4.被壓縮的空氣壓力升高達到額定的壓力后由排氣端排出進入油氣分離器內。1.進氣2.開始壓縮3.壓縮中4.排氣1.凸凹轉子及機殼間成為壓縮空間，當轉子開始轉動時，空氣由機體進氣端進入。2.轉子轉動使被吸入的空氣轉至機殼與轉子間氣密范圍，同時停止進氣。3.轉子不斷轉動，氣密范圍變小，空氣被壓縮。螺桿式氣體壓縮機是世界上最先進、緊湊型、堅實、運行平穩(wěn)，噪音低，是值得信賴的氣體壓縮機。螺桿式壓縮機氣路系統(tǒng)：

A

進氣過濾器

B

空氣進氣閥

C

壓縮機主機

D

單向閥

E

空氣/油分離器

F

最小壓力閥

G

后冷卻器

H

帶自動疏水器的水分離器油路系統(tǒng)：

J

油箱

K

恒溫旁通閥

L

油冷卻器

M

油過濾器

N

回油閥

O

斷油閥冷凍系統(tǒng)：

P

冷凍壓縮機

Q

冷凝器

R

熱交換器

S

旁通系統(tǒng)

T

空氣出口過濾器螺桿式壓縮機渦旋式壓縮機

渦旋式壓縮機是20世紀90年代末期開發(fā)并問世的高科技壓縮機，由于結構簡單、零件少、效率高、可靠性好，尤其是其低噪聲、長壽命等諸方面大大優(yōu)于其它型式的壓縮機，已經得到壓縮機行業(yè)的關注和公認。被譽為“環(huán)保型壓縮機”。由于渦旋式壓縮機的獨特設計，使其成為當今世界最節(jié)能壓縮機。渦旋式壓縮機主要運動件渦卷付，只有磨合沒有磨損，因而壽命更長，被譽為免維修壓縮機。

由于渦旋式壓縮機運行平穩(wěn)、振動小、工作環(huán)境安靜，又被譽為“超靜壓縮機”。

渦旋式壓縮機零部件少，只有四個運動部件,壓縮機工作腔由相運動渦卷付形成多個相互封閉的鐮形工作腔，當動渦卷作平動運動時，使鐮形工作腔由大變小而達到壓縮和排出壓縮空氣的目的。活塞式空氣壓縮機的外形第一節(jié)活塞式空壓機的工作原理一、理論工作循環(huán)（單級壓縮）工作循環(huán)：4—1—2—34—1吸氣過程

1—2壓縮過程

2—3排氣過程第一節(jié)活塞式空壓機的工作原理一、理論工作循環(huán)（單級壓縮）

壓縮分類：絕熱壓縮：1—2耗功最大等溫壓縮：1—2''耗功最小多變壓縮：1—2'耗功居中功＝P×V（PV圖上的面積）加強對氣缸的冷卻，省功、對氣缸潤滑有益。二、實際工作循環(huán)（單級壓縮）1.不存在假設條件2.與理論循環(huán)不同的原因：1）余隙容積Vc的影響Vc不利的影響—殘存的氣體在活塞回行時，發(fā)生膨脹，使實際吸氣行程（容積）減小。Vc有利的好處—

（1）形成氣墊，利于活塞回行；（2）避免“液擊”（空氣結露）；（3）避免活塞、連桿熱膨脹，松動發(fā)生相撞。第一節(jié)活塞式空壓機的工作原理表征Vc的參數(shù)—相對容積C、容積系數(shù)λv合適的C：低壓0.07-0.12

中壓0.09-0.14

高壓0.11-0.16

λv＝0.65—0.901）余隙容積Vc的影響C越大或壓力比越高，則λv越小。保證Vc正常的措施：余隙高度見表6-1壓鉛法—保證要求的氣缸墊厚度2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實際工作循環(huán)（單級壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機的工作原理2）進排氣閥及流道阻力的影響吸氣過程壓力損失使排氣量減少程度，用壓力系數(shù)λp表示：保證措施：合適的氣閥升程及彈簧彈力、管路圓滑暢通、濾器干凈。λp

（0.90-0.98）2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實際工作循環(huán)（單級壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機的工作原理3）吸氣預熱的影響由于壓縮過程中機件吸熱，所以在吸氣過程中，機件放熱使吸入的氣體溫度升高，使吸氣的比容減小，造成吸氣量下降。預熱損失用溫度系數(shù)λt來衡量（0.90-0.95）。保證措施：加強對氣缸、氣缸蓋的冷卻，防止水垢和油污的形成。2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實際工作循環(huán)（單級壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機的工作原理4）漏泄的影響內漏：排氣閥（回漏）；外漏：吸氣閥、活塞環(huán)、氣缸墊。漏泄損失用氣密系數(shù)λl來衡量（0.90-0.98）。保證措施：氣閥的嚴密閉合，氣缸與活塞、氣缸與缸蓋等部件的嚴密配合。5）氣體流動慣性的影響當吸氣管中的氣流慣性方向與活塞吸氣行程相反時，造成氣缸壓力較低，氣體比容增大，吸氣量下降。保證措施：合理的設計進氣管長度，不得隨意增減進氣管的長度，保證濾器的清潔。2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實際工作循環(huán)（單級壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機的工作原理上述五條原因使實際與理論循環(huán)不同。4）漏泄的影響5）氣體流動慣性的影響1）余隙容積Vc的影響2）進排氣閥及流道阻力的影響3）吸氣預熱的影響2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實際工作循環(huán)（單級壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機的工作原理3.排氣量和輸氣系數(shù)理論排氣量Vt----單位時間內活塞所掃過的氣缸容積。實際排氣量Q：Q=Vt

λ輸氣系數(shù)λ

：λ＝λtλv

λ

pλl漏泄的影響余隙容積Vc的影響進排氣閥及流道阻力的影響吸氣預熱的影響二、實際工作循環(huán)（