伯氏嗜木螨生活史各階段外部形態(tài)和超微形態(tài)特征

伯氏嗜木螨生活史各階段外部形態(tài)和超微形態(tài)特征

伯里亞人的母親（威廉，1903年）屬于蜘蛛科，屬于雅虎科。嗜木螨屬Caloglyphus目前已記述的粉螨約8種,根據(jù)其攝食行為可分為植食螨、食菌螨、腐食螨、捕食螨等,其中伯氏嗜木螨性喜高溫(30～35℃)潮濕(75%～80%),常孳生于潮濕發(fā)霉的谷物、飼料、亞麻籽、大蒜、蘑菇、餅干和亞麻等儲(chǔ)藏物,是儲(chǔ)藏物重要害蟲(chóng)之一(李朝品和武前文,1996;李朝品等,2006)。該螨營(yíng)自由生活,分布于中國(guó)、德國(guó)、英國(guó)等,是房舍和儲(chǔ)藏物中重要的孳生螨(李朝品等,2006;KrantzandWalter,2009),其皮殼、分泌物、排泄物和死亡螨體裂解物均具有較強(qiáng)的變應(yīng)原性,可引起螨性皮炎、過(guò)敏性哮喘、過(guò)敏性鼻炎等多種變態(tài)反應(yīng)性疾病(Sporiketal.,1990;Lewisetal.,2002;Lietal.,2003;Liuetal.,2007;Wuetal.,2009;Vichyanondetal.,2012)。中華真地鱉Eupolyphagasinensis是藥材和保健品的寶貴昆蟲(chóng)資源。該螨常在地鱉養(yǎng)殖場(chǎng)中發(fā)現(xiàn),是地鱉養(yǎng)殖的重要害蟲(chóng)(蔣三俊,2001;李長(zhǎng)福等,2003),可對(duì)地鱉養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)造成相當(dāng)大的經(jīng)濟(jì)損失。Hughes(1976)曾描述了伯氏嗜木螨外部形態(tài),李朝品和武前文(1996)及李長(zhǎng)福等(2003)也曾對(duì)伯氏嗜木螨的形態(tài)進(jìn)行過(guò)具體描述。但對(duì)該螨的外部形態(tài)結(jié)構(gòu)如顎體、足體、吸盤、生殖感覺(jué)區(qū)和肛區(qū)等的超微形態(tài)尚未見(jiàn)詳細(xì)報(bào)道。為此,本文利用掃描電鏡(scanningelectronicmicroscopy,SEM)對(duì)伯氏嗜木螨外部形態(tài)和超微形態(tài)特征進(jìn)行了深入觀察,發(fā)現(xiàn)了一些具有分類意義的形態(tài)特征,對(duì)該螨的進(jìn)一步進(jìn)行系統(tǒng)分類大有裨益,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。1材料和方法1.1藥物、法規(guī)、自然封固劑光學(xué)顯微鏡(日本OLYMPUS,BX-1型),掃描電子顯微鏡(日本JEOL,JSM-6490LA型),解剖鏡(MOTIC,ST-39型),永久封固劑(蒸餾水50mL,10%水合氯醛5mL,甘油20mL,阿拉伯膠30g),乙醚、無(wú)水乙醇(分析純,國(guó)藥集團(tuán)藥業(yè)股份有限公司產(chǎn))和戊二醛(分析純,德國(guó)巴斯夫產(chǎn))。1.2樣品采集與樣品制備1.2.1紅樹(shù)莓原螯蝦屬植物的形態(tài)鑒定本研究所采用的伯氏嗜木螨標(biāo)本采自中國(guó)安徽蒙城(33.52°N,115.47°E)某中華真地鱉E.sinensis養(yǎng)殖場(chǎng)地鱉培養(yǎng)床上的地鱉培養(yǎng)料,采用直接鏡檢法(directicopy)和塔氏電熱集螨法(Tullgren)從樣本中分離粉螨(李朝品和武前文,1996),參照以往文獻(xiàn)(李朝品等,2006)方法制備螨類玻片標(biāo)本,光鏡下觀察其形態(tài)特征進(jìn)行鑒定。將部分分離獲得的伯氏嗜木螨置于密閉無(wú)光,溫度32℃,濕度80%的生態(tài)培養(yǎng)箱中養(yǎng)殖2周以獲取足量的螨。解剖鏡下分別挑取伯氏嗜木螨的卵、幼螨、若螨、休眠體、雄成螨和雌成螨,用蒸餾水反復(fù)多次振蕩清洗后,用70%酒精再次洗滌,反復(fù)3次,最后用2.5%戊二醛固定。1.2.2掃描觀察方法取戊二醛固定的伯氏嗜木螨數(shù)只,用PBS液清洗數(shù)次,醋酸戊酯置換,乙醚麻醉后用潔凈毛發(fā)針整姿并將其固定在導(dǎo)電雙面膠上,臨界點(diǎn)干燥后在掃描電鏡(日本JEOL)下(5～10kV的加速電壓)進(jìn)行掃描觀察,選擇清晰圖像并拍照。2結(jié)果2.1卵殼內(nèi)幼蟲(chóng),形態(tài)為明顯刻點(diǎn)伯氏嗜木螨的卵平均大小約為154.2μm×104.8μm,橢圓形,白色半透明,有時(shí)可見(jiàn)卵殼內(nèi)幼蟲(chóng),卵殼光滑無(wú)明顯刻點(diǎn)(圖版Ⅰ:1)。2.2無(wú)主后毛、后期角場(chǎng)及基節(jié)桿伯氏嗜木螨幼螨平均大小約為261.5μm×150.6μm,無(wú)色,足3對(duì),足上無(wú)葉狀剛毛(圖版Ⅰ:2)。背毛(dorsalsetae)3對(duì)(d1～d3),無(wú)第4背毛(d4),后側(cè)毛(lateralpostanalbristle,lp)和胛外毛(sce)各1對(duì)(圖版Ⅰ:3)?；?jié)桿(coxalrod,cr)發(fā)達(dá),為端部延長(zhǎng)的中空管;外生殖器尚未發(fā)育完全,僅一對(duì)肛后毛(postanal,pa)(圖版Ⅰ:4)。2.3生殖感覺(jué)器伯氏嗜木螨若螨平均大小約為321.8μm×144.5μm,無(wú)色,足4對(duì),基節(jié)桿已消失,生殖孔(gonopore,Gp)不發(fā)達(dá),開(kāi)始出現(xiàn)生殖感覺(jué)器,有肛毛(a1,a2,a3)3對(duì)(圖版Ⅰ:5);已出現(xiàn)第4背毛(d4)、前側(cè)毛(lateralanteriorbristle,la)、后側(cè)毛(lp)和肩內(nèi)毛(innerhumeralsetae,hi),但均較成螨短(圖版Ⅰ:6)。2.4骨化及微凸的分布伯氏嗜木螨休眠體平均大小約為300.2μm×204.1μm,棕色,體表呈拱形且光滑,前足體(propodosoma)呈三角形,向前由寬圓形逐漸變窄形成尖頂;頂內(nèi)毛(internalverticals,vi)著生在頂前緣中部上(圖版Ⅰ:7)。胛毛(scapularsetae,sc)2對(duì),較短,排列呈弧形。后半體長(zhǎng)為前足體的4～5倍,有細(xì)微的剛毛(圖版Ⅰ:8)。生殖板骨化明顯,位于吸盤板近顎體端上緣,生殖孔縱裂位于生殖板中央,其兩側(cè)有吸盤和剛毛各1對(duì)。吸盤板上共有4對(duì)成對(duì)的吸盤、1個(gè)單吸盤和2對(duì)類圓形微凸。1對(duì)中央吸盤、2對(duì)側(cè)吸盤和1對(duì)前吸盤呈對(duì)稱分布,1個(gè)后吸盤呈梨形位于吸盤板后方;除前吸盤周緣呈現(xiàn)放射狀條紋,其余吸盤較光滑,2對(duì)類圓形微凸對(duì)稱的分布在同側(cè)側(cè)吸盤之間和側(cè)吸盤與后吸盤之間,其直徑約為中央吸盤的1/4～1/3(圖版Ⅰ:9)。各足爪和前跗節(jié)發(fā)達(dá),跗節(jié)Ⅰ和Ⅱ有剛毛附著,且末端剛毛彎曲呈葉狀(frontiersetae,f)包圍著爪,跗節(jié)Ⅰ較跗節(jié)Ⅱ第一感棒(solenidia,ω1)長(zhǎng),各跗節(jié)ω1端部比該節(jié)基部粗,脛節(jié)Ⅰ和Ⅱ的脛節(jié)毛(setaeoftibia,gt)和膝節(jié)毛(setaeofgenu,mg)均為刺狀,較ω1短(圖版Ⅰ:10)。2.5基節(jié)及前側(cè)毛、格氏器附控制節(jié)伯氏嗜木螨雄成螨平均大小約為670.2μm×300.4μm,無(wú)色,表皮光滑有光澤,附肢淡棕色;在潮濕環(huán)境軀體呈紡錘形,以足Ⅲ、Ⅳ間為最寬。顎體狹長(zhǎng),頂端逐漸變細(xì)分叉成兩個(gè)活動(dòng)的螯鉗,螯下可見(jiàn)左右1對(duì)須肢成三角狀,末端分叉,上附有感器,顎體腹面前1/3附有剛毛一對(duì)(圖版Ⅰ:11)。前足體板呈長(zhǎng)方形,后緣稍凹或不規(guī)則;除頂內(nèi)毛(vi)外,所有軀體背面剛毛幾乎完全光滑并在基部加粗,頂外毛(ve)短小,位于前足體板側(cè)緣中間;2對(duì)胛毛彼此間等距,胛外毛(sce)比胛內(nèi)毛(sci)長(zhǎng)3～4倍;基節(jié)上毛(supra-coxalseta,ps)幾乎光滑且比背毛(d1)長(zhǎng),d2為d1長(zhǎng)度的2～3倍,前側(cè)毛(la)和肩內(nèi)毛(hi)為d1長(zhǎng)度的1.5～2倍,背毛d3,d4和后側(cè)毛(lp)較長(zhǎng),且d4超出軀體末端(圖版Ⅰ:12)。格氏器(Grandjean’sorgan)位于顎體根部側(cè)面背腹交接處,左右各1,為略彎曲表面有棘狀突起的棒狀物(圖版Ⅱ:1)。腹面,基節(jié)內(nèi)突板發(fā)達(dá)且形狀不規(guī)則,后半體腹面,肛后毛pa1最短,pa3比pa2長(zhǎng)3～5倍;有明顯的圓形肛門吸盤(analsucker,as)及前肛毛(preanalseta,pra)(圖版Ⅱ:2,3)。第1和第2附肢較細(xì)長(zhǎng),前跗節(jié)發(fā)達(dá),各跗節(jié)遠(yuǎn)端附有感棒(ω),感棒對(duì)側(cè)附有剛毛(a～e),末端為鉤狀的爪,末端葉狀剛毛(f)和側(cè)中毛(rimacrostichalbristle,ra)呈鐮狀且頂端膨大呈葉片狀,各附肢末端均見(jiàn)一鐮狀鉤(圖版Ⅱ:4);第3、4附肢附著的剛毛和感器較1、2附肢明顯減少,第4附肢末節(jié)遠(yuǎn)端有吸盤(ambulacra,aa)1對(duì)(圖版Ⅱ:5)。雄性生殖感覺(jué)器生殖瓣外觀呈心形且骨化明顯,分為左右兩生殖瓣(genitalvalve,gv),兩側(cè)各著生一根生殖毛(genitalseta,i),生殖瓣內(nèi)緣凹凸不平(圖版Ⅱ:6)。2.6成蟲(chóng)、生殖感覺(jué)器伯氏嗜木螨雌成螨軀體長(zhǎng)約832.1μm×413.4μm,無(wú)色,表皮光滑有光澤,個(gè)體比雄螨大且圓;背毛較雄螨短,背毛d4短于d3,前側(cè)毛(la)與后側(cè)毛(lp)等長(zhǎng),肩側(cè)毛(hi)短小,胛外毛(sce)、胛內(nèi)毛(sci)和頂內(nèi)毛(vi)的排列與雄成螨相似(圖版Ⅱ:7)。附肢淡棕色;生殖感覺(jué)器位于蟲(chóng)體腹面足Ⅲ之間,生殖區(qū)呈心形,雌螨生殖孔為一縱縫,兩生殖瓣合成舟狀,末端分開(kāi)形成產(chǎn)卵孔,周圍有3對(duì)生殖毛(i)(圖版Ⅱ:8,9)。肛門周圍生有6對(duì)微小的肛毛(a),其中2對(duì)位于肛門前端兩側(cè),4對(duì)圍繞在肛門后端(圖版Ⅱ:10)。雌性成螨的螯鉗較雄性粗短(圖版Ⅱ:11),顎體與雄性成螨相似(圖版Ⅱ:12)3伯氏嗜木讓外生殖器的形態(tài)特征應(yīng)用顯微鏡直接觀察螨類的形態(tài)特征進(jìn)行螨種鑒定是常用的生物分類方法(王鳳葵等,1999;李朝品等,2005;佘俊萍等,2011)。該技術(shù)具有制片流程簡(jiǎn)單、無(wú)需復(fù)雜儀器設(shè)備等優(yōu)點(diǎn)。但其不足之處也顯而易見(jiàn),限于設(shè)備的精準(zhǔn)度,標(biāo)本的細(xì)微結(jié)構(gòu)不易被發(fā)現(xiàn)。但借助SEM觀察物種的細(xì)微結(jié)構(gòu)在螨類形態(tài)學(xué)研究中得到了廣泛應(yīng)用(丁曉昆和李芳,1990;Martin,1991;洪曉月等,1994;張曉謙等,2006;Ashrafetal.,2011;趙學(xué)影等,2012)。本研究應(yīng)用掃描電子顯微鏡對(duì)伯氏嗜木螨的細(xì)微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了細(xì)致的觀察,尤其是對(duì)其卵、幼螨、不同階段的若螨、雌雄成螨等發(fā)育階段的表皮結(jié)構(gòu)、剛毛排列、吸盤、生殖感覺(jué)器和肛區(qū)等結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行了細(xì)致觀察,并結(jié)合光鏡形態(tài),系統(tǒng)闡述了其形態(tài)特征。掃描電鏡下觀察到該螨在發(fā)育過(guò)程中形態(tài)變化包括:①足:由3對(duì)足、足上無(wú)葉狀剛毛(幼螨)→4對(duì)足(若螨)→4對(duì)足、爪和前跗節(jié)發(fā)達(dá)、出現(xiàn)葉狀毛、脛節(jié)毛及膝節(jié)毛等結(jié)構(gòu)(休眠體);②剛毛:剛毛則由3對(duì)背毛、無(wú)d4和后側(cè)毛lp(幼螨)→4對(duì)背毛、出現(xiàn)d4和后側(cè)毛lp(若螨)→背端毛出現(xiàn)杯狀吸盤、跗節(jié)Ⅳ出現(xiàn)櫛齒(休眠體)→剛毛進(jìn)一步增加、伸長(zhǎng)(成螨);③外生殖器及其附屬結(jié)構(gòu):由外生殖器尚未發(fā)育、僅有1對(duì)肛毛(幼螨)→出現(xiàn)生殖感覺(jué)器、生殖毛和側(cè)肛毛各1對(duì)(若螨)→生殖板明顯骨化、生殖孔兩側(cè)有1對(duì)吸盤和1對(duì)剛毛(休眠體)→生殖感覺(jué)器骨化并呈心形(成螨)。雄性和雌性成螨的生殖感覺(jué)器的剛毛數(shù)量上有明顯差異,雄性成螨僅有1對(duì)剛毛,而雌性成螨則有3對(duì)生殖毛。此外,我們還描述了休眠體吸盤板的數(shù)量和詳細(xì)結(jié)構(gòu),其數(shù)量和結(jié)構(gòu)與以前報(bào)道的吸盤板上有8個(gè)吸盤(李朝品和武前文,1996;李朝品等,2006)有明顯差異,其原因有待進(jìn)一步研究證實(shí)。伯氏嗜木螨是房舍螨類的主要種類,對(duì)儲(chǔ)藏物及人畜的為害十分嚴(yán)重,用粉螨污染的飼料喂養(yǎng)牲畜可影響其生長(zhǎng),甚至產(chǎn)生疾病、中毒、流產(chǎn)等。粉螨的分泌物、代謝產(chǎn)物和死螨裂解物可引起人、畜中毒和過(guò)敏性疾病。伯氏嗜木螨更是中華真地鱉的重要害螨,嚴(yán)重影響中華真地鱉的品質(zhì)