常見微生物指標檢測-菌落總數(shù)的測定（食品微生物檢驗技術(shù)課件）

醬油中細菌總數(shù)的測定細菌檢測的意義

細菌總數(shù)是指食品檢驗經(jīng)過處理，在一定條件下（培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度和時間、pH、需氧性質(zhì)等）培養(yǎng)后，所得1mL（g）檢驗中所含細菌菌落總數(shù)。

食品菌落總數(shù)可作為判定食品被污染程度的指標，同時，也可以用于觀察細菌在食品中繁殖的動態(tài)，以便對被檢樣品進行衛(wèi)生學(xué)評價時提供依據(jù)。一、實驗?zāi)康?、學(xué)習(xí)食品中細菌總數(shù)測定的技術(shù)方法；2、掌握食品細菌總數(shù)的結(jié)果報告方式。1、儀器：電熱恒溫培養(yǎng)箱、恒溫水浴鍋、托盤天平、電爐、滅菌吸管、滅菌三角瓶、滅菌平皿、滅菌試管、試管架、酒精燈、75%酒精棉球、記號筆；2、試劑：75%乙醇、生理鹽水或無菌水、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基等

二、實驗材料1、菌落總數(shù)檢驗程序三、實驗方法（1）以無菌操作，將檢樣25mL放于含有225mL滅菌蒸餾水水的三角錐瓶中，搖勻，做成1：10的均勻稀釋液。（2）另取1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌水（注意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液，下同），振搖試管混合均勻，做成1：100的稀釋液。（3）另取1ml的滅菌吸管，按上項操作順序作10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用1支1ml滅菌吸管。2、檢樣稀釋及培養(yǎng)（4）根據(jù)食品衛(wèi)生標準要求或?qū)z樣污染情況的估計，選擇2~3個適宜稀釋度，本次實驗分別選取1：10；1：100；1：1000三個稀釋液，以吸取該稀釋度的吸管移1ml稀釋液于滅菌平皿內(nèi)，每個稀釋度作兩個平皿。（5）稀釋液移入平皿后，應(yīng)及時將涼至460C營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基注入平皿15ml~20mL，并轉(zhuǎn)動平皿使混合均勻，同時將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1ml稀釋液（不含樣品）的滅菌平皿內(nèi)作空白對照。（6）等瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置（36±1）0C恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)（48±2）h取出，計算平板內(nèi)菌落數(shù)目乘以倍數(shù)，即得1g（1mL）樣品所含菌落總數(shù)。（1）菌落計數(shù)方法做平板菌落計數(shù)時，可用肉眼觀查，必要時用放大鏡檢查，以防遺漏。在記下各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。3、菌落計算方法（2）菌落計數(shù)的報告醬油中細菌總數(shù)結(jié)果記錄稀釋度10-1

10-2

10-3平板121212菌落數(shù)＞300＞300