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實(shí)驗(yàn)觀察植物細(xì)胞的有絲分裂實(shí)驗(yàn)原理操作流程洋蔥根尖培養(yǎng):實(shí)驗(yàn)前3~4d,待根長(zhǎng)到2cm左右實(shí)驗(yàn)點(diǎn)撥1.實(shí)驗(yàn)材料的選取(1)選擇染色體數(shù)目較少的生物,便于染色體的計(jì)數(shù)。(2)選擇分裂期占細(xì)胞周期時(shí)間比例大的細(xì)胞,易觀察到分裂期細(xì)胞。(3)選材部位一般為根尖或莖尖。(4)取材時(shí)間一般在上午10點(diǎn)至下午2點(diǎn)左右,此時(shí)分生區(qū)細(xì)胞分裂旺盛。2.實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)(1)根尖培養(yǎng):培養(yǎng)時(shí)應(yīng)經(jīng)常換水,防止根細(xì)胞長(zhǎng)期缺氧,進(jìn)行無(wú)氧呼吸,產(chǎn)生酒精,使根細(xì)胞中毒、腐爛。(2)解離①通過(guò)解離將細(xì)胞殺死,使細(xì)胞停留在不同的分裂時(shí)期。②解離時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短:過(guò)長(zhǎng)會(huì)使根尖過(guò)分酥軟且染色體成分被破壞;過(guò)短使根尖細(xì)胞解離不充分,不能相互分離。(3)漂洗:漂洗一定要徹底,防止殘留的解離液(鹽酸)繼續(xù)破壞細(xì)胞,同時(shí)鹽酸也影響染色和腐蝕鏡頭。(4)壓片:用力要恰當(dāng)均勻。(5)觀察①先在低倍鏡下找到分生區(qū)細(xì)胞,其特點(diǎn)是:呈正方形,排列緊密;再換用高倍鏡。②因細(xì)胞已死亡,因此要不斷移動(dòng)載玻片尋找不同時(shí)期的細(xì)胞分裂物像。③觀察到的不同時(shí)期細(xì)胞數(shù)目的多少反映出各時(shí)期經(jīng)歷時(shí)間的長(zhǎng)短。實(shí)戰(zhàn)演練1.取生長(zhǎng)健壯的小麥根尖,經(jīng)過(guò)解離、漂洗、染色、制片過(guò)程,制成臨時(shí)裝片,放在顯微鏡下觀察。欲觀察到細(xì)胞有絲分裂的前、中、后、末幾個(gè)時(shí)期,正確操作是(
)A.應(yīng)該選一個(gè)處于間期的細(xì)胞,持續(xù)觀察它從間期到末期的全過(guò)程B.如果在低倍鏡下看不到細(xì)胞,可改用高倍物鏡繼續(xù)觀察C.如果在一個(gè)視野中不能看全各個(gè)時(shí)期,可移動(dòng)裝片從周圍細(xì)胞中尋找D.如果視野過(guò)暗,可以轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋增加視野的亮度解析:選C。A項(xiàng)中細(xì)胞在解離時(shí)已被殺死,細(xì)胞被殺死時(shí)處在哪一時(shí)期就始終停留在哪一時(shí)期;B項(xiàng)中觀察應(yīng)先在低倍鏡下找到物像后,再換用高倍鏡觀察;D項(xiàng)中視野過(guò)暗,應(yīng)調(diào)節(jié)反光鏡或光圈來(lái)調(diào)節(jié)視野的亮度。2.用光學(xué)顯微鏡觀察植物細(xì)胞有絲分裂,下列敘述正確的是(
)A.一般用洋蔥鱗片表皮細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料B.實(shí)驗(yàn)材料需要用醋酸洋紅液解離C.解離后的實(shí)驗(yàn)材料在高倍鏡下可觀察到細(xì)胞內(nèi)原生質(zhì)流動(dòng)D.從低倍鏡轉(zhuǎn)到高倍鏡,視野中的細(xì)胞數(shù)目減少解析:選D。洋蔥鱗片表皮細(xì)胞不再進(jìn)行分裂。解離用的是質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液的混合液。解離后,細(xì)胞已死亡,無(wú)原生質(zhì)流動(dòng)現(xiàn)象。3.有1位同學(xué)做根尖有絲分裂實(shí)驗(yàn),在顯微鏡下觀察到的圖像如圖所示。造成這種情況的原因可能是(
)①取材位置不合適②取材時(shí)間不合適③制片時(shí)壓片力量不合適④解離時(shí)間不合適⑤視野選擇不合適A.②③
B.②⑤C.①②⑤
D.①③④解析:選C。制作并觀察根尖分生組織有絲分裂實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)在上午10時(shí)至下午2時(shí)(這時(shí)生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞分裂旺盛,容易找到分裂像)切取根尖2mm~3mm;在光學(xué)顯微鏡下,分生區(qū)細(xì)胞排列緊密,呈方形,有的細(xì)胞正在分裂。由圖可知:細(xì)胞大多都沒進(jìn)行分裂,可能是取材時(shí)間不合適,細(xì)胞分裂不旺盛;視野中有些細(xì)胞為長(zhǎng)形,可能取自伸長(zhǎng)區(qū),取材位置不合適;由于細(xì)胞分裂間期長(zhǎng)、分裂期短,因而,要看到處于細(xì)胞分裂各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞,往往需要在不同的視野中才能找到,可能是視野選擇不當(dāng),沒找到合適的視野;細(xì)胞均已分散開,故不可能為③④原因所致。4.在“觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂”實(shí)驗(yàn)中,以下操作和結(jié)論正確的是(
)A.剪取5cm根尖,用酒精和甲基綠混合液解離染色B.上圖是高倍顯微鏡下調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋看到的視野C.持續(xù)觀察,視野中的K細(xì)胞將分裂成兩個(gè)子細(xì)胞D.視野中,N細(xì)胞的染色體數(shù)目是M細(xì)胞的一半解析:選B。在“觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂”實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)剪取洋蔥根尖2~3mm,用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液的混合液(1∶1)解離,用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅)染色,所以A項(xiàng)錯(cuò)誤。在解離時(shí),根尖細(xì)胞已被殺死,即使持續(xù)觀察,視野中的K細(xì)胞也不會(huì)分裂成兩個(gè)子細(xì)胞,所以C項(xiàng)敘述不符合實(shí)際。視野中,N細(xì)胞處于有絲分裂后期,M細(xì)胞處于有絲分裂中期,N細(xì)胞的染色體數(shù)目是M細(xì)胞的2倍,D項(xiàng)不對(duì)。圖中的圖像確實(shí)為高倍顯微鏡下觀察到的圖像,可用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié)使視野中物像清晰,B項(xiàng)敘述正確。5.以下是幾位同學(xué)在做觀察植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)時(shí)的操作情況:甲同學(xué)截取5mm左右的根尖后按規(guī)范操作,結(jié)果在一個(gè)視野中未能找到分生區(qū)細(xì)胞,他耐心尋找后,最終還是未能觀察到。乙同學(xué)截取2mm~3mm根尖解離后立即染色,結(jié)果實(shí)驗(yàn)效果很差。丙同學(xué)將染色的實(shí)驗(yàn)材料立即放在載玻片上觀察,也看不清細(xì)胞。丁同學(xué)在制作裝片時(shí),用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸與體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精混合液(1:1)在10℃下解離5min,然后按正確要求操作,結(jié)果在觀察時(shí),發(fā)現(xiàn)根尖細(xì)胞沒有分開,請(qǐng)分析:(1)甲操作上的錯(cuò)誤是________,耐心尋找還是未能觀察到分裂期細(xì)胞的原因是________________________________,要想找到分生區(qū)的細(xì)胞,應(yīng)如何操作?________________________________。(2)乙同學(xué)操作上的錯(cuò)誤是________________,看不清細(xì)胞的原因是________________________________。(3)丙同學(xué)操作上的錯(cuò)誤是________________________________。(4)丁同學(xué)在操作中細(xì)胞沒有分開,最可能的原因是________________________________________________________________________。解析:甲同學(xué)取材太長(zhǎng),根尖結(jié)構(gòu)中只有根尖分生區(qū)細(xì)胞處于旺盛的分裂狀態(tài),應(yīng)取2mm~3mm為宜,且在解離時(shí)已殺死細(xì)胞,細(xì)胞已死亡,不可能再分離。乙同學(xué)沒有漂洗就染色,殘留在根尖細(xì)胞中的鹽酸會(huì)和堿性染液反應(yīng),影響染色效果。丙同學(xué)沒有壓片,細(xì)胞重疊,透光性差,看不清細(xì)胞。丁同學(xué)解離的溫度低或時(shí)間不夠,應(yīng)在室溫下解離
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