《生物分離與分析技術》考查試題

《生物分離與分析技術》考查試題

一、名詞解釋1.藥物與藥品；◆藥物：指能影響機體生理、生化和病理過程，用以預防、診斷、治療疾病和計劃生育的化學物質。藥物包括有利于健康的催眠藥、感冒藥、退燒藥、胃藥、瀉藥等等各種藥品。藥物可在藥店購買。◆藥品：是指用于預防、治療、診斷人的疾病，有目的地調節(jié)人的生理機能并規(guī)定有適應癥或者功能主治、用法和用量的物質，包括中藥材、中藥飲片、中成藥、化學原料藥及其制劑、抗生素、生化藥品、放射性藥品、血清、疫苗、血液制品和診斷藥品等。

2.國家標準品；◆國家標準品：系用WHO正式頒布的標準品標定國家或某一實驗室的生物標準品，經過協(xié)作研究和檢定，準確標明國際單位（IU），其穩(wěn)定性高，并經國家藥品管理當局批準，成為國家標準品。

3.免疫源性與反應源性◆免疫原性：指某一制品使用后誘生免疫應答反應的能力。在疫苗接種情況下，此種反應導致出現(xiàn)理想的特異體液免疫或細胞免疫應答或二者兼之，一般情況下使被接種個體獲得對相關傳染病的保護?！舴磻裕耗芎吞禺愋钥贵w或致敏淋巴細胞結合，發(fā)生特異性反應的能力。

二、簡答題1.簡述生物分離過程的特點。答：（1）產品豐富：產品的多樣性導致分離方法的多樣性；（2）絕大多數(shù)生物分離方法來源于化學分離；（3）生物分離一般比化工分離難度大：※成分復雜；※懸液中的目標產物濃度低；※生物活性條件相對溫和；※生物產品要求高質量；※獲得高純度的干燥產品；※衛(wèi)生。因此，生物分離過程往往成本很高，在某些產品的生產過程中，分離成本可能占到總成本的80％以上。（補充：常無固定操作方法可循；生物材料組成非常復雜；分離操作步驟多，不易獲得高收率；培養(yǎng)液（或發(fā)酵液）中所含目的物濃度很低，而雜質含量卻很高；分離進程必須保護化合物的生理活性；生物活性成分離開生物體后，易變性、破壞；基因工程產品，一般要求在密封環(huán)境下操作。）

2.簡述超臨界流體萃取的原理及其特點。答：超臨界流體萃取是利用超臨界流體具有的類似氣體的擴散系數(shù)，以及類似液體的密度（溶解能力強）的特點，利用超臨界流體為萃取劑進行的萃取單元操作。利用超臨界流體的特殊性質，使其在超臨界狀態(tài)下，與待分離的物料接觸，萃取出目的產物，然后通過降壓或升溫的方法，使萃取物得到分離。其特點是密度接近液體，萃取能力強；粘度接近氣體，傳質性能好；且安全、無毒、產品分離簡單，但設備投資較大。

3.常用的蛋白質沉淀方法有哪些？簡述其作用機理。（１）有機溶劑法：破壞蛋白質分子的水化層，使之聚集成更大的分子團而沉淀。（２）鹽析：破壞蛋白質分子水化層，電荷中和，使之聚集成更大的分子團。（３）化學沉淀法：通過化學試劑與目的產物形成新的化合物，改變溶解度而沉淀。

4.何謂ELISA？簡述其分析過程。答：ELISA即酶聯(lián)免疫吸附測定，是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用結合起來，靈敏性很高的一種新型的免疫酶測定技術。ELISA過程是在一種固相載體——聚苯乙烯微量滴定板中進行的，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性?？乖皆诠滔噍d體上被稱為包被，加待測抗體，再加相應酶標記抗體，生成“抗原-待測抗體-酶標記抗體”的復合物，再與該酶的底物反應生成有色產物，待測抗體的定量與有色物質產生成正比，因此借助分光分度儀計測定其吸光度，可計算出抗體的量。

5.結合SDS電泳的分離原理說明未知蛋白質分子量的測定方法。答:SDS是凝膠電泳的一種，其分離原理是基于不同分子量的蛋白質（亞基）在電場中的遷移率不同，因此利用該技術測定未知蛋白質（亞基）的分子量是十分方便的，具體的方法是利用標準分子量MARK，與樣品一同電泳，染色后根據(jù)標準分子MARK中已知分子量蛋白質的遷移率與其分子量的對數(shù)值作圖，可得一標準曲線并擬合方程，再結合未知蛋白質的遷移率即可計算得到大致的分子量。

6.常用的層析方法有哪些？請敘述其分離原理。⑴離子交換層析（IEC）基本原理：通過帶電的溶質分子與離子交換劑中可交換的離子進行交換，從而達到分離的目的。⑵疏水色譜（HIC）基本原理：主要是利用蛋白質分子表面上的疏水區(qū)域和介質中的疏水基團之間的相互作用，無機鹽的存在能使相互作用力增強。⑶親和層析（AC）基本原理：是利用固定化配基與目的蛋白質之間特異的生物親和力進行吸附，如抗體與抗原、受體與激素、酶與底物之間的作用。⑷凝膠過濾基本原理：是以具有大小一定的多孔性凝膠作為分離介質，小分子能進入孔內，在柱中緩慢移動，而大分子不能進入孔內，快速移動，利用這種移動差別可使大分子與小分子分開。

7.何謂萃取的分配系數(shù)？其影響因素有哪些？分配系數(shù)：在一定溫度、一定壓力下，某一溶質在互不相溶的兩種溶劑間分配時，達到平衡后，在兩相中的濃度之比為一常數(shù)，這個常數(shù)稱為分配系數(shù)。乳化作用。pH值：影響弱酸或弱堿藥物的分配系數(shù)和藥物的穩(wěn)定性。