第29章 生殖免疫及其免疫檢測

臨床免疫學檢驗技術第二十九章生殖免疫及其免疫檢測王芳目錄第一節(jié)概述第二節(jié)常用的生殖相關免疫檢驗項目及其檢測方法和臨床意義人類生殖過程圖示生殖免疫學是近年來發(fā)展起來的生殖生物學與免疫生物學交叉的邊緣學科，著眼于研究生殖醫(yī)學領域免疫學問題。主要包括神經(jīng)-生殖內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)、母-胎免疫調(diào)節(jié)及生殖免疫調(diào)節(jié)等方面。第一節(jié)概述重點提示生殖道組織的局部免疫妊娠與免疫自然流產(chǎn)與免疫性激素與免疫一、生殖道組織的局部免疫

（一）宮頸與陰道免疫1.抗原提呈細胞（1）性質(zhì)：樹突狀巨噬細胞（2）分布：宮頸和陰道上皮層2.T細胞（1）成分：主要為CD8+T細胞（2）分布：宮頸天然上皮、轉(zhuǎn)化區(qū)上皮細胞3.B細胞（1）分布：陰道、宮頸陰道部、宮頸管組織（2）分泌抗體：分泌型IgA一、生殖道組織的局部免疫

（二）子宮局部免疫1.T細胞（1）免疫營養(yǎng)作用（2）免疫殺傷作用2.巨噬細胞

主要的抗原提呈細胞3.大顆粒淋巴細胞（LGL）

一、生殖道組織的局部免疫

（三）卵巢免疫1.免疫細胞（1）巨噬細胞（2）淋巴細胞（3）肥大細胞（4）多形核細胞2.細胞因子（1）胰島素樣生長因子（IGF）（2）轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-β）（3）表皮生長因子（EGF）

二、妊娠與免疫（一）配子免疫1.精子抗原（1）膜抗原（2）結構抗原（3）血型抗原（4）組織相容性抗原（5）精子內(nèi)部各種酶系抗原二、妊娠與免疫2.卵細胞---透明帶抗原由顆粒細胞分泌并包裹于卵細胞膜表面的一層基質(zhì)，為糖蛋白，在受精過程中起重要作用。透明帶抗原可誘發(fā)免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗透明帶抗體，當抗體與透明帶結合可影響卵細胞的受精及著床。二、妊娠與免疫（二）胚胎免疫

胚胎同種抗原（1）定義：來源于胚胎期和胚胎組織的一類抗原。（2）分類：①胚胎同種抗原；②HLA；③AFP

二、妊娠與免疫（三）母體-胎兒免疫

胎兒不被母體所排斥的因素：（1）妊娠期母體的免疫防御反應受到嚴重抑制；（2）胎盤的免疫屏障作用將胎兒抗原封閉起來；（3）母體的抗體及其他免疫因子受到胎盤屏障的阻礙。妊娠與免疫（四）胎盤免疫1.胎盤機械屏障作用；

2.胎盤限制大分子抗原物質(zhì)進入胎兒血液循環(huán)；3.滋養(yǎng)層細胞表達的HLA-G抗原發(fā)揮免疫抑制作用；

4.胎盤分泌多種具有免疫抑制作用的蛋白質(zhì)及激素。三、自然流產(chǎn)與免疫免疫機制非免疫相關免疫相關40%-50%50%-60%染色體異常生殖道解剖異常內(nèi)分泌異常生殖道感染自身免疫型同種免疫型三、自然流產(chǎn)與免疫1.自身免疫型（1）抗磷脂抗體

定義：是一組自身免疫性抗體，包括狼瘡抗凝因子、抗心磷脂抗體、抗磷脂酸絲氨酸抗體、抗磷脂酸抗體等。意義：若陽性，則流產(chǎn)的發(fā)生率高達66%～89%。（2）抗精子抗體作用：阻礙精子獲能；干擾精子穿過卵子透明帶等。三、自然流產(chǎn)與免疫2.同種免疫型（1）組織相容性抗原系統(tǒng)（HLA）與自然流產(chǎn)①HLA-DR,HLA-DQ抗原②滋養(yǎng)層-淋巴細胞交叉反應抗原（TLX）（2）封閉抗體（blockingantibodies，BA）與自然流產(chǎn)BA與母胎界面上來自父系的抗原相結合，阻止母體Th細胞識別胎兒抗原后引發(fā)的對胚胎的攻擊。（3）細胞免疫與復發(fā)性流產(chǎn)Th1/Th2平衡失調(diào)四、性激素與免疫泌乳素孕激素雌激素四、性激素與免疫（一）泌乳素性質(zhì)：垂體激素；分布：以胸腺、卵巢、淋巴細胞為主；作用：促進胸腺內(nèi)T細胞分化成促進B細胞的分化和成熟，也是NK細胞的重要調(diào)節(jié)因子。四、性激素與免疫（二）孕激素孕酮通過識別胎兒來源的抗原，活化γ/δTCR+形成孕酮受體對妊娠的免疫保護作用；孕酮通過PIBF干擾花生四烯酸的代謝和誘導免疫反應向TH2偏移，降低NK細胞活性，有助于妊娠維持。四、性激素與免疫（三）雌激素1.雌激素對免疫系統(tǒng)的作用：

①調(diào)節(jié)T淋巴細胞的生長和分化、增生；

②影響細胞因子的產(chǎn)生；

③刺激B細胞的活化和抗體的產(chǎn)生。2.雌激素受體（estrogenreceptor,ER）第二節(jié)常用的生殖相關免疫檢驗項目及其

檢測方法和臨床意義

重點提示不孕癥的生殖免疫學檢測反復自然流產(chǎn)的免疫學檢測生殖系感染的免疫學檢測生殖系腫瘤的免疫學檢測生殖系內(nèi)分泌功能的免疫學檢測一、不孕癥的生殖免疫學檢測

不孕癥：指婚后未避孕，同居2年未曾受孕者?？咕涌贵w，抗透明帶抗體是其中重要的免疫性因素。一、不孕癥的生殖免疫學檢測（一）抗精子抗體（AsAb）1.抗精子抗體產(chǎn)生機制：

（1）男性抗精子抗體：自身抗體；

（2）女性抗精子抗體：同種異體抗體；2.抗精子抗體類型：

（1）生殖道分泌物中主要為分泌型IgA，血清中以IgG和IgM為主；

（2）臨床上通常檢測的是血清中的IgG。一、不孕癥的生殖免疫學檢測3.抗精子抗體的檢測方法（1）精子凝集試驗原理：精子表面結合了抗體后可相互凝集；檢測方法：明膠凝集法、管板凝集法、圓盤凝集法、毛細管凝集法等；特點：本法特異性差，假陽性發(fā)生率高。精子凝集圖一、不孕癥的生殖免疫學檢測（2）補體依賴性細胞毒試驗及精子制動試驗原理：在補體作用下，精子與抗體結合后不能向前移動；特點：本法僅能檢測作用于精子尾干等的精子抗體，特異性強，敏感性差，假陰性發(fā)生率高。（3）免疫珠結合法原理：用抗人免疫球蛋白抗體包被的聚丙烯酰胺能結合于結合了精子抗體的精子表面，在相差顯微鏡可見此種免疫珠隨精子前進而移動。特點：此法可靠性好但敏感性難以肯定，不能進行定量測定。一、不孕癥的生殖免疫學檢測（4）酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）是不孕不育的一項初篩試驗；敏感性高，重復性好。

人抗精子抗體ELISA試劑盒一、不孕癥的生殖免疫學檢測（二）抗透明帶抗體（AzpAb）1.AzpAb產(chǎn)生機制透明帶具有抗原性，感染或育齡婦女排卵過程中透明帶反復破裂和吸收，機體處于抗原刺激的敏感狀態(tài)，產(chǎn)生AzpAb；2.AzpAb對生殖的影響阻遏精子吸附和穿過透明帶；干擾著床；影響卵細胞發(fā)育和生長。不孕癥的生殖免疫學檢測3.AzpAb的檢測方法（1）ELLSA及BA-ELLSA法：

（2）透明帶沉淀反應（3）放射免疫法（4）間接免疫熒光試驗（5）被動血凝法（6）精子-透明帶結合或穿透試驗二、反復自然流產(chǎn)的免疫學檢測（一）封閉抗體（blockingantibodies）1.定義：是人類白細胞抗（HLA）、滋養(yǎng)層及淋巴細胞交叉反應抗原（TLX）等刺激母體免疫系統(tǒng)所產(chǎn)生的一類IgG型抗體。2.分類：①抗HLA-DR抗體②抗TLX抗體；③抗Fc受體抗體；④抗基因抗體；⑤抗冷B細胞抗體。二、反復自然流產(chǎn)的免疫學檢測3.檢測方法（1）補體依賴性細胞毒試驗女方血清內(nèi)的封閉抗體與男方外周血淋巴細胞結合，在補體作用下致細胞死亡，經(jīng)臺盼藍染色（使死亡細胞著色），顯微鏡下評判結果。（2）單向混合淋巴細胞反應封閉試驗絲裂霉素處理男方淋巴細胞后，分別在含有AB型血清及女方血清的培養(yǎng)條件下與女方淋巴細胞混合培育，3H-胸腺嘧啶核苷摻入法檢測細胞增殖水平，結果以封閉效率表示。二、反復自然流產(chǎn)的免疫學檢測（3）流式細胞術分析封閉抗體原理:采用競爭法原理，以AB型或小牛血清中抗CD3、CD4、CD25的抗體與測定管中的抗體競爭結合男方細胞；測定抗CD3、CD4、CD25封閉效率大于1%為陽性。流式細胞儀二、反復自然流產(chǎn)的免疫學檢測（二）抗磷脂抗體（APLA）1.定義：是一種廣泛的、異種基因的自身抗體家族，分為狼瘡抗凝物（LAC）和抗心磷脂抗體（ACA）兩大類。2.抗心磷脂抗體（ACLA）的檢測方法ELISA法最常用二、反復自然流產(chǎn)的免疫學檢測（三）夫婦雙方HLA抗原檢測HLA-I類抗原多用血清學方法檢測；

HLA-DR抗原檢測常用混合淋巴細胞培養(yǎng)來鑒定；（四）透明帶抗體及抗精子抗體檢測見第二十九章第二節(jié)二、反復自然流產(chǎn)的免疫學檢測（五）血型及抗血型抗體測定1.常見的血型不合引起的同種免疫病（1）ABO血型不合的同種免疫?。唬?）Rh血型不合的同種免疫?。?.診斷主要依據(jù)實驗室特異性抗體檢查三、生殖系感染的免疫學檢測（一）支原體檢測1.定義：是一類缺乏細胞壁，能在無生命培養(yǎng)基中生長繁殖的最小原核生