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#此復(fù)合物可以以兩種形式調(diào)節(jié)生理活動(dòng):1、直接與靶酶起作用;2、通過激活依賴Ca2+—CaM的PK起作用。蛋白質(zhì)組學(xué):研究某一物種、個(gè)體、器官、組織及細(xì)胞中全部蛋白質(zhì),獲得整個(gè)體系內(nèi)所有蛋白質(zhì)組分的生物學(xué)和理化參數(shù),揭示生命活動(dòng)規(guī)律的一門學(xué)科。限制性內(nèi)切酶:原核生物中存在著一類能識(shí)別外源DNA雙螺旋中4-8個(gè)堿基對(duì)所組成的特異的具有二重螺旋對(duì)稱性的回文序列,并在此序列的某位點(diǎn)水解DNA鏈,產(chǎn)生粘性末端或平末端,這類酶稱為限制性內(nèi)切酶。同工酶:從不同種屬或同一種屬、同一個(gè)體的不同組織或同一組織的同一細(xì)胞中獲得的具有不同分子形式卻催化相同化學(xué)反應(yīng)的一組酶叫做同工酶。又可分為原級(jí)同工酶和次級(jí)同工酶,由酶蛋白編碼基因不同而產(chǎn)生的同工酶叫做原級(jí)同工酶,由基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA或者翻譯產(chǎn)物經(jīng)過不同的加工過程產(chǎn)生的同工酶叫做次級(jí)同工酶。G-蛋白:一般是指一類與膜受體偶聯(lián)的異三聚體結(jié)合蛋白質(zhì),其具有和GTP結(jié)合并催化GTP水解成GDP的能力,由a、卩、y三個(gè)亞基組成,可充當(dāng)細(xì)胞膜上受體和靶酶之間的信號(hào)傳遞體。DNA雙螺旋多態(tài)性:在多核苷酸鏈中,脫氧核糖的五元環(huán)能折疊成多種構(gòu)象,此外,分子還可以繞C-N糖苷鍵以及3',5'-磷酸二脂鍵旋轉(zhuǎn)一定的角度,這就使具有同樣堿基配對(duì)的DNA雙螺旋可以采取另一些構(gòu)象,DNA構(gòu)象上的這種差異稱為多態(tài)性。(A、B\Z)sanger反應(yīng):在弱堿性溶液中,氨基酸的a-氨基易與DNFB(2,4-二硝基氟苯)反應(yīng),生成黃色的DNP-AA(二硝基苯氨基酸),此反應(yīng)最初被sanger用于測(cè)定N-末端氨基酸,又被稱為sanger反應(yīng)。Ribozyme:核酸酶,對(duì)RNA有催化活性的RNA。順反子:遺傳學(xué)上將編譯一個(gè)多肽的遺傳單位稱為順反子。引發(fā)體:引物酶與相關(guān)蛋白質(zhì)結(jié)合成的一個(gè)有活性的復(fù)合體叫做引發(fā)體。分子?。河捎诨蛲蛔儗?dǎo)致蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生變異,使蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能減退或喪失,甚至造成生理功能的變化而引起的疾病,稱為分子病。增色效應(yīng)與減色效應(yīng):當(dāng)DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生解體時(shí),兩條鏈分開,形成無(wú)規(guī)則線團(tuán),一系列理化性質(zhì)也隨之發(fā)生改變,260nm紫外吸收值升高,此效應(yīng)稱之為增色效應(yīng)。反之,由于DNA有規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)中的堿基緊密的堆積在一起而造成的260nm紫外吸收值降低,此效應(yīng)稱之為減色效固定化酶:將酶從微生物細(xì)胞中提取出,將其用固定支持物(稱為載體)固定,使其成為不溶于水或不易散失和可多次使用的生物催化劑,這種固定的酶稱為固定化酶。解偶聯(lián)作用:在完整線粒體內(nèi),電子傳遞與磷酸化是緊密偶聯(lián)的,當(dāng)使用某些試劑而導(dǎo)致的電子傳遞與ATP形成這兩個(gè)過程分開,只進(jìn)行電子傳遞而不能形成ATP的作用,稱為解偶聯(lián)作用親和層析:利用共價(jià)連有特異配體的層析介質(zhì),分離蛋白質(zhì)混合物中能特異結(jié)合配體的目的蛋白質(zhì)或其他分子的層析技術(shù)。信號(hào)肽/導(dǎo)肽:二者都是新生肽鏈用于指導(dǎo)蛋白質(zhì)跨膜轉(zhuǎn)移(定位)的N-末端氨基酸序列。信號(hào)肽含10到20個(gè)疏水氨基酸,合成后即可特異被SRP識(shí)別,并將核糖體引導(dǎo)到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)停泊蛋白上繼續(xù)翻譯。肽鏈前端進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔后,信號(hào)肽即被切除。邊合成邊轉(zhuǎn)運(yùn)!導(dǎo)肽富含堿性和疏水氨基酸,這導(dǎo)致它既親水又疏水,利于穿越脂雙層。同時(shí)帶正電的頭更利于順跨膜電勢(shì)穿膜。跨膜后被切除。先合成后轉(zhuǎn)運(yùn)!Km/TmKm為米氏常數(shù),是酶的特征物理常數(shù),Km值是反應(yīng)速度為最大速度一半時(shí)的底物濃度,單位mol/L或mmol/LTm是熱變性過程中光吸收達(dá)到最大吸收(完全變性)一半(雙螺旋結(jié)構(gòu)失去一半)時(shí)的溫度,單位為0CDNA文庫(kù)/cDNA文庫(kù)整套由基因組DNA片段插入克隆載體獲得的分子克隆之總和叫做基因文庫(kù)。將細(xì)胞全部mRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA并被克隆的總和稱為cDNA文庫(kù)超二級(jí)結(jié)構(gòu)/結(jié)構(gòu)域超二級(jí)結(jié)構(gòu)是指多態(tài)鏈上若干相鄰的構(gòu)象單元(如a-螺旋,卩-折疊,卩-轉(zhuǎn)角等)彼此作用,進(jìn)一步組合成有規(guī)則的結(jié)構(gòu)組合體。結(jié)構(gòu)域指存在于球狀蛋白質(zhì)分子中的兩個(gè)或多個(gè)相對(duì)獨(dú)立的,在空間上能辨認(rèn)的三維實(shí)體,每個(gè)有二級(jí)結(jié)構(gòu)組合而成,充當(dāng)三級(jí)結(jié)構(gòu)的構(gòu)件,其間由單肽鏈連接。主動(dòng)運(yùn)輸/被動(dòng)運(yùn)輸凡是物質(zhì)逆濃度梯度的運(yùn)送稱為主動(dòng)運(yùn)輸,這一過程的進(jìn)行需要能量。凡是物質(zhì)順濃度梯度的運(yùn)送叫做被動(dòng)運(yùn)輸,這一過程是自發(fā)的,無(wú)需能量?;瘜W(xué)酶工程/生物酶工程化學(xué)酶工程又稱初級(jí)酶工程,指的是天然酶、化學(xué)修飾酶、固定化酶及模擬酶的研究和利用。生物酶工程又稱高級(jí)酶工程,是酶學(xué)與以DNA重組技術(shù)為核心的生物技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物,主要涉及基因工程技術(shù)大量制備酶(克隆酶)、對(duì)酶基因進(jìn)行修飾,產(chǎn)生遺傳修飾酶(突變酶)、設(shè)計(jì)新的基因,合成自然界不曾有的新酶。Kcat型抑制劑\Ks型抑制劑二者都是專一性不可逆抑制劑Kcat型抑制劑,該類抑制劑與底物結(jié)構(gòu)類似,但分子中還有潛伏的反應(yīng)基團(tuán)。當(dāng)它與底物結(jié)合后,其潛伏的反應(yīng)基團(tuán)被酶催化而活化,并立即與酶活性中心某基團(tuán)呈不可逆結(jié)合,使酶遭受抑制。此類抑制劑亦稱酶的自殺性底物。Ks型抑制劑,具有一個(gè)與底物相似的可以與酶結(jié)合的基團(tuán),可直接結(jié)合于酶的活性部位,同時(shí)還具有一個(gè)能與活性部位的其他功能基團(tuán)反應(yīng)的活性基團(tuán),對(duì)其進(jìn)行共價(jià)修飾,可作為酶活性部位的定向抑制劑或親和抑制劑。HGP人類基因組計(jì)劃,由多國(guó)政府支持的一個(gè)國(guó)際項(xiàng)目,即測(cè)定人類基因組的全部DNA序列,從而解讀所有遺傳密碼,揭示生命的所有奧秘。胞間信號(hào)/胞內(nèi)信號(hào)二者是按照作用范圍來(lái)分的當(dāng)環(huán)境刺激的作用位點(diǎn)與效應(yīng)位點(diǎn)處于生物體的不同部位時(shí),需要作用位點(diǎn)細(xì)胞產(chǎn)生信號(hào)傳遞給效應(yīng)位點(diǎn),引起細(xì)胞反應(yīng)。這個(gè)作用位點(diǎn)細(xì)胞產(chǎn)生的信號(hào)就是胞間信號(hào),也稱為第一信使。胞內(nèi)信號(hào)是胞間信號(hào)由膜上信號(hào)轉(zhuǎn)換系統(tǒng)產(chǎn)生的有調(diào)節(jié)活性的細(xì)胞內(nèi)因子,也稱為第二信使。信號(hào)肽常指新合成多肽鏈中用于指導(dǎo)蛋白質(zhì)跨膜轉(zhuǎn)移(定位)的N-末端氨基酸序列(有時(shí)不一定在N端)?;瘜W(xué)滲透學(xué)說電子傳遞的自由能驅(qū)動(dòng)H+從線粒體基質(zhì)跨出膜進(jìn)入到膜間隙,從而形成H+跨線粒體內(nèi)膜的電化學(xué)梯度,這個(gè)梯度的電化學(xué)勢(shì)(AH+)被膜上的ATP-ase利用,驅(qū)動(dòng)ATP的合成。分子伴侶這是一類可以介導(dǎo)蛋白質(zhì)正確組裝與折疊,但其本身并不構(gòu)成被介導(dǎo)的蛋白質(zhì)組成部分的一類蛋白因子,在原核生物和真核生物中廣泛存在。生物傳感器用固定化生物成分或生物體作為敏感元件的傳感器稱為生物傳感器,由分子識(shí)別部分(敏感元件)和轉(zhuǎn)換部分(轉(zhuǎn)換器)構(gòu)成,前者是作為信息供體的生物學(xué)識(shí)別系統(tǒng),專一地識(shí)別機(jī)制并給出特定信息,后者由電、光或熱的信息轉(zhuǎn)換器構(gòu)成的生物識(shí)別系統(tǒng),接收到前一部分給出的信息,測(cè)出其變化大小,再換算成原來(lái)物質(zhì)的量或濃度。超螺旋DNADNA雙螺旋的彎曲欠旋(負(fù)超螺旋)或過旋(正超螺旋)的結(jié)果。受體受體是細(xì)胞表面或細(xì)胞組分中的一種天然分子,可以識(shí)別并特異地與有生物活性的化學(xué)信號(hào)分子(配體)結(jié)合,從而激活或啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)一系列生物化學(xué)反應(yīng),最后導(dǎo)致該信號(hào)物質(zhì)特定的生物效應(yīng)。絕大多數(shù)受體為蛋白質(zhì),極少數(shù)為非蛋白質(zhì)受體。蛋白質(zhì)的可逆磷酸化在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中,蛋白質(zhì)的可逆磷酸化是生物體內(nèi)的一種普遍的翻譯后修飾方式,蛋白質(zhì)磷酸化與脫磷酸化分別由蛋白激酶和蛋白磷酸酶催化完成,前者催化ATP或GTP的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到底物蛋白質(zhì)的氨基酸殘基上,后者催化逆轉(zhuǎn)的反應(yīng)。酶聯(lián)免疫分析法酶聯(lián)免疫分析法是將酶作為標(biāo)記物質(zhì),使之與抗原(或抗體)結(jié)合形成酶與抗原(或抗體)復(fù)合物,然后再根據(jù)待測(cè)抗體(或抗原)與復(fù)合物專一且定量的結(jié)合關(guān)系,通過測(cè)定與待測(cè)抗體(或抗原)結(jié)合的標(biāo)記酶活力,從而計(jì)算出抗原或抗體的量。deoxyribozyme脫氧核酸酶,是利用體外分子進(jìn)化技術(shù)合成的一種具有催化功能的單鏈DNA片段,具有高效的催化活性和結(jié)構(gòu)識(shí)別能力。肽核酸肽核酸是一種以中性酰胺鍵為骨架并兼有多肽和核酸性質(zhì)的獨(dú)特化合物,不能被蛋白酶和核酸酶所降解,可以高度親和并序列特異地與DNA和RNA結(jié)合,而且形成的雜交復(fù)合物具有相當(dāng)高的熱穩(wěn)定性以及獨(dú)特的耐離子強(qiáng)度變化性質(zhì)。prion朊病毒,是一類高度保守的糖蛋白,其廣泛表達(dá)于脊椎動(dòng)物,且與神經(jīng)系統(tǒng)功能的維持、淋巴細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、核酸代謝等有關(guān);當(dāng)其發(fā)生構(gòu)象改變之后可變成致病性朊病毒(PrPsc),PrPsc可引起包括瘋牛病在內(nèi)的一系列致死性神經(jīng)變性疾病(統(tǒng)稱prion?。?。足跡法(footprint)是一種利用蛋白質(zhì)和DNA特異結(jié)合的方法,DNA某段序列被蛋白質(zhì)結(jié)合后被修飾而不會(huì)斷裂或免受DNase的分解,然后和無(wú)蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA分別進(jìn)行測(cè)序,就可以得到被蛋白質(zhì)保護(hù)的片段究竟包含了哪些堿基對(duì)的排序。光合磷酸化與氧化磷酸化光合磷酸化是指在葉綠體ATP合成酶的催化下依賴于光的由ADP和Pi合成ATP的過程。氧化磷酸化是指電子從一個(gè)底物傳遞給分子氧的氧化與酶催化的由ADP和Pi生成ATP相偶聯(lián)的過程。SDSSDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,在去垢劑SDS(十二烷基硫酸鈉)存在下的聚丙烯酰胺凝膠電泳,當(dāng)SDS與蛋白質(zhì)結(jié)合后,蛋白質(zhì)分子即帶有大量的負(fù)電荷,并遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了其原來(lái)的電荷,從而使天然蛋白質(zhì)分子間的電荷差別就降低乃至消除了,與此同時(shí)蛋白質(zhì)在SDS作用下結(jié)構(gòu)變得松散,形狀趨向一致,所以各種SDS-蛋白質(zhì)復(fù)合物在電泳時(shí)產(chǎn)生的脈動(dòng)率差異,就反映了分子量的大小。抗體和抗原:當(dāng)外源性物質(zhì),如蛋白質(zhì)、毒素、糖蛋白、脂蛋白、核酸、多糖、顆粒(細(xì)菌、細(xì)胞、病毒)進(jìn)入人或動(dòng)物體內(nèi)時(shí),機(jī)體的免疫系統(tǒng)便產(chǎn)生相應(yīng)的免疫球蛋白,并與之結(jié)合,以消除異物的毒害。此反應(yīng)稱為免疫反應(yīng),此異物便是抗原,此球蛋白便是抗體。多克隆抗體和單克隆抗體如果給動(dòng)物注射抗原,雖然抗原與各種抗體產(chǎn)生細(xì)胞的親和性有所不同,但是還是有大量抗體產(chǎn)生細(xì)胞將與之結(jié)合,結(jié)果血液中出現(xiàn)的抗體源于數(shù)種不同的細(xì)胞克隆,這些抗體就是多克隆抗體。如果可以分離到抗體產(chǎn)生細(xì)胞的單克隆,然后使所有的抗體均來(lái)自同樣的克隆,這樣制備的抗體稱為單克隆抗體?;钚噪模涸谏矬w中,多肽最重要的存在形式是作為蛋白質(zhì)的亞單位,有許多分子量比較小的多肽以游離狀態(tài)存在,這類多肽通常都具有特殊的生理功能,常稱為活性肽。核糖體循環(huán)指在細(xì)胞內(nèi)構(gòu)成核糖體的大小兩種亞單位(沉淀系數(shù)為50S或60S的大亞單位和30S或40S的小亞單位)與蛋白活體合成開始會(huì)合(70S或80S粒子形成),合成后又分離的這一反復(fù)循環(huán)而言(參見核糖體)。核糖體在不合成蛋白時(shí),分離成亞單位,這是由于多肽鏈起始因子之一與小亞
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