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磷酸化TMT蛋白組學(xué)的具體步驟及方法磷酸化是生物體內(nèi)重要的蛋白質(zhì)修飾種類,與酶活性、信號(hào)傳導(dǎo)等多種極為重要的生物過程相關(guān)。因?yàn)楹亢艿停姿峄盘?hào)大規(guī)模分析前一般需要先將其富集出來。目前磷酸化肽段的富集方式有很多種,TiO2是其中最成熟的一種。磷酸化TMT是將TMT技術(shù)以及TiO2對(duì)磷酸化肽段的強(qiáng)親和力聯(lián)合起來,對(duì)磷酸化肽段進(jìn)行定量分析。技術(shù)流程E?rr^7-3騎nipl朋TreatKIs^AtoS?mpl時(shí)■4 _2_二^3?wunwuOrnaUiEi,RBdkKILAlkyfalQ&TrypatOkQCltIreai?PrecessrUri2Sruntmkri?tmp-imJTfctF*liiJnVnTMT扁JnJMV-331WJPhosphopeptidesenrichment55Ez'.二7Z0技術(shù)原理1.TiO2在酸性條件下與磷酸化肽段具有強(qiáng)親和力,堿性條件下又可將磷酸化肽段洗脫,從而通過調(diào)節(jié)PH而將磷酸化肽段富集并洗脫下來;2.TMT定量原理見TMT宣傳頁面。
蛋白質(zhì)宦ill暢膠電泳質(zhì)譜分析正式實(shí)驗(yàn)階段預(yù)實(shí)驗(yàn)階段肽段質(zhì)n數(shù)偏差丄X生物信息學(xué)分析預(yù)質(zhì)昭析粒成生物技術(shù)流程質(zhì)扭評(píng)怙質(zhì)郭FASP§§^蛋白質(zhì)宦ill暢膠電泳質(zhì)譜分析正式實(shí)驗(yàn)階段預(yù)實(shí)驗(yàn)階段肽段質(zhì)n數(shù)偏差丄X生物信息學(xué)分析預(yù)質(zhì)昭析粒成生物技術(shù)流程質(zhì)扭評(píng)怙質(zhì)郭FASP§§^數(shù)IE庫匕匕對(duì)正式實(shí)驗(yàn)報(bào)告預(yù)丈
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