POCT檢測技術(shù)與相關(guān)儀器

POCT檢測技術(shù)與相關(guān)儀器-標(biāo)準化文件公布號：〔9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII10POCT概述POCT的概念、根本原理及主要技術(shù)POCT是指在病人旁邊分析病人標(biāo)本的分析技術(shù)，或者說只要測試不在主試驗POCT?！癙OCT”的組成包〔point)、保健、照料〔care〕、檢驗、試驗〔testing〕，point-of-caretesting英文字面的意思是在受治療者現(xiàn)場的保健檢驗。POCT的根本原理是：把傳統(tǒng)方法中的相關(guān)液體試劑浸潤于濾紙和各種微孔膜的吸水材料中，成為整合的枯燥試劑塊，然后將其固定于硬質(zhì)型基質(zhì)上，成為各種形式的診斷試劑條；或把傳統(tǒng)器微型化，操作方法簡潔化，使之成為便攜式和手掌式的設(shè)備；或?qū)⑸鲜鰞烧哒蠟榻y(tǒng)一的系統(tǒng)。POCT主要技術(shù)包括：簡潔顯色〔干化學(xué)法測定〕技術(shù)將多種反響試劑枯燥、固定在紙片上，加上檢驗標(biāo)本〔全血、血清、血漿、尿液等〕后產(chǎn)生顏色反響，用肉眼觀看定性或儀器檢測(半定量)。多層涂膜〔干化學(xué)法測定〕技術(shù)多層涂膜技術(shù)是從感光膠片制作技術(shù)移植而來的。將多種反響試劑依次涂布在片基上，制成干片，用儀器檢測，可以準確定量。免疫金標(biāo)記技術(shù)膠體金顆粒具有高電子密度的特性，金標(biāo)蛋白結(jié)合處，在顯微鏡下可見黑褐色顆粒，當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的標(biāo)記處大量聚攏時，肉眼可見紅色或粉紅色斑點，這一反響可以通過銀顆粒的沉積被放大。該類技術(shù)主要有斑點免疫滲濾法〔DIGFA〕和免疫層析法〔ICA〕。pg/ml為單位的檢測板條上單個或多個標(biāo)志物。檢測系統(tǒng)通常由熒光讀數(shù)儀和檢測板組標(biāo)曲線，可檢測未知樣本中分析物的濃度。生物傳感器技術(shù)利用離子選擇電極，底物特異性電極，電導(dǎo)傳感器等特定的生物檢測器進展分析檢測。該類技術(shù)是酶化學(xué)、免疫化學(xué)、電化學(xué)與計算機技術(shù)結(jié)合的產(chǎn)物。生物芯片技術(shù)生物芯片是最進展起來的技術(shù)。其特點是在小面積的芯片上同時測定多個工程。生物芯片可分基因芯片、蛋白質(zhì)芯片和細胞芯片。它們具有高靈敏度、分析時間短、能同時檢測的工程多等特點。紅外和遠紅外分光光度技術(shù)此類技術(shù)常用于經(jīng)皮檢測儀器，用于檢測血液中血紅蛋白、膽紅素、葡萄糖等成分。這類床邊檢驗儀器可連續(xù)監(jiān)測病人血液中的目的成分，無需抽血，可避開抽血可能引起的穿插感染和血液標(biāo)本的污染，降低每次檢驗的本錢和縮短報告時間。其他技術(shù)POCT的特點及與傳統(tǒng)試驗室檢查的不同POCT的主要特點就是，可以快速地獲得牢靠的檢驗結(jié)果，從而提高病人的臨床醫(yī)療效果。簡潔的說，試驗儀器小型化，操作方法簡潔化，結(jié)果報告即時化。POCT的主要不同點比較工程 臨床試驗室測試 POCT周轉(zhuǎn)時間慢快標(biāo)本鑒定簡單簡潔標(biāo)本處理通常需要不需要血標(biāo)本血清、血漿多為全血校正頻繁不頻繁試劑需要配制隨時可用消耗品相對少相對多檢測儀簡單簡潔對操作者的要求專業(yè)人員一般人亦可以靈敏度相對高相對低每個試驗花費低高試驗結(jié)果質(zhì)量高一般POCT依據(jù)用途來分，可以分為血液、快速血糖檢測儀、電解質(zhì)分析狀腺激素檢測儀、酶聯(lián)免疫檢驗儀、放射免疫等種類繁多的儀器。依據(jù)其大小和重量，可以將監(jiān)測離體血液標(biāo)本的，分為桌面〔benchtop〕型、便攜型、手提式及手提式一次性使用型。最近，一種被稱為驗功能，通過標(biāo)準或定制的閱讀器獵取監(jiān)測結(jié)果，有人又稱之為CD試驗室。物傳感器裝置、微制造裝置以及其他多孔材料等多種裝置。POCTPOCT在醫(yī)院外進展。一些特別工程甚至在家里或在某些特別的場合〔如室外、現(xiàn)場〕均可檢測，極大地便利了病人和一些特別人群的需要。糖尿病診治方面的應(yīng)用各種快速血糖儀、多種無創(chuàng)傷性血糖檢測儀的使用使報告時間(TAT)大大縮短，是臨床、患者家庭最常用的檢測儀器；全定量免疫熒光檢測儀檢測糖尿病患者的糖化血紅蛋白與尿微量白蛋白等指標(biāo)，有助于早期覺察糖尿病腎病，有利于患者病情的估量與長期監(jiān)測；傳感器相關(guān)檢測儀可檢測患者血氣及電解質(zhì)等指標(biāo)；干化學(xué)可檢測患者血液中各種生化指標(biāo)。心血管疾病方面的應(yīng)用急性心肌梗死〔AcuteMyocardialInfarction，AMI〕發(fā)病急，嚴峻影響到患者的生命安全。POCTAMICRPI(cTnI)、肌紅蛋白〔Mb〕、肌酸激酶同工酶MB(CK-D-二聚體、腦鈉肽(BNP)、CRP；利用干片式血凝進展凝血酶原時間測定、活化局部凝血活酶時間〔APTT〕測定；干化學(xué)可檢測血液〔AST〕、乳酸脫氫酶〔LDH〕、肌酸激酶〔CK〕等生化指標(biāo)的檢測；傳感器相關(guān)可檢測患者血氣及電解質(zhì)等指標(biāo)。感染性疾病中的應(yīng)用POCT菌培育條件的基層醫(yī)院、民營診所、社區(qū)保健所進展微生物的快速檢測，也可〔HBsAg、HCV、HIV、TP〕、內(nèi)鏡檢查前的病毒性肝炎篩選等。發(fā)熱性疾病方面的應(yīng)用患者感染病原體的性質(zhì)〔細菌或病毒〕比單一檢測更具特異性。ICU病房內(nèi)的應(yīng)用器可定期獵取待測指標(biāo)的數(shù)據(jù)。兒科診療中的應(yīng)用適合兒童的診斷行為需要輕松、易用、無創(chuàng)傷或創(chuàng)傷性小、樣品需求量少、無需預(yù)處理、快速得出結(jié)論等要素，以縮短就診周期，還需要關(guān)注父母的POCT陪伴在孩子身邊，隨時了解檢驗數(shù)據(jù)的含義，更好地與醫(yī)護人員溝通，有利于患兒疾病的診治。循證醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用從循證醫(yī)學(xué)的角度來評價，POCT。循證醫(yī)學(xué)〔Evidencebasedmedicine，EBM〕POCT儀器體積小、攜帶便利、簡潔使用，操作人員可以在試驗室外的任何場所進展，快速、便利地獵取患者某些與疾病相關(guān)的數(shù)據(jù)，這正是循證醫(yī)學(xué)所要到達的主要目的——有據(jù)可循。醫(yī)院外的應(yīng)用各種免疫金標(biāo)技術(shù)相關(guān)的POCT儀、傳感器技術(shù)相關(guān)的POCT儀、干化學(xué)〕、出入境檢疫、禁毒、戒毒中心、公安部門和運發(fā)動尿液檢測等醫(yī)院外的很多部門和場所廣泛應(yīng)用。POCT1.POCTPOCTPOCT2023POCTNCCLS1995AST2-PNCCLSPOCT，POCT日趨得到保障。文件對有關(guān)試驗室認可、POCT量評估、方法學(xué)評價、結(jié)果記錄及報告等均有明確規(guī)定。在我國，POCTPOCT方法〔試行草案〕POCTPOCTPOCTPOCT理、床邊檢驗的操作程序、結(jié)果的報告、以及費用方面的問題等都有具體的規(guī)定與說明。評估．費用問題。POCT單個檢驗費用，高于常規(guī)性檢驗。2.POCT用、不需要額外人工處理標(biāo)本、不需要格外準確的加樣，結(jié)果準確、并能自動保存全部記錄的微型移動系統(tǒng)。應(yīng)用無創(chuàng)性/少創(chuàng)性技術(shù)的POCT儀器將是POCT的另一個進展方向。POCTPOCTPOCTPOCT〔最主要是沒有簡單的液路系統(tǒng)〕，儀器的根本構(gòu)造包括：電源開關(guān)。狀態(tài)燈。池?！?〕(熱敏)打印機、顯示器。顯示器和打印機用于輸出結(jié)果。鍵盤。鍵盤屬于輸入設(shè)備。閱讀儀及光源等〕。樣本測量室的光源，可以是一般的檢測光源，也可能是激發(fā)光的光源。閱讀儀可以幫助掌握、簡化局部分析反響，還可以整合數(shù)據(jù)的處理、存儲功能。比方，校正曲線計算法所使用的校正曲線，質(zhì)量掌握限度和結(jié)果數(shù)據(jù)存儲等。帶有微處理器的閱讀儀甚至可以對數(shù)據(jù)進展校正，然后解釋結(jié)果。裝上都帶有獨特的條碼，其中包含有試劑的各種信息；有的儀器還帶有密碼牌，用于校準及質(zhì)量掌握。所以，POCT/密碼牌閱讀器。及儲存中心，增加了儲存質(zhì)控數(shù)據(jù)或患者數(shù)據(jù)及其他數(shù)據(jù)處理功能。及儲存中心，增加了儲存質(zhì)控數(shù)據(jù)或患者數(shù)據(jù)及其他數(shù)據(jù)處理功能。〔帶有樣本感應(yīng)器或限流閥以及樣本注入口等〕。一次性裝置又可以分成單一或多墊試劑條〔包括單層、多層試紙墊〕、酶層析裝置、免疫橫流〔層析〕分析裝置、卡片式裝置、微制造裝置、生物傳感器裝置等。4.2.2多層涂膜技術(shù)相關(guān)POCT(1)19-1干片中的涂層按其功能分干片中的涂層按其功能分4層：分布層〔有時又分成集中層和遮擋或凈化劑層〕、試劑層、指示劑層、支持層。小顆粒，還可以讓大分子〔如蛋白質(zhì)〕滯留。分布層中朝下的一面參加反光物質(zhì)如Ti02和BaS04來掩蓋病人標(biāo)本中的有色物質(zhì)，使反射光度計不受其影響。同時這些反光化合物也給干片底層的指示劑層供給反射背景。反響所需干試劑，把標(biāo)本中的待測成分轉(zhuǎn)變成可定量物質(zhì)，同時去除干擾。指示劑層 生成一種可以定量且與待測物含量直接成比例的產(chǎn)物。指示劑層中的色原含量用反射光度計讀取。用。(3)影響因素及質(zhì)量掌握偏差。6維護，主要是光路的清潔和校正以及干片貯存盒內(nèi)的枯燥劑和保濕劑的準時更換等。4.2.3免疫金標(biāo)記技術(shù)相關(guān)POCT19-4.119-4.1所測工程大多為定性或半定量的結(jié)果，不需要特別的儀器。局部一般由電腦、輸入輸出接口、模數(shù)轉(zhuǎn)換器、掃描掌握電路、光電轉(zhuǎn)換電〔如反射型光纖傳感器〕，才能解決金標(biāo)定量測試的問發(fā)出的光經(jīng)發(fā)送光纖射向被測體的外表，反射光由接收光纖收集，并傳送到光探測器轉(zhuǎn)換成電信號輸出。另外該儀器還設(shè)計了一系列軟件，以提高檢測結(jié)果的牢靠性和準確性。如依據(jù)水的滲透規(guī)律，編制特別的軟件，補償滲透不均勻引起的干擾信號；依據(jù)不同的測試條、不同的批號，編制軟件嚴格掌握測試時型來表示，并輸入電腦，每次測定時，電腦即可自動將光密度值轉(zhuǎn)換成濃度值并顯示。原理，測量環(huán)境的光照變化、測量筆尖密封性的變化及其他物理條件〔溫度、水等液體〕變化均會對結(jié)果產(chǎn)生干擾。正確的定標(biāo)是確保儀器重復(fù)準確讀數(shù)的必要步驟。對不同測量條件和筆尖各種變化可能引起各種誤差的調(diào)整，可以通過定標(biāo)〔散射光調(diào)整和空白調(diào)零程序〕來完成。試劑盒內(nèi)含陽性定值范圍的質(zhì)控物，用于試劑穩(wěn)定性及試驗的質(zhì)量掌握。原理，測量環(huán)境的光照變化、測量筆尖密封性的變化及其他物理條件〔溫度、水等液體〕變化均會對結(jié)果產(chǎn)生干擾。正確的定標(biāo)是確保儀器重復(fù)準確讀數(shù)的必要步驟。對不同測量條件和筆尖各種變化可能引起各種誤差的調(diào)整，可以通過定標(biāo)〔散射光調(diào)整和空白調(diào)零程序〕來完成。試劑盒內(nèi)含陽性定值范圍的質(zhì)控物，用于試劑穩(wěn)定性及試驗的質(zhì)量掌握。4.2.4免疫熒光測定技術(shù)相關(guān)POCT參加了溶血緩沖液后的全血混勻時，熒光標(biāo)記的抗HbA1c抗體與血樣中的HbA1cHbA1c〔熒光標(biāo)記抗體〕競爭性地結(jié)合，記抗體結(jié)合的時機就越少，最終讀出檢測板所示熒光強度。熒光信號強弱與HbA1cHbA1c；另一個光學(xué)系統(tǒng)檢測總血紅蛋白濃度。儀器將這兩個參數(shù)轉(zhuǎn)換為比值〔Hb〕HbA1cHbA1c19-5)?！睧u〕獒合物作熒光增加液，使熒光信號增加，有利于熒光測量。4.2.5葡萄糖酶電極傳感器相關(guān)的POCT4.2.5葡萄糖酶電極傳感器相關(guān)的POCT電化學(xué)酶傳感器法微量血快速血糖測試儀，承受生物傳感器原理將生物敏感元件酶同物理或化學(xué)換能器相結(jié)合，對所測定對象作出準確定量反響，并借助現(xiàn)代電子技術(shù)將所測得信號以直觀數(shù)字形式輸出的一類型分析裝置，即承受酶法葡萄糖分析技術(shù)、并結(jié)合絲網(wǎng)印刷和微電子技術(shù)制作的電極，以及智能化儀器的讀出裝置，組合成微型化的血糖。依據(jù)所用酶的不同，此類儀器可以分為承受葡萄糖脫氫酶和承受葡萄糖氧化酶技術(shù)的兩大類。酶電極的組成〔葡萄糖氧化酶電極為例〕包括印刷電極、電極底片、葡萄糖氧化酶及固定保護層。電極的測試原理為：在印刷電極的兩端施加肯定的恒定電壓，當(dāng)被測血樣滴在電極的測試區(qū)后，電極上的固定的葡萄糖氧化酶與血中的葡萄糖發(fā)〕，酶電極的響應(yīng)電流與被測血樣中的葡萄糖濃度呈線性關(guān)系。血糖儀就是依據(jù)這一關(guān)系來計算并顯示血標(biāo)本中的葡萄糖濃度值的。羅氏優(yōu)越血糖儀所用的ADVANTAGEⅡ可吸血試紙條利用了葡萄糖脫氫酶法的原理和鈀電極的技術(shù)，并設(shè)置了密碼牌，自動校準血糖儀和試紙。試紙條構(gòu)造包括聚酯薄膜頂膜、底膜，標(biāo)本采集區(qū)，試劑區(qū)、鈀電極等。測試時，先插入試紙，滴血在血糖儀以外的試紙端上，滴血后自動起反響計時，不必抹去血滴，再次插入試紙，反響產(chǎn)生的電流轉(zhuǎn)換為血糖濃度數(shù)字而顯示在屏幕上。由于承受葡萄糖脫氫酶法，反響過程中不需氧直接參與反響，消退了血氧分壓產(chǎn)生的偏差。承受承受葡萄氧化酶生物傳感器技術(shù)的也有不少，ONETOUCH強生穩(wěn)豪血糖儀是比較具有代表性的一種。其試紙工作原理為：使用一種被稱為計時安培電流法的電化學(xué)技術(shù)來測定病人血樣中的葡萄糖濃度。當(dāng)血樣到達試紙的頂端血液中的葡萄糖進展反響，從而使電子從葡萄糖流向化學(xué)中間體。施加在試紙上的電壓促使電子從化學(xué)中間體流向電極。血糖儀通過電極來測量電子的流度。度。常監(jiān)測，而不能作為準確診斷糖尿病的工具。4.2.6熒光傳感器相關(guān)的POCT儀器的根本構(gòu)造包括電源開關(guān)、電池、顯示屏、內(nèi)置打印機、鍵盤、測〕、條形碼閱讀器、數(shù)據(jù)傳輸系統(tǒng)、數(shù)據(jù)存儲系統(tǒng)、一次性測試片〔測試片上多帶有樣本感應(yīng)器或限流閥以及樣本注入口等〕，為保證結(jié)果準確，儀器還配備定標(biāo)氣體及大氣壓測量裝置等。OPTICCA血氣的檢測技術(shù)包括光學(xué)熒光法和光學(xué)吸取反射法，運用了固態(tài)一次性的熒光傳感器測試卡。熒光傳感器測試卡構(gòu)造示意圖pO2傳感器電極工作原理示意圖pO2OPTICCApO2〔tHb〕和氧的飽和度〔SO2〕進展分析。因此一個樣品可在同一個傳感器上測量三個參數(shù)