第三節(jié)第一節(jié) 外植體的脫分化

第三節(jié)第一節(jié)外植體的脫分化第1頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月脫分化指已分化的外植體細胞（組織、器官），在切割損傷和培養(yǎng)物內外因素作用下，逐漸喪失其原有的分化的結構和功能，合成代謝變得旺盛、細胞壁由厚變薄，其內部結構也發(fā)生變化，細胞高度液泡化，形成無組織的細胞團或愈傷組織第2頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月再分化指離體培養(yǎng)物由脫分化狀態(tài)再度分化的過程第3頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月在植物組織培養(yǎng)中，主要目標是誘導愈傷組織的形成和形態(tài)的發(fā)生第4頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月外植體的細胞應激于損傷和離體培養(yǎng)而出現的脫分化，是培養(yǎng)物細胞在結構上可見的第一個變化脫分化的細胞在一定的條件下可進行不斷的分裂和生長也可不經分裂而直接再分化為其他類型的細胞或胚狀體第5頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月一、誘導期間的細胞脫分化過程變化的總體特征：細胞質顯著變濃，大液泡消失，核體積增加并逐漸移位至細胞中央，細胞器增加液泡蛋白質的出現和質體轉變?yōu)樵|體被認為是細胞脫分化的重要特征第6頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月脫分化的三個階段1、啟動階段表現：細胞質增生，并開始向細胞中央伸出細胞質絲，液泡蛋白出現第7頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月2、演變階段細胞核開始向中央移動，質體演變成原質體第8頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月3、脫分化終結階段細胞回復到分生細胞狀態(tài)，細胞分裂即將開始第9頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月二、與脫分化有關的因子及其作用1、損傷刺激————————引起脫分化的首個因子導致外植體產生生化反應：氣體交換率變化，實際上，也導致呼吸活性的變化將馬鈴薯塊莖組織做成薄片（1~2mm）,隨著切斷后的時間的推移，呼吸速度增加。馬鈴薯、胡蘿卜和菊苣等貯藏組織在20~24h似乎達到最大的呼吸速度，故稱之為“損傷呼吸”損傷呼吸的形成與誘發(fā)前的是相異的第10頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月導致很多其他酶活性的增加如菊苣中的抗壞血酸氧化酶、磷酸酶、ATP酶，轉化酶、馬鈴薯中的6-磷酸葡萄糖（酸）脫氫酶和異構酶、丙酮酸激酶等活性均增加第11頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月2、培養(yǎng)細胞的異質性用莖、胚軸等典型的各種已分化的細胞類型的復合物作外植體，細胞之間存在很大的異質性，異質性細胞對培養(yǎng)條件刺激有不同的敏感性。因此只有某種類型或某一部分的細胞能夠脫分化以至分裂，其他的細胞則不能。特別值得注意的是異質性的兩個方面是不同的倍數體和不同的生理狀態(tài)第12頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月3、生長物質的影響切面很容易形成多酚物質沉積的保護層，從而又可使表層細胞停止分裂但如加入2,4-D等生長物質，則可導致外植體在細胞生物學上與細胞分裂有關的一些強烈變化，可使進入第一次分裂的細胞百分率更高加入生長素的同時如第13頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月3、生長物質的影響切面很容易形成多酚物質沉積的保護層，從而又可使表層細胞停止分裂但如加入2,4-D等生長物質，則可導致外植體在細胞生物學上與細胞分裂有關的一些強烈變化，可使進入第一次分裂的細胞百分率更高加入生長素的同時如配合激動素效果更好第14頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月4、光線的影響光線對外植體的最初的細胞分