臨床微生物的鑒定與藥敏

微生物檢驗(yàn)的意義與流程標(biāo)本采集應(yīng)選擇在應(yīng)用抗菌藥物之前采集標(biāo)本革蘭氏染色

抗酸染色墨汁染色細(xì)菌與真菌培養(yǎng)生化鑒定儀器自動(dòng)鑒定紙片法MIC法臨床細(xì)菌工作者需要從各種標(biāo)本中分離識(shí)別細(xì)菌是屬于病原菌、條件致病菌或正常菌群，要正確鑒定分離出的微生物的歸屬或種。因?yàn)橹挥忻鞔_歸屬的細(xì)菌，才有可能根據(jù)特定的形態(tài)、培養(yǎng)和生化特征，確立未知細(xì)菌的分類(lèi)屬相，藥敏實(shí)驗(yàn)的判斷規(guī)則，并作為感染疾病治療的依據(jù)。鏡檢接種培養(yǎng)鑒定藥敏實(shí)驗(yàn)

血液及骨髓標(biāo)本尿液標(biāo)本穿刺液標(biāo)本導(dǎo)管臨床標(biāo)本主要包括：無(wú)菌體液，有不引起疾病的正常菌群寄居糞便標(biāo)本痰及上呼吸道標(biāo)本燒傷標(biāo)本生殖道標(biāo)本組織標(biāo)本無(wú)菌體液正常菌群寄居臨床標(biāo)本的分類(lèi)細(xì)菌分類(lèi)的依據(jù)和方法·細(xì)菌的著色性，形態(tài)，芽孢、鞭毛和莢膜結(jié)構(gòu)等·細(xì)菌的生物化學(xué)特征如：營(yíng)養(yǎng)方式、代謝產(chǎn)物特點(diǎn)和對(duì)氧分子的需求等細(xì)菌的生理、生物化學(xué)與細(xì)菌分類(lèi)遺傳物的特征與細(xì)菌分類(lèi)細(xì)菌的生理、生化表型是由其所含的遺傳基因所決定若對(duì)細(xì)菌作分型，常采用的抗原結(jié)構(gòu)、噬菌體和細(xì)菌素敏感性抗原結(jié)構(gòu)、噬菌體和細(xì)菌素細(xì)菌分類(lèi)要綜合其細(xì)胞學(xué)、生理學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)等特征。同時(shí)以抗原結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，遺傳物質(zhì)DNA分子的結(jié)構(gòu)來(lái)闡明各種細(xì)菌間的親緣關(guān)系。臨床細(xì)菌的主要分類(lèi)革蘭氏陽(yáng)性桿菌革蘭氏陽(yáng)性球菌

觸酶試驗(yàn)革蘭氏陰性球菌革蘭氏陰性桿菌

氧化酶實(shí)驗(yàn)病原菌ADBC革蘭氏陽(yáng)性球菌葡萄球菌凝固酶陰性葡萄球菌腸球菌鏈球菌

A群鏈球菌B群鏈球菌

C群鏈球菌草綠色鏈球菌肺炎鏈球菌

金黃色為葡萄球菌涂片：革蘭陽(yáng)性球菌，葡萄狀排列觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性血漿凝固酶陽(yáng)性接種于血平皿有金黃色素透明溶血環(huán)發(fā)酵甘露醇MRSA肺炎、偽膜性腸炎、腎盂腎炎、心包炎、化膿性感染、敗血癥、膿毒血癥M1M2M4M3凝固酶陰性葡萄球菌廣泛存在于皮膚表面、口腔及腸道中菌血癥患者占10%心內(nèi)膜炎的主要致病菌重要的院內(nèi)感染菌耐藥性高于凝固酶陽(yáng)性的葡萄球菌

腸球菌涂片：革蘭陽(yáng)性球菌，呈短鏈排列觸酶試驗(yàn)陰性膽汁七葉苷陽(yáng)性接種于血平皿5%羊血平皿生長(zhǎng)好灰白色、濕潤(rùn)、光滑中等大小有γ–溶血或β-溶血尿路感染：尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎糖尿病、惡性腫瘤并發(fā)M1M2M4M3感染主要為糞腸球菌，其次為屎腸球菌和鳥(niǎo)腸球菌鏈球菌A群鏈球菌

又稱(chēng)化膿性鏈球菌，廣泛存在于自然界，正常人的鼻咽部和皮膚。能產(chǎn)生多種毒素及毒性物質(zhì)，侵襲力強(qiáng)。其M蛋白抗原，具有吞噬作用，與毒力有關(guān)。

B群鏈球菌又稱(chēng)無(wú)乳鏈球菌，易引起新生兒的敗血癥草綠色群鏈球菌是亞急性心內(nèi)膜炎的主要病原菌，常定居在扁桃體、鼻咽部或牙齦腫，可發(fā)生局部病灶性感染。肺炎鏈球菌人體口腔、鼻咽部的正常菌群，并不會(huì)引起疾病。當(dāng)機(jī)體抵抗力下降時(shí)，可引起大葉性肺炎、支氣管肺炎，如處理不當(dāng)可導(dǎo)致血流播散，導(dǎo)致敗血癥。肺炎鏈球菌涂片：革蘭陽(yáng)性球菌，矛頭狀尖端相背或短鏈排列，有莢膜血平板上為灰白色、扁平光滑、濕潤(rùn)半透明、草綠色溶血環(huán)。培養(yǎng)久后，菌落中央凹陷臍窩狀菊糖發(fā)酵試驗(yàn)陽(yáng)性、膽汁溶菌試驗(yàn)陽(yáng)性引起肺炎鏈球菌腦膜炎，支氣管肺炎、心內(nèi)膜炎、胸膜炎、中耳炎和關(guān)節(jié)炎M1M2M4M3奈瑟菌屬奈瑟菌屬屬于奈瑟菌科，除奈瑟菌屬外，還包括莫拉菌屬、不動(dòng)桿菌屬、金氏菌屬。奈瑟菌屬共含10個(gè)種。淋病奈瑟菌腦膜炎奈瑟菌嗜乳糖奈瑟菌干燥奈瑟菌淺黃奈瑟菌金黃奈瑟菌粘膜奈瑟菌灰色奈瑟菌細(xì)長(zhǎng)奈瑟菌多糖奈瑟菌腦膜炎奈瑟菌奈瑟菌屬腦膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌前列腺炎、睪丸炎、尿道周?chē)撃[、附件炎、盆腔炎和關(guān)節(jié)炎革蘭陰性雙球菌，呈卵圓形或腎形。只發(fā)酵葡萄糖。氧化酶、觸酶陽(yáng)性

流行性腦脊髓膜炎

腦膜炎球菌菌血癥革蘭陰性球菌，成雙排列，菌體呈腎形或豆形只分解葡萄糖、麥芽糖，產(chǎn)少量酸。氧化酶陰性在巧克力平皿上培養(yǎng)24~48小時(shí)或72小時(shí)生長(zhǎng)較好。菌落隆起、光滑、濕潤(rùn)、邊緣整齊。易乳化、無(wú)色素、生理鹽水不自凝。在5%CO2條件下生長(zhǎng)良好.

革蘭氏陰性桿菌腸桿菌

傷寒沙門(mén)菌、副傷寒沙門(mén)菌、大腸埃希菌、氣單胞菌、肺炎克雷伯、變形桿菌、布魯菌和沙雷菌等。在血平皿、中國(guó)藍(lán)培養(yǎng)基上都能生長(zhǎng)。非發(fā)酵革蘭陰性桿菌

是指一群不能利用葡萄糖或僅能以氧化形式利用葡萄糖的革蘭陰性桿菌。

包括：銅綠假單胞菌、不動(dòng)桿菌屬、沙麥芽窄食單胞菌、洋蔥克雷伯菌大腸埃希菌引起腸道感染的大腸埃希菌腸致病性大腸埃希菌腸道聚集-粘附性大腸埃希菌產(chǎn)腸毒素性大腸埃希菌腸侵襲性大腸埃希菌腸出血性大腸埃希菌發(fā)熱，嘔吐，腹瀉，便中多粘液無(wú)血痙攣性腹痛等革蘭氏陰性桿菌，氧化酶試驗(yàn)陰性

API，compact進(jìn)一步鑒定，血清O1，O139臨床表現(xiàn)鏡檢與趨向性試驗(yàn)鑒定可見(jiàn)中等大小、圓形、凸起的灰白色菌落少數(shù)呈β-溶血，發(fā)酵乳糖，硝酸鹽還原試驗(yàn)陽(yáng)性接種及生化銅綠假單胞菌術(shù)后傷口感染、褥瘡、膿腫、燒傷后感染、化膿性中耳炎，菌血癥和院感的主要致病菌革蘭陰性桿菌，菌體呈多形體，球桿狀和長(zhǎng)絲狀，成對(duì)或成鏈排列，有鞭毛氧化酶、觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性，有動(dòng)力精氨酸水解酶陽(yáng)性，氧化分解葡萄糖，但不發(fā)酵臨床鏡檢染色鑒定菌落周?chē)型该魅苎h(huán)，金屬光澤。特殊生姜?dú)馕兜幕揖G色或藍(lán)綠色菌落。多數(shù)產(chǎn)生綠膿素或熒光素接種血平皿嗜血桿菌屬隸屬于巴斯德菌科流感嗜血桿菌副流桿嗜血桿菌溶血嗜血桿菌副嗜沫嗜血桿菌杜克雷嗜血桿菌埃及嗜血桿菌副溶血嗜血桿菌嗜沫嗜血桿菌遲緩嗜血桿菌流感嗜血桿菌臨床致病物質(zhì)主要為內(nèi)毒素和莢膜的抗吞噬作用主要引起呼吸道感染，腦膜炎，關(guān)節(jié)膿腫和其他化膿感染接種與鏡檢接種于巧克力平皿上5%CO2,35°培養(yǎng)菌落為細(xì)小，灰白，光滑，濕潤(rùn)，半透明菌落，革蘭陰性小桿菌，呈多形性生長(zhǎng)因子把可疑菌密涂于腦心浸液瓊脂平皿上，把X、V和X+V因子紙片貼在平皿上，細(xì)菌只在X+V因子周?chē)L(zhǎng)，不在X因子或V因子周?chē)L(zhǎng)衛(wèi)星現(xiàn)象把可疑菌株涂在平皿上，將金黃色葡萄球菌點(diǎn)種于培養(yǎng)基劃線區(qū)，在葡萄球菌落周?chē)木浯?，遠(yuǎn)離金葡菌的菌落小真菌檢驗(yàn)?zāi)壳白匀唤缫寻l(fā)現(xiàn)超過(guò)10萬(wàn)種真菌，廣泛分布于土壤、水和空氣中，也可見(jiàn)于正常人的皮膚及與外界相通的腔道中真菌的分類(lèi)一.按真菌菌落形態(tài)分類(lèi)

--霉菌多細(xì)胞，產(chǎn)生菌絲和孢子，一般為毛樣菌落

--酵母單細(xì)胞，菌落為乳酪樣

--雙相真菌受環(huán)境因素改變的影響，形態(tài)由霉菌型變?yōu)榻湍感投?按感染部位分類(lèi)

--淺部真菌感染指侵犯皮膚、指甲、毛發(fā)

--深部真菌感染指侵犯皮下組織、內(nèi)臟及全身的感染三.按真菌致病性分類(lèi)

--致病性真菌

--條件致病性真菌指在機(jī)體免疫力低下時(shí)才致病的真菌，通常與人處于共生狀態(tài)，為人體正常菌群的一部分真菌檢驗(yàn)?zāi)钪榫鷮?屬酵母樣真菌，產(chǎn)生假菌絲，與酵母菌不同而稱(chēng)其為類(lèi)酵母菌，也成為假絲酵母菌。常見(jiàn)12種。

隱球菌屬新型隱球菌白色隱球菌羅倫隱球菌淺黃隱球菌地生隱球菌指甲隱球菌

其他酵母及酵母樣真菌-包括9個(gè)屬，與人類(lèi)感染有一定關(guān)系厭氧菌—難辨梭菌接種

在CCFA平板上呈不透明、淡黃色、邊緣不整齊的粗糙型菌落染色

革蘭陽(yáng)性粗大桿菌，卵圓形芽胞位于次極端生化

發(fā)酵果糖毒素篩查

接種的同時(shí)做minividas的上機(jī)操作

抗生素概念概念

抗生素是能抵抗致病微生物的藥物，是抗菌消炎藥中最大的一類(lèi)來(lái)源

抗生素是由細(xì)菌、真菌或其他微生物在生活過(guò)程中所產(chǎn)生的物質(zhì)，具有抑制或殺滅細(xì)菌、真菌、螺旋體、支原體、依原體等致病微生物的作用，故能治病。抗生素分類(lèi)(1)β-內(nèi)酰胺類(lèi)：這是品種最多，用得最多、最廣的一類(lèi)，此類(lèi)包括兩部分。①青霉素：主要對(duì)不產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶的需氧革蘭陽(yáng)性菌、部分苛養(yǎng)菌、需氧革蘭陰性桿菌以及部分厭氧菌具有抗菌活性。常用的品種有青霉素鈉、青霉素鉀、氨芐西林鈉、阿莫西林、哌拉西林、青霉素V鉀等。②頭孢菌素：對(duì)需氧和厭氧的革蘭陽(yáng)性和陰性菌的抗菌譜不盡相同。常用品種有頭孢氨芐、頭孢羥氨芐、頭孢唑啉鈉、頭孢拉定、頭孢曲松鈉等。(2)氨基糖苷類(lèi)：是結(jié)構(gòu)相關(guān)的抗菌藥物，可在核糖體水平上抑制細(xì)菌蛋白的合成。主要治療革蘭陰性桿菌。常用品種有鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、阿米卡星、小諾米星等。抗生素分類(lèi)(3)四環(huán)素類(lèi)：在核糖體水平上抑制某些革蘭陽(yáng)性和革蘭陰性菌的蛋白的合成。常用四環(huán)素、土霉素、多西環(huán)素、米諾環(huán)素等。(4)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)：在核糖體水平上抑制細(xì)菌蛋白的合成。常用地紅霉素、阿奇霉素、克拉霉素、泰利霉素等。(5)氯霉素類(lèi)：常用的品種即氯霉素。(6)林可霉素類(lèi)：林可霉素、克林霉素。