臨床微生物標本的采集與送檢2011.91

臨床微生物標本的采集與送檢主

要內(nèi)容標本采集的意義和原則標本的運送與拒收原則血液標本采集尿標本采集糞便標本采集痰標本采集咽拭子標本采集臨床感染性疾病的診斷和治療應(yīng)用良好的檢測技術(shù)和方法，提供準確的結(jié)果或報告正確規(guī)范的采集和運送標本正確地選擇檢查目的和方法

標本采集是指采集患者體內(nèi)的一小部分血液、體液、排泄物、分泌物以及組織細胞等標本進行檢驗，以反映機體正常的生理現(xiàn)象和病理改變。

標本采集

標本采集標本采集正確與否與檢驗結(jié)果的準確性有密切的關(guān)系因此，我們應(yīng)掌握正確的標本采集方法。協(xié)助明確疾病診斷推測病程進展

制定治療措施觀察病情標本采集的意義

遵照醫(yī)囑充分準備

嚴格查對

正確采集

及時送檢標本采集的原則一、按醫(yī)囑采集標本醫(yī)生填寫檢驗申請單檢驗單應(yīng)標明姓名、性別、住院號、床號、標本種類、檢驗?zāi)康暮退蜋z日期等。二、評估(充分準備、嚴格查對)Ⅰ采集標本前應(yīng)先評估患者的病情、心理反應(yīng)與合作程度。Ⅱ根據(jù)檢驗?zāi)康倪x擇相應(yīng)的標本容器Ⅲ在容器外貼上檢驗單的副聯(lián)二、評估(充分準備、嚴格查對)Ⅳ向患者解釋采集標本的目的方法、以消除顧慮，取得合作。Ⅴ采集時認真核對床號、姓名、檢驗項目等三、掌握正確的標本采集方法

為保證標本的質(zhì)量，獲得陽性結(jié)果，應(yīng)掌握正確的標本采集方法、采集量和采集時間并應(yīng)及時送檢，特殊標本還需注明采集時間。四、及時送檢采集標本后應(yīng)及時送檢，一般情況下，用于細菌培養(yǎng)的標本保存時間不應(yīng)超過24h，最好2h內(nèi)能送檢，越快越好，以保證結(jié)果的準確性。標本的運送原則①所有的標本都必須立即送往實驗室，最好在2h內(nèi),保存時間不應(yīng)超過24h.②最佳的臨床標本送檢首先取決于所獲取標本的量.量少的標本應(yīng)在采集后15-30min內(nèi)送檢.③對環(huán)境敏感的微生物如志賀菌、奈瑟氏菌和流感嗜血桿菌（對低溫敏感）應(yīng)立即處理，禁止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、內(nèi)耳道標本。標本的拒收原則無標簽不檢測，并與送檢的醫(yī)生和護士聯(lián)系。送檢延誤

不接收，提醒送檢者，要求重新采集。送檢容器不當或滲漏不接收，告知送檢者，要求重新采集。標本的拒收原則標本不符合要求

不接收，聯(lián)系送檢者，指出不符合要求之處，要求重新采集符合試驗要求的標本.同一天內(nèi)收到同一檢測目的的相同標本（血液標本除外）不檢測，與送檢者聯(lián)系并說明標本重復(fù)不予處理，并在報告單上注明標本拒收原則制訂的目的我們必須重視標本的質(zhì)量，對不規(guī)范采集、保存和運送的標本要采取糾正措施。如果檢測不合格的標本，那么得出的結(jié)果會給醫(yī)生提供錯誤的信息，導(dǎo)致誤診和治療不當。因此，實驗室必須制訂并嚴格執(zhí)行標本接收和拒收準則

臨床常見標本血液（生化、免疫及微生物檢驗）尿液糞便痰及上呼吸道標本穿刺液標本（腦脊液、膽汁、胸腹水等）膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標本生殖道標本組織標本血標本檢驗的意義血液是臨床最常見的檢驗項目它可以反映血液系統(tǒng)本身的病變還可判斷病人病情進展程度為治療疾病提供參考。血標本采集方法（一）靜脈血標本（最常用）（二）動脈血標本(血氣分析)（三）毛細血管標本（血常規(guī)）靜脈血標本分類及目的全血標本血清標本血培養(yǎng)標本血沉、血常規(guī)、凝血機制檢測等血清酶、脂類、電解質(zhì)、肝功能血中的致病菌靜脈血采集操作步驟及要點

攜用物至床邊，核對床號、姓名、解釋戴手套，選擇靜脈，常規(guī)系止血帶、消毒皮膚，囑患者握拳行靜脈穿刺、取血、松止血帶、囑患者松拳、按壓針眼、迅速拔針穿刺點按壓2～3min血液注入標本瓶內(nèi)方法血清標本：

取下針頭，將血液順試管壁緩慢注入干燥試管（最常用）內(nèi)。

注入血標本的方法注意事項（1）嚴禁在輸液、輸血的針頭處抽取標本，以免影響檢驗結(jié)果。（最好在對側(cè)采集）注意事項（2）若同時抽取幾個項目的血標本，一般注入容器的順序為：血培養(yǎng)瓶→抗凝瓶→干燥試管.動作要迅速準確，避免溶血。血標本的微生物學(xué)檢查1.采血時間及次數(shù)：一般應(yīng)在抗生素治療前，發(fā)熱初期或高峰時抽血。傷寒患者應(yīng)在發(fā)熱1-2周內(nèi)抽血化膿性腦膜炎、鼠疫或野兔熱患者應(yīng)在發(fā)熱1-2d內(nèi)抽血急性敗血癥應(yīng)在24小時內(nèi)抽血3次或更多次，并可在不同部位，如左、右手臂或頸部

采血時間及次數(shù)不明原因發(fā)熱應(yīng)不定期多次、多部位采樣送檢。24小時內(nèi)不超過3次，如培養(yǎng)陰性應(yīng)繼續(xù)采樣送檢

急性心內(nèi)膜炎應(yīng)在治療前1-2小時內(nèi)分別在3個不同部位抽血，分別進行培養(yǎng)。亞急性心內(nèi)膜炎及布魯菌感染的患者，除在發(fā)熱采血外，并要多次抽血（24h內(nèi)3-4次）和增加抽血量（可增至10ml）。

血標本2.抽血部位及抽血量

以無菌方法從患者肘靜脈采血。采血量以培養(yǎng)基的1/5~1/10為宜，成人一次采血5-10ml，兒童3-5ml，嬰兒為1-2ml。血液抽出后，立即以無菌手續(xù)注入血培養(yǎng)瓶，充分混合后送檢。骨髓標本的微生物學(xué)檢查

采集部位：骨髓穿刺法從髂骨采集標本。

采集時間：在用藥前、發(fā)熱初期或高熱期

當骨髓炎時或長期使用抗菌藥物患者，抽取骨髓培養(yǎng)陽性率遠高于血液培養(yǎng)

全自動血培養(yǎng)儀BacT/Alert120培養(yǎng)基的選擇：

普通需氧培養(yǎng)瓶：采血量4ml,用于未使用抗菌素患者的需氧培養(yǎng)。主要用于小兒。

建議不管患者是否使用過抗生素，是做細菌培養(yǎng)還是真菌培養(yǎng)成人采血量5ml小兒

采血量4ml注意事項

①嚴格做好患者抽血部位的無菌操作。嚴禁在輸液、輸血的針頭處抽取標本，以免影響檢驗結(jié)果（要在對側(cè)采集）。②注入標本后的血培養(yǎng)瓶務(wù)必立即送至臨床細菌室，如因某種原因不能立即送檢時，應(yīng)將已接種樣本的培養(yǎng)瓶放在室溫，切勿放冰箱存放。

注意事項③每次領(lǐng)培養(yǎng)瓶不宜過多，以防過期，未使用的培養(yǎng)瓶亦應(yīng)室溫保存（15-30℃），切勿放冰箱保存。

二、尿液標本的采集

留取尿液標本作物理、化學(xué)、細菌和顯微鏡等檢查以助診斷和觀察療效。尿液標本采集時間：

一般原則

通常應(yīng)采集晨起第一次尿液送檢。原則上應(yīng)選擇在抗菌藥物應(yīng)用之前采集尿液。尿液標本的采集時間結(jié)核分枝桿菌感染

留取晨尿或24小時尿的沉渣部分10-15ml作涂片檢查，若為培養(yǎng)，患者應(yīng)停藥1-2天后再采樣，以提高陽性率

沙門菌、鉤端螺旋體感染

感染后2周左右采集

采集方法

中段尿采集方法（最常用）集尿法結(jié)核分枝桿菌檢查時，可用一清潔容器，留24小時尿取其沉渣10-15ml送檢導(dǎo)尿法、腎盂尿采集法、膀胱穿刺采集法中段尿采集方法

女性：成年女性外陰部先以肥皂水清洗，再以無菌水沖洗，然后排尿棄去前段尿，留取中段尿10ml左右于無菌試管內(nèi)送檢

男性：先用肥皂水清洗尿道口，后用清水沖洗，留取中段尿

兒童、嬰兒：先以無菌生理鹽水清洗外陰部或外生殖器，將無菌試管對準尿道口，待尿排出后送檢

注意事項

嚴格進行無菌操作，因為尿液標本的采集和培養(yǎng)中最大的問題是污染雜菌

通常應(yīng)取晨起第一次尿液送檢

多數(shù)藥物均通過尿液排泄，因此采集尿液應(yīng)在用藥前進行

三、糞便標本的采集收集糞便標本，做實驗室檢查，有助于評估病人排泄功能及準確評估疾病。糞便標本采集時間：

1．采樣原則

腹瀉病人應(yīng)在急性期采集（3天以內(nèi)），以提高檢出率，亦最好在用藥之前。2．沙門菌感染

腸熱癥在2周以后；胃腸炎病人在急性期，早期采集新鮮糞便

采集方法

自然排便采集法

自然排便后，挑取其膿血、粘液部分2-3g，液狀糞便取絮狀物2-3ml，盛于滅菌容器內(nèi)或保存液中送檢

直腸拭子方法

如不易獲得糞便時，或排泄困難的患者及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無菌棉拭子用生理鹽水濕潤后，插入肛門內(nèi)4-5cm（幼兒2-3cm）輕輕轉(zhuǎn)動取出，插入無菌試管內(nèi)送檢。注意事項

雖糞便含有多種雜菌，但應(yīng)盡量采用無菌容器（一次性無菌平皿）。

為提高檢出率，要采集新鮮糞便作培養(yǎng)，且應(yīng)挑取其膿血、粘液部分。

四、痰及上呼吸道標本的采集采集痰標本作細菌培養(yǎng)，或涂片后經(jīng)特殊染色以檢查細菌、真菌或抗酸桿菌等，以助診斷；從咽部及扁桃體采取分泌物作細菌培養(yǎng)或病毒分離痰及上呼吸道標本

采集時間:痰：一般以晨痰為好；支氣管擴張癥患者，清晨起床后進行體位引流，可采集大量痰標本。咽拭標本：時間上雖無嚴格限制，但應(yīng)于抗菌藥物治療前為好。咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后采集為宜

采集方法：

痰液標本：

自然咳痰法：患者清晨起床后，先用朵貝爾氏液（復(fù)方硼砂溶液）漱口，再以開水或生理鹽水漱口，以減少口腔常居菌群的污染，然后用力自氣管深部咳出第一口痰于無菌痰懷內(nèi)送檢

采集方法：小兒取痰法：用壓舌板向后壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上，送檢

采集方法：

上呼吸道標本（咽拭子）

采集上呼吸道標本通常采用無菌棉拭子。采集前患者應(yīng)用開水或生理鹽水反復(fù)漱口，由檢查者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，將棉拭子通過舌根到咽后壁或腭垂的后側(cè)，涂抹數(shù)次，但拭子要避免接觸口腔和舌粘膜

注意事項：

1．

采集標本以清晨為佳，以減少口腔正常菌群的污染，采集前先用漱口液充分漱口。2．

做結(jié)核分枝桿菌和真菌培養(yǎng)的標本若不能及時送檢，應(yīng)放4℃冰箱保存，以免雜菌生長。（血培養(yǎng)瓶室溫）3．

作結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多或留取24小時痰液，以提高陽性檢出率。穿刺液標本

腦脊液

采集時間：

懷疑為腦