局部用藥的毒性研究課件

第二十二章局部用藥的毒性研究第二十二章局部用藥的毒性研究1案例

★痤瘡是一種毛囊皮脂炎癥，多發(fā)于青年男女面部、胸部等皮脂分泌旺盛的區(qū)域，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，且易反復(fù)發(fā)作。

◆克林霉素-過氧苯甲酰凝膠是由克林霉素磷酸脂與過氧苯甲酰制成的復(fù)方制劑，臨床用于痤瘡治療。要求觀察其對(duì)皮膚的刺激性與過敏反應(yīng)。案例★痤瘡2

局部用藥的毒性試驗(yàn)是根據(jù)局部用藥部位的解剖和生理特點(diǎn)設(shè)計(jì)的。

涂劑、擦劑皮膚用藥膏劑、凝膠劑其他透皮吸收制劑常用局部用藥制劑滴眼劑、滴鼻劑噴霧劑直腸和陰道制劑肌內(nèi)注射

局部用藥的毒性試驗(yàn)是根據(jù)局部用藥部3第一節(jié)皮膚用藥的毒性研究皮膚組織結(jié)構(gòu)

表皮真皮皮下組織第一節(jié)皮膚用藥的毒性研究皮膚組織結(jié)構(gòu)4

皮膚覆蓋全身。表皮較薄，厚為0.1-0.2mm。角質(zhì)層

表皮顆粒層生發(fā)層真皮依附于皮下組織，厚約2mm。膠原

真皮彈性硬蛋白纖維母細(xì)胞皮膚覆蓋全身。5一、化學(xué)物質(zhì)對(duì)皮膚毒性作用的類型根據(jù)性質(zhì)不同，由藥物引起的皮膚損害包括原發(fā)性刺激炎癥反應(yīng)和致敏反應(yīng)，偶然也可引起皮膚癌。一、化學(xué)物質(zhì)對(duì)皮膚毒性作用的類型根據(jù)性質(zhì)不同，6（一）皮膚原發(fā)性刺激

原發(fā)性刺激—藥物直接作用于皮膚引起的病理性反應(yīng)。紅斑、水腫原發(fā)性刺激的表現(xiàn)水皰瘡潰瘍（一）皮膚原發(fā)性刺激7

強(qiáng)堿脂溶性溶劑原發(fā)性刺激機(jī)理鎘酸鹽銀、汞、砷等金屬鹽

特征：

有明確的毒理學(xué)量-效關(guān)系。首次接觸即可產(chǎn)生某種特征。局部用藥的毒性研究課件8（二）皮膚致敏

皮膚致敏為變態(tài)反應(yīng)，包括：藥物致敏和光敏反應(yīng)。

作用機(jī)制

藥物與蛋白以共價(jià)鍵結(jié)合，具用免疫原性。藥物在光的作用下，形成半抗原性物質(zhì)。

特征

沒有明確的毒理學(xué)量-效關(guān)系。再次接觸該藥物才能激發(fā)特定癥狀。（二）皮膚致敏9（三）皮膚致癌

有機(jī)大分子化合物----多環(huán)芳烴類金屬鹽----無(wú)機(jī)砷鹽（三）皮膚致癌10（一）皮膚用藥急性毒性實(shí)驗(yàn)

1.定義：

指動(dòng)物完整或破損皮膚一次性接觸受試物后在短期內(nèi)出現(xiàn)的毒性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)。2.受試物：

使用臨床制劑，如臨床制劑濃度無(wú)法滿足劑量要求，受試物為粉末狀的用適宜基質(zhì)（如凡士林、羊毛脂等）溶解混勻。

（一）皮膚用藥急性毒性實(shí)驗(yàn)1.定義：113.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)條件每組動(dòng)物數(shù)：

一般選白色家兔、小型豬4-6只，大鼠或豚鼠10只，雌雄各半；動(dòng)物體重：

家兔2-3kg，豚鼠200-300g，大鼠200-250g，小型豬30-40kg。

飲食、攝水：

自由飲食、攝水。

動(dòng)物房溫濕度：家兔、豚鼠及小型豬控制在18-26℃；大鼠控制在20-25℃，相對(duì)濕度均為40%-70%；換氣次數(shù)為10-20次/min；12h明暗交替光照。3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)條件124.劑量設(shè)計(jì)

至少應(yīng)設(shè)三個(gè)劑量組，另設(shè)賦形劑對(duì)照組，必要時(shí)設(shè)空白對(duì)照組。如受試物在擬用臨床給藥時(shí)有可能與破損皮膚接觸，則應(yīng)另設(shè)破損皮膚組。

4.劑量設(shè)計(jì)135.實(shí)驗(yàn)操作

給藥前24h對(duì)給藥區(qū)（通常在背部）進(jìn)行脫毛處理，給藥時(shí)將受試物均勻涂于動(dòng)物脫毛區(qū)，液體制劑，應(yīng)將受試物涂于敷料上，再貼于脫毛或破損皮膚區(qū)，用半封閉的外罩固定敷料。涂敷24h后，除去敷料，用溫水或適宜的溶劑除去殘留的受試物和賦形劑。

5.實(shí)驗(yàn)操作14觀察期：

連續(xù)觀察14d，觀察1-2次/天。也可根據(jù)出現(xiàn)毒性反應(yīng)的情況適當(dāng)延長(zhǎng)。

觀察指標(biāo)：

給藥前后7d、14d稱體重，觀察給藥后動(dòng)物的全身反應(yīng)：皮毛、眼睛、黏膜、呼吸、行為、自主活動(dòng)、肌張力等，有無(wú)顫抖、震顫、抽搐、流涎、腹瀉、少動(dòng)、精神萎靡不振、

昏迷等毒性反應(yīng)癥狀。若有動(dòng)物死亡應(yīng)立即進(jìn)行尸檢，

有明顯異常時(shí)，應(yīng)進(jìn)一步進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。6.觀察指標(biāo)觀察期：

連續(xù)觀察14d，觀察1-2次/天。157.結(jié)果評(píng)價(jià)對(duì)觀察到的陽(yáng)性癥狀結(jié)合大體解剖或病理組織學(xué)結(jié)果進(jìn)行綜合分析，與對(duì)照組比較，對(duì)動(dòng)物的毒性反應(yīng)及死亡原因作出明確判斷。病理組對(duì)照組7.結(jié)果評(píng)價(jià)病理組對(duì)照組16（二）皮膚給藥長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)1.定義指動(dòng)物完整或破損皮膚長(zhǎng)期反復(fù)接觸受試物后出現(xiàn)的毒性反應(yīng)及其可逆程度實(shí)驗(yàn)。2.受試物與“皮膚給藥急性毒性試驗(yàn)”基本相同。3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及條件與“皮膚給藥急性毒性試驗(yàn)”一致。

（二）皮膚給藥長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)1.定義174.劑量設(shè)計(jì)至少應(yīng)設(shè)三個(gè)劑量組.

(可設(shè)賦形劑對(duì)照組，必要時(shí)設(shè)空白對(duì)照組。)高劑量：原則上應(yīng)使動(dòng)物產(chǎn)生明顯的毒性反應(yīng)，甚至出現(xiàn)個(gè)別動(dòng)物死亡；低劑量：原則上應(yīng)高于動(dòng)物藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)的等效劑量，并不使動(dòng)物出現(xiàn)毒性反應(yīng)；中劑量：動(dòng)物可出現(xiàn)輕度毒性反應(yīng)。4.劑量設(shè)計(jì)185.給藥期限藥物臨床療程皮膚給藥長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)給藥期限可以支持的臨床研究階段單次給藥2周Ⅱ期，Ⅲ期（及生產(chǎn)）≤2周1個(gè)月Ⅱ期，Ⅲ期（及生產(chǎn)）2周~1個(gè)月1個(gè)月Ⅱ期3個(gè)月Ⅲ期（及生產(chǎn)）≤3個(gè)月3個(gè)月Ⅱ期6個(gè)月Ⅲ期（及生產(chǎn)）≤6個(gè)月6個(gè)月Ⅱ期，Ⅲ期（及生產(chǎn)）>6個(gè)月6個(gè)月Ⅱ期，Ⅲ期（及生產(chǎn)）5.給藥期限藥物臨床療程皮膚給藥長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)給藥期限可以支持196.給藥頻率★給藥期限<3個(gè)月，原則上應(yīng)每天給藥；★給藥期限≥3個(gè)月，每周至少應(yīng)給藥6d；

★也可根據(jù)臨床給藥頻率給藥。6.給藥頻率207.恢復(fù)期限

給藥結(jié)束后保留部分動(dòng)物，繼續(xù)觀察其可能出現(xiàn)的延遲性毒性反應(yīng)，并了解毒性反應(yīng)的可逆程度。根據(jù)受試物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)、靶器官或靶組織的毒性反應(yīng)和實(shí)際恢復(fù)情況確定恢復(fù)期的長(zhǎng)短。

7.恢復(fù)期限218.實(shí)驗(yàn)操作

首次給藥前24h對(duì)給藥區(qū)在背部進(jìn)行脫毛處理。每天給藥1次，每次至少接觸6h。保證受試物與給藥部位具有良好接觸并避免動(dòng)物食入藥物?？捎眉啿嫉葻o(wú)刺激性輔料包裹或給動(dòng)物穿上特制的通透性好的外套。8.實(shí)驗(yàn)操作229.觀察指標(biāo)

除增加給藥部位皮膚及其周圍組織乃至全身皮膚變化和皮膚病理學(xué)檢查外，其余指標(biāo)與長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)要求一樣。9.觀察指標(biāo)除增加給藥部位皮膚及其周圍組織23

10.結(jié)果評(píng)價(jià)局部毒性反應(yīng)的結(jié)果評(píng)價(jià)與長(zhǎng)毒實(shí)驗(yàn)要求一樣，應(yīng)根據(jù)各檢測(cè)指標(biāo)及病理組織學(xué)檢查結(jié)果綜合分析。除此以外還應(yīng)注意評(píng)價(jià)給藥局部及其周圍組織的毒性反應(yīng)。10.結(jié)果評(píng)價(jià)24（三）皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)1.定義：皮膚刺激性：指經(jīng)皮膚給藥后，在皮膚上產(chǎn)生的可逆性炎性病變。

（若給藥部位產(chǎn)生了不可逆性的組織損傷則稱為腐蝕性。）皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)：是觀察動(dòng)物的皮膚接觸受試物后是否引起紅腫、充血、滲出等局部反應(yīng)。（三）皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)1.定義：252.受試物

應(yīng)采用與臨床應(yīng)用制劑一致，符合臨床用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的受試物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，同時(shí)注明其名稱、來(lái)源、批號(hào)、含量（或規(guī)格）、賦形劑、保存條件及配制方法等，其中賦形劑和雜質(zhì)等的名稱和量應(yīng)盡可能明確，并附有研制單位的自檢報(bào)告。所用賦形劑應(yīng)該標(biāo)明批號(hào)、規(guī)格和生產(chǎn)廠家，并符合實(shí)驗(yàn)要求。2.受試物263.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物多種哺乳動(dòng)物可以選擇，一般首選白色家兔，每組動(dòng)物數(shù)4～8只，雌、雄各半。也可以選用其他種屬的動(dòng)物(如小型豬等),選擇家兔和小型豬以外的動(dòng)物應(yīng)闡明合理性。3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物274.實(shí)驗(yàn)操作

設(shè)賦形劑對(duì)照，采用同體左右側(cè)自身對(duì)比法。試驗(yàn)前24h對(duì)給藥區(qū)進(jìn)行脫毛處理。去毛范圍各3cm×3cm。(給藥前應(yīng)檢查去毛皮膚是否因去毛而受損傷，有損傷的皮膚不宜進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。)進(jìn)行破損皮膚的刺激性研究時(shí)，在用藥部位用砂紙磨或劃“井”字并以滲血為度。

4.實(shí)驗(yàn)操作284.實(shí)驗(yàn)操作受試物藥量一般是固體或半固體0.5g，液體0.5ml，直接涂布于一側(cè)已去毛的皮膚上，然后用兩層紗布(2.5cm×2.5cm)和一層玻璃紙或類似物覆蓋，再用無(wú)刺激性膠布和繃帶加以固定；另一側(cè)涂布賦形劑做對(duì)照。貼敷時(shí)間至少4h。貼敷結(jié)束后，除去受試物并用溫水或無(wú)刺激性溶劑清潔給藥部位。注：多次給藥皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)應(yīng)連續(xù)在同一部位給藥，每次給藥時(shí)間相同，貼敷期限一般不超過4周。4.實(shí)驗(yàn)操作29刺激反應(yīng)分值刺激反應(yīng)分值紅斑無(wú)紅斑0輕度紅斑（勉強(qiáng)可見）1中度紅斑（明顯可見）2重度紅斑3紫紅色紅斑到輕度焦痂形成4水腫無(wú)水腫0輕度水腫（勉強(qiáng)可見）1中度水腫（明顯隆起）2重度水腫（皮膚隆起1mm，輪廓清楚）3嚴(yán)重水腫（皮膚隆起1mm以上并有擴(kuò)大）4總分值85.觀察指標(biāo)在自然光線或全光譜燈光下觀察皮膚反應(yīng)。按表給出的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)皮膚紅斑和水腫進(jìn)行評(píng)分。刺激反應(yīng)306.結(jié)果評(píng)價(jià)單次給藥實(shí)驗(yàn)：計(jì)算每一觀察時(shí)間點(diǎn)各組受試物及賦形劑皮膚反應(yīng)積分的平均分值，按表進(jìn)行刺激強(qiáng)度評(píng)價(jià)。

多次給藥實(shí)驗(yàn)：首先計(jì)算每一觀察時(shí)間點(diǎn)各組積分均值，然后計(jì)算觀察期限內(nèi)每天每只動(dòng)物積分均值，按表進(jìn)行刺激強(qiáng)度評(píng)價(jià)。分值評(píng)價(jià)分值評(píng)價(jià)0~0.49無(wú)刺激性0.5~2.99輕度刺激性3.0~5.99中度刺激性6.0~8.0強(qiáng)刺激性6.結(jié)果評(píng)價(jià)分值31（四）皮膚吸收試驗(yàn)（1）整體皮膚吸收試驗(yàn)

化合物經(jīng)皮滲透的量同皮膚微灌流量直接相關(guān)，通過測(cè)量與皮膚灌流量相關(guān)的電壓，測(cè)算出化學(xué)經(jīng)皮吸收速率。

1）LDV法

用643.8nm氦-氖激光，照射血管中流動(dòng)中的紅細(xì)胞，測(cè)量用藥前后變化，測(cè)定出皮膚吸收速度。（四）皮膚吸收試驗(yàn)（1）整體皮膚吸收試驗(yàn)32PPG法

LED射出的800-940nm紅外線照射，收集反射光轉(zhuǎn)變成電壓波譜，通過電壓波譜變化，計(jì)算皮膚吸收量的大小。PPG法33（2）離體皮膚吸收試驗(yàn)靜態(tài)滲透裝置上室防藥劑，下室接受液，下室中間方皮膚并密封，藥劑放于皮膚之上，每隔一定時(shí)間后，測(cè)定接受液，計(jì)算皮膚滲透率。流動(dòng)滲透裝置上述方法的改進(jìn)，接受液為血漿或白蛋白，以5ml/小時(shí)的速度灌流，測(cè)定不同時(shí)間灌流液的藥量。以次測(cè)定皮膚的透過率。（2）離體皮膚吸收試驗(yàn)34（五）皮膚過敏試驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^動(dòng)物皮膚重復(fù)接觸受試物，觀察機(jī)體免疫系統(tǒng)反映在皮膚上的表現(xiàn)。方法實(shí)驗(yàn)材料1）動(dòng)物-豚鼠2）受試藥物-膏劑、液體不稀釋直接涂敷3）陽(yáng)性致敏物：2,4-二硝基氯代苯1%-致敏濃度0.1%-激發(fā)濃度（五）皮膚過敏試驗(yàn)?zāi)康?5試驗(yàn)方法

1）試驗(yàn)分組隨機(jī)分成三組：給藥組、賦形劑組、陽(yáng)性對(duì)照組2）致敏接觸0.1-0.2ml(g)涂于脫毛區(qū)，接觸6小時(shí)，第7天和14天亦同樣方法重復(fù)。3）激發(fā)接觸末次給藥后第14天，激發(fā)給藥，6、24、48和72小時(shí)觀察皮膚過敏情況。試驗(yàn)方法36結(jié)果判斷與評(píng)價(jià)皮膚過敏反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)刺激反應(yīng)程度分值刺激反應(yīng)程度分值紅斑形成水腫形成無(wú)紅斑0無(wú)水腫0輕度紅斑1輕度水腫1中度紅斑2中度水腫2重度紅斑3重度水腫3水腫性紅斑4最高總分值7結(jié)果判斷與評(píng)價(jià)37致敏率分類過敏反應(yīng)強(qiáng)度致敏率%弱致敏性0-10輕度致敏性10-30中度致敏性30-60高度致敏性60-80極度致敏性80-100紅斑形成總分+水腫形成總分反應(yīng)平均值=合計(jì)動(dòng)物總數(shù)致敏率分類38（六）皮膚光敏試驗(yàn)?zāi)康挠^察受試物接觸皮膚后遇光照否有光敏反應(yīng)試驗(yàn)方法1）光敏反應(yīng)試驗(yàn)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)2）光毒性試驗(yàn)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)（六）皮膚光敏試驗(yàn)?zāi)康?9第二節(jié)眼睛用藥刺激性試驗(yàn)眼睛的結(jié)構(gòu)第二節(jié)眼睛用藥刺激性試驗(yàn)眼睛的結(jié)構(gòu)40

角膜結(jié)膜炎炎癥角膜表面水腫上皮脫落刺激作用結(jié)膜充血、水腫灼痛、流淚、畏光

慢性結(jié)膜炎、瞼腺炎、分泌物增多局部用藥的毒性研究課件41

試驗(yàn)?zāi)康?/p>

角膜渾濁刺激性試驗(yàn)

試驗(yàn)方法

虹膜

結(jié)果與評(píng)價(jià)

結(jié)膜水腫分泌物

42目的觀察動(dòng)物眼睛接觸受試物所產(chǎn)生的刺激反應(yīng)方法家兔，原液（原膏）加入眼睛腫0.1ml(0.1g)，閉合5-10分鐘。6、24、48和72小時(shí)至7天眼刺激情況。結(jié)果與評(píng)價(jià)目的43眼刺激反應(yīng)評(píng)分眼刺激反應(yīng)分值角膜渾濁0-4虹膜0-2結(jié)膜0-3水腫0-4分泌物0-3總分16眼刺激反應(yīng)評(píng)分44眼刺激性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)刺激程度積分無(wú)刺激性0-3輕度刺激性4-8中度刺激性9-12重度刺激性13-16眼刺激性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)刺激程度45第三節(jié)肌內(nèi)注射用藥局部刺激性試驗(yàn)?zāi)康募?nèi)注射后藥物對(duì)肌肉的刺激性反應(yīng)情況。方法家兔6只，一側(cè)骨四頭肌注射供試物，另一側(cè)注射生理鹽水1-2ml作為對(duì)照，48小時(shí)處死動(dòng)物，取骨四頭肌縱向剖開，肉眼觀察，觀察注射部位刺激情況，必要時(shí)作組織病理學(xué)檢查。第三節(jié)肌內(nèi)注射用藥局部刺激性試驗(yàn)?zāi)康?6家兔股四頭肌肌肉組織家兔股四頭肌肌肉組織47結(jié)果與評(píng)價(jià)肌內(nèi)注射刺激反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)級(jí)數(shù)刺激反應(yīng)0給藥部位無(wú)明顯反應(yīng)1給藥部位輕度充血，直徑0.5cm以下2給藥部位中度充血，直徑1.0cm以下3給藥部位中度充血，紅腫，肌肉有變性4出現(xiàn)肌肉褐色變性，壞死0.5cm以下5肌肉嚴(yán)重變性，出現(xiàn)大片壞死超過2認(rèn)為不符合規(guī)定，不可進(jìn)行肌內(nèi)注射結(jié)果與評(píng)價(jià)48第四節(jié)靜脈給藥局部刺激性試驗(yàn)

見第二十章：全身用藥毒性試驗(yàn)中-血管刺激性試驗(yàn)第四節(jié)靜脈給藥局部刺激性試驗(yàn)見第二十章：全身用藥毒性49第五節(jié)滴鼻劑和吸入劑的毒性試驗(yàn)一、滴鼻劑和吸入劑急性毒性試驗(yàn)?zāi)康挠^察受試物一次滴入或吸入后對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生的毒性反應(yīng)或死亡情況。方法3個(gè)劑量組，組距0.65-0.85,滴入或吸入；4小時(shí)后即可以及7-14天觀察動(dòng)物。結(jié)果評(píng)價(jià)第五節(jié)滴鼻劑和吸入劑的毒性試驗(yàn)一、滴鼻劑和吸入劑急性毒性試50二、滴鼻劑和吸入劑刺激性試驗(yàn)?zāi)康挠^察受試物一次滴入或吸入后對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生的刺激反應(yīng)。方法將受試物滴入或噴霧于動(dòng)物，24小時(shí)后處死動(dòng)物，觀察有無(wú)充血、紅腫等。結(jié)果評(píng)價(jià)二、滴鼻劑和吸入劑刺激性試驗(yàn)51第六節(jié)應(yīng)用于直腸、陰道制劑的毒性試驗(yàn)一、直腸、陰道用藥急性毒性試驗(yàn)?zāi)康氖茉囄飳?duì)動(dòng)物直腸或陰道產(chǎn)生的毒性反應(yīng)或死亡情況。方法栓劑、膏劑或液體等，將受試物輕置入直腸或陰道內(nèi)。至少接觸4小時(shí)，觀察即可以及7-14天的情況。結(jié)果評(píng)價(jià)第六節(jié)應(yīng)用于直腸、陰道制劑的毒性試驗(yàn)一、直腸、陰道用藥急性52二、直腸、陰道用藥長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)?zāi)康姆椒ńY(jié)果評(píng)價(jià)二、直腸、陰道用藥長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)53三、直腸、陰道用藥刺激性試驗(yàn)?zāi)康姆椒ńY(jié)果評(píng)價(jià)四、有關(guān)問題

1、給藥量與給藥濃度2、給藥途徑3、多次給藥問題4、對(duì)照組的建立三、直腸、陰道用藥刺激性試驗(yàn)541.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇依據(jù)擬采用的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ秃陀^察指標(biāo)選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，一般每個(gè)實(shí)驗(yàn)選擇一種動(dòng)物進(jìn)行評(píng)價(jià)。2.給藥的頻率與期限給藥的頻率與期限應(yīng)依據(jù)擬定臨床應(yīng)用的情況來(lái)決定。重復(fù)給藥的制劑，一般每天給藥一次，給藥期限最長(zhǎng)不超過4周。單次給藥的制劑可用單次給藥的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。3.可逆性觀察為明確毒性反應(yīng)的性質(zhì)，建議進(jìn)行停藥后恢復(fù)期的觀察。局部毒性反應(yīng)的可逆性評(píng)價(jià)應(yīng)包括局部及相關(guān)部位的反應(yīng)。小結(jié)：注意問題1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇小結(jié)：注意問題554.受試物受試物應(yīng)與臨床應(yīng)用制劑一致。5.對(duì)照組以溶媒和是（或）賦形劑作陰性對(duì)照，必要時(shí)用已上市制劑作對(duì)照。6.劑量劑量設(shè)計(jì)主要應(yīng)該考慮受試物濃度和總劑量。一般采用與