薯類種子生產(chǎn)基本技術(shù)-薯類脫毒技術(shù)

《薯類種子種苗生產(chǎn)技術(shù)》培養(yǎng)基的配制、滅菌與保存主要內(nèi)容一二培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基的滅菌三培養(yǎng)基的保存一、培養(yǎng)基的配制（一）培養(yǎng)基的種類1.培養(yǎng)基形態(tài)不同：固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基2.培養(yǎng)過(guò)程不同：初代培養(yǎng)基、繼代培養(yǎng)基3.其作用不同：誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基4.營(yíng)養(yǎng)水平不同：基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基的配制（二）幾種常見培養(yǎng)基的特點(diǎn)1.MS培養(yǎng)基（1）無(wú)機(jī)鹽濃度高（2）高含量的氮、鉀，尤其是硝酸鹽（3）含有一定數(shù)量的銨鹽（4）營(yíng)養(yǎng)豐富（5）不需要添加更多的有機(jī)附加物1.MS培養(yǎng)基2.White培養(yǎng)基（1）1963年作了改良，提高M(jìn)gSO4的濃度和增加硼元素（2）無(wú)機(jī)鹽濃度較低（3）在生根培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)中有良好的效果大量元素含量微量元素含量鐵鹽含量有機(jī)物含量其他含量KNO380H3BO31.5Fe2(SO4)32.5肌醇100蔗糖30000Ca(NO3)24H2O300MnSO44H2O7.0煙酸0.3瓊脂8000MgSO47H2O720ZnSO47H2O3.0鹽酸硫胺素0.1

NaH2PO44H2O16.5MoO30.0001鹽酸吡哆辛0.1KCl65CuSO45H2O0.001甘氨酸3Na2SO42003.B5培養(yǎng)基（1）1968年由Gamborg等為培養(yǎng)大豆根細(xì)胞而設(shè)計(jì)。（2）含有較低的銨鹽。（3）較高的硝酸鹽和鹽酸硫胺素。組成成分?jǐn)?shù)量(mg/l）組成成分?jǐn)?shù)量(mg/l)KNO3

2500FeSO4·7H2O27.8CaCl2·2H2O150CuSO4·5H2O0.025MgSO4·7H2O250蔗糖40(NH4)2SO4134pH5.5KI0.75肌醇100H3BO43.0煙酸1.0MnSO4·4H2O10鹽酸吡哆醇1.0ZnSO4·7H2O2.0激動(dòng)素0.1Na2MoO4·2H2O0.252,4－D0.1－1.0CoCl2·6H2O0.025鹽酸硫銨10Na2-EDTA37.3

4.N6培養(yǎng)基（1）1974年朱至清等為水稻等禾谷類作物花藥培養(yǎng)設(shè)計(jì)。（2）KNO3和（NH4）SO4含量高，不含鉬。組成成分?jǐn)?shù)量(mg/l)組成成分(mg/l)KNO3

2.3Na2－EDTA37.3CaCl2·2H2O166FeSO4·7H2O27.8MgSO4·7H2O185蔗糖50KH2PO4

400pH5.8(NH4)2SO4

463煙酸0.5KI0.8鹽酸吡哆醇0.5H3BO31.6甘氨酸2.0MnSO4·4H2O4.4鹽酸硫銨1.0ZnSO4·7H2O1.5一、培養(yǎng)基的配制（三）培養(yǎng)基的配制一、培養(yǎng)基的配制（三）培養(yǎng)基的配制具體操作如下：1.取規(guī)定數(shù)量的糖源和凝固劑置于燒杯或搪瓷鍋內(nèi)，加蒸餾水加熱使之溶解，并不斷攪拌。2.根據(jù)計(jì)算所需量依次加入大量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)物、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)母液及其他特殊的附加物，攪拌均勻。3.加水定容至規(guī)定體積，攪拌均勻。4.調(diào)整培養(yǎng)基的pH值。5.分裝。6.封口。二、培養(yǎng)基的滅菌二、培養(yǎng)基的滅菌滅菌鍋使用注意問(wèn)題：1.鍋中應(yīng)放足量的水，以免造成空燒或干燒。2.裝鍋時(shí)不要過(guò)度傾斜，可保持內(nèi)部有一定的空間，利于蒸汽流動(dòng)。3.增壓前高壓鍋內(nèi)的空氣必須排凈，否則易影響滅菌效果。看守。二、培養(yǎng)基的滅菌滅菌鍋使用注意問(wèn)題：4.滅菌過(guò)程中，應(yīng)盡量保持壓力恒定，嚴(yán)格遵守滅菌時(shí)間5.排氣降壓時(shí)應(yīng)緩慢進(jìn)行。6.只有高壓鍋內(nèi)壓力表指針恢復(fù)到零后，才能開啟壓力鍋。7.高壓鍋工作時(shí)，應(yīng)有專人看守。三、培養(yǎng)基的保存1.滅菌后的培養(yǎng)基經(jīng)冷卻和凝固后即可檢驗(yàn)滅菌效果。檢驗(yàn)方法：將培養(yǎng)基置于培養(yǎng)室中3天，若沒有污染現(xiàn)象，說(shuō)明滅菌可靠，可以使用。三、培養(yǎng)基的保存2.保存在低溫條件下。常溫下保存時(shí)要進(jìn)行防塵和避光處理3.保存時(shí)間不可過(guò)長(zhǎng)?！妒眍惙N子種苗生產(chǎn)技術(shù)》試管苗的培養(yǎng)條件目錄CONTENTS二試管苗培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)條件一試管苗培養(yǎng)所需的環(huán)境條件一、試管苗培養(yǎng)所需的環(huán)境條件（一）光照

1.光照強(qiáng)度：范圍1000～5000lx（勒克斯），一般3000~4000lx。2.光質(zhì)：白光，紅光，不同波長(zhǎng)的光3.光照時(shí)間：10~16h，12h，16h，光周期，誘導(dǎo)開花4.調(diào)控：日光燈，人工/定時(shí)器一、試管苗培養(yǎng)所需的環(huán)境條件（二）溫度1.最適溫度恒溫，大多植物，25℃±2℃，﹤15℃或﹥35℃會(huì)造成危害。2.溫度處理低溫處理，高溫處理3.調(diào)控空調(diào)器空調(diào)器調(diào)控一、試管苗培養(yǎng)所需的環(huán)境條件（三）空氣濕度1.容器內(nèi)：幾乎達(dá)100%。2.環(huán)境：70%～80%，過(guò)低，過(guò)高，問(wèn)題3.調(diào)控：空調(diào)器除濕模式/除濕機(jī)/灑水（噴水）一、試管苗培養(yǎng)所需的環(huán)境條件（四）PH1.范圍：最適PH5.6～5.8，PH6.0～6.5，大于7，或小于4均不行。2.高溫高壓滅菌會(huì)使PH下降0.2~0.8，故調(diào)時(shí)高于目標(biāo)0.5。3.調(diào)節(jié)：0.1~1mol/LNaOH/HCl調(diào)節(jié)4.PH影響瓊脂的凝固能力：大于6.0變硬，小于5.0不能很好凝固。一、試管苗培養(yǎng)所需的環(huán)境條件（五）氣體培養(yǎng)容器內(nèi)的氣體成分影響培養(yǎng)物的生長(zhǎng)與分化，

氧氣是愈傷組織生長(zhǎng)所必須的，固體培養(yǎng)與液體靜置培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)有部分組織與空氣接觸，因此要考慮培養(yǎng)中的通氣問(wèn)題。二、試管苗培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分（一）大量元素1.N是蛋白質(zhì)、酶、葉綠素、維生素、核酸、磷脂、生物堿等的組成成分，在植物生命活動(dòng)中占有重要的位置。2.P是磷脂的主要成分。常用KH2PO4、NaH2PO4等。3.K對(duì)碳水化合物合成，轉(zhuǎn)移，以及氮素代謝等有密切關(guān)系。二、試管苗培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分（一）大量元素4.Mg、S、Ca是葉綠素的組成成分，又是激酶的活化劑，對(duì)核蛋白體結(jié)構(gòu)具有穩(wěn)定作用。5.S是含S氨基酸的蛋白質(zhì)的組成成分。6.Ca是構(gòu)成細(xì)胞壁的成分，對(duì)細(xì)胞分裂，穩(wěn)定質(zhì)膜結(jié)構(gòu)有顯著作用，Ca及鈣調(diào)素在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起重要作用。二、試管苗培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分（二）微量元素在微量元素中，鐵的使用最大：◆一些氧化酶的組成成分◆葉綠素形成的必要條件◆使用乙二胺四乙酸鐵（EDTA-Fe）鰲合物防止鐵的沉淀。二、試管苗培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分（二）微量元素硼與蛋白質(zhì)合成、糖類運(yùn)輸有著密切的關(guān)系銅是某些氧化酶的成分，能夠促進(jìn)離體根的生長(zhǎng)錳參與植物的光合、呼吸代謝鉬參與氮素的代謝氯是光合作用水光解的活化劑微量元素的主要作用是作為酶的輔助因子或激活劑參與代謝的調(diào)節(jié)。二、試管苗培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分（三）碳源碳源物質(zhì)包括糖類物質(zhì)、醇類物質(zhì)和有機(jī)酸，以糖類物質(zhì)最重要。糖類物質(zhì)特點(diǎn)：◆具有熱易變的性質(zhì)

◆利于吸收和利用◆使用濃度一般在2%~5%◆提供能源和調(diào)節(jié)滲透壓二、試管苗培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分（四）維生素類以各種輔酶的形式存在◆參與多種代謝活動(dòng)◆對(duì)生長(zhǎng)，分化等有很好的促進(jìn)作用◆主要分為脂溶性維生素和水溶性維生素◆常用維生素有VB1和VB6二、試管苗培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分（五）肌醇環(huán)己六醇◆細(xì)胞壁的構(gòu)建材料◆參與碳水化合物、磷脂代謝及離子平衡等生理活動(dòng)◆促進(jìn)活性物質(zhì)發(fā)揮作用二、試管苗培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分（六）氨基酸蛋白質(zhì)的組成成分◆有機(jī)氮源◆可直接被細(xì)胞吸收利用◆培養(yǎng)基中常用的是甘氨酸（七）天然復(fù)合物促進(jìn)某些愈傷組織和器官的生長(zhǎng)◆化學(xué)成分不明、復(fù)雜◆天然營(yíng)養(yǎng)混合物如：水解酪蛋白、玉米胚乳、酵母提取物二、試管苗培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分（八）瓊脂是使用最普遍的凝固劑◆用量一般在6~10g/L之間◆顏色以淺、透明度高好，潔凈為上品。除了瓊脂外，在組織培養(yǎng)中還可以使用瓊脂糖、結(jié)冷膠等。二、試管苗培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分（九）活性炭吸附培養(yǎng)基及培養(yǎng)物分泌物中的抑制物質(zhì)◆抑制外植體褐變◆防止玻璃苗的產(chǎn)生◆促進(jìn)培養(yǎng)物生長(zhǎng)和分化◆促進(jìn)生根缺點(diǎn)：沒有選擇性。（十）抗生素防止外植體內(nèi)生菌造成的污染?；钚蕴慷⒃嚬苊缗囵B(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分（十一）生長(zhǎng)素類促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)和分裂◆促進(jìn)生根、抑制器官脫落、性別控制、延長(zhǎng)休眠、頂端優(yōu)勢(shì)、單性結(jié)實(shí)◆誘導(dǎo)愈傷組織形成◆溶于95%酒精或0.1mol/L的NaOH中，后者的溶解效果更好◆常用的生長(zhǎng)素：IAA(吲哆乙酸)、NAA(奈乙酸)、IBA(吲哆丁酸)、2,4-D(二氯苯氧乙酸)。二、試管苗培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分（十二）細(xì)胞分裂素類促進(jìn)細(xì)胞分裂和分化◆誘導(dǎo)胚狀體和不定芽的形成◆延緩組織的衰老并增強(qiáng)蛋白質(zhì)的合成◆用于離體成花的調(diào)控◆溶于0.5~1.0mol/L的鹽酸或稀薄的NaOH中◆常用的細(xì)胞分裂素：

KT(激動(dòng)素)BA(6-卞基腺嘌呤)2-ip(異戊烯氨基嘌呤)玉米素二、試管苗培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分（十三）赤霉素類和脫落酸赤霉素類

◆組織培養(yǎng)中不常使用◆加速細(xì)胞的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)◆促進(jìn)細(xì)胞的分裂◆主要是GA3B、脫落酸◆抑制細(xì)胞分裂和伸長(zhǎng)◆促進(jìn)脫落和衰老◆促進(jìn)休眠和提高抗逆能力《薯類種子種苗生產(chǎn)技術(shù)》試管苗馴化移栽主要內(nèi)容一二試管苗馴化試管苗移栽（一）馴化目的提高試管苗對(duì)外界環(huán)境條件的適應(yīng)性，提高光合能力，使試管苗健壯，提高試管苗移栽成活率。（二）馴化原則調(diào)節(jié)溫光濕和無(wú)菌等環(huán)境要素，開始和培養(yǎng)條件相似，后期與預(yù)計(jì)栽培條件相似。一、試管苗的馴化（煉苗）（三）馴化方法將長(zhǎng)有完整試管苗的培養(yǎng)瓶由培養(yǎng)室轉(zhuǎn)到半遮蔭的自然光下鍛煉，并打開瓶蓋注入少量自來(lái)水使幼苗逐漸降低溫度，轉(zhuǎn)向有菌，一般進(jìn)行1~2周。一、試管苗的馴化（煉苗）（一）基質(zhì)選擇選擇具備透氣性、保濕性和一定肥力的基質(zhì)，且容易滅菌處理，不利于雜菌滋生。一般可選用珍珠巖、蛭石、砂子等，配合一定比例的草炭土或腐殖土。珍珠巖，蛭石，草炭土或腐殖土比例為1:1:0.5。砂子:草炭土或腐殖土為1:1?；|(zhì)在使用前應(yīng)高壓滅菌。二、試管苗的移栽（二）容器選擇1.育苗盤用育苗盤進(jìn)行組培苗移栽時(shí)，可以節(jié)省空間，省基質(zhì)，但需二次移苗。2.塑料缽用塑料缽進(jìn)行組培苗移栽時(shí)，占地大，耗用基質(zhì)多，但幼苗不用再移栽。有8cm×8cm和10cm×10cm等規(guī)格。3.混拌基質(zhì)裝入容器：基質(zhì)干混→加水混均（濕度以手握成團(tuán)，指間水欲滴未滴為準(zhǔn)）→裝入容器二、試管苗的移栽（三）移栽1.組培苗瓶煉后，從瓶中小心取出，在20℃左右的溫水中浸泡10min，換水2-3次，以便將粘附于組培苗根部的培養(yǎng)基清洗干凈；然后迅速栽在裝有已經(jīng)消毒處理的基質(zhì)的容器中。二、試管苗的移栽（三）移栽2.栽植的過(guò)程中，要盡量舒展組培苗的根系，深度以葉片不接觸基質(zhì)為宜。先挖一小穴，種植后輕輕鎮(zhèn)壓，噴淋透水；最后放在干凈，排水良好的溫室或塑料保溫棚中，空氣濕度在90%以上。二、試管苗的移栽（四）移栽后的管理1.保持水分供需平衡在移栽后5～7d內(nèi)，應(yīng)給予較高的空氣濕度條件，可采取澆水、噴霧、搭設(shè)小拱棚等措施實(shí)現(xiàn)。當(dāng)5～7d后，發(fā)現(xiàn)小苗有生長(zhǎng)趨勢(shì)，可逐漸降低濕度，使小苗適應(yīng)濕度較小的條件。2.防止菌類滋生7～10d噴一次一定濃度的殺菌劑（如800～1000倍多菌靈或甲基托布津）。二、試管苗的移栽（四）移栽后的管理3.提供適宜的環(huán)境條件適宜的生根溫度是18～20℃，冬春季地溫較低時(shí)，可用電熱線來(lái)加溫。在光照管理的初期可用較弱的光照，如在小拱棚上加蓋遮陽(yáng)網(wǎng)或報(bào)紙等。當(dāng)小植株有了新的生長(zhǎng)時(shí)，逐漸加強(qiáng)光照，后期可直接利用自然光照。二、試管苗的移栽（四）移栽后的管理4.保持基質(zhì)的通氣性要選擇適當(dāng)?shù)念w粒狀基質(zhì)。在管理過(guò)程中不要澆水過(guò)多，過(guò)多的水應(yīng)迅速瀝除，以利根系呼吸，以防爛苗。5.給予合理的養(yǎng)分管理噴水時(shí)可加入0.1％的尿素，或用1/2MS大量元素的水溶液作追肥，可加快苗的生長(zhǎng)與成活。二、試管苗的移栽（五）提高試管苗移栽成活率的途徑1.壯苗移栽比弱苗移栽成活率高2.生長(zhǎng)素（NAA）利于生根3.低無(wú)機(jī)鹽濃度生根效果好4.活性炭利于嫩莖生根5.避免太陽(yáng)直射，溫度25~30℃，濕度在85%以上6.使試管苗逐漸從無(wú)菌向有菌過(guò)渡二、試管苗的移栽《薯類種子種苗生產(chǎn)技術(shù)》外植體的選取及滅菌目錄CONTENTS一二外植體的選擇外植體的消毒滅菌一、外植體的選擇1.

選擇經(jīng)濟(jì)與種質(zhì)價(jià)值高的優(yōu)良品種。2.選擇生長(zhǎng)健壯無(wú)病蟲害的植株。3.選取最易表達(dá)細(xì)胞全能性的部位（生理年齡幼，生長(zhǎng)年齡老的部位）。4.大多數(shù)植物應(yīng)在生長(zhǎng)開始的季節(jié)采樣，晴朗的中午或下午取材。5.選取適宜的大小。二、外植體的消毒滅菌

（一）滅菌要求1.消毒2.滅菌3.滅菌的要求：一方面既要把材料上的病菌消滅，同時(shí)又不損傷或輕微損傷材料而不影響其生長(zhǎng)。二、外植體的消毒滅菌（二）常用的消毒劑消毒劑既要有良好的消毒作用，又要易被蒸餾水沖洗掉或能自行分解，而且不會(huì)損傷材料，影響生長(zhǎng)。（1）強(qiáng)氧化作用（2）重金屬鹽（3）酒精穿透作用（4）抗生素二、外植體的消毒滅菌（二）常用的消毒劑常用滅菌劑使用濃度及效果比較滅菌劑使用濃度持續(xù)時(shí)間去除的難易效果次氯酸鈣9%~10％5~30分鐘易很好次氯酸鈉2％5~30分鐘易很好氯化汞0.1%~1％2~10分鐘較難最好抗菌素4~50mg／L30~60分鐘中較好酒精70%~75%0.2~2分鐘易好過(guò)氧化氫10%~12%5~15分鐘最易好二、外植體的消毒滅菌（三）消毒滅菌程序外植體取材→外植體整理→流水沖洗（洗潔精溶液洗滌→流水沖洗）→70%酒精表面消毒→無(wú)菌水漂洗→消毒劑浸洗→無(wú)菌水漂洗（4次及其以上）→瀝干備用。外植體整理二、外植體的消毒滅菌（三）消毒滅菌程序洗潔精洗滌與沖洗無(wú)菌水漂洗后瀝干備用二、外植體的消毒滅菌（三）消毒滅菌程序以莖段培養(yǎng)為例：于晴朗的中午，取當(dāng)年生幼嫩莖段→去葉留柄，剪成長(zhǎng)2~3cm含1~2個(gè)腋芽處的莖段→洗潔精溶液洗滌→流水沖洗30min~2h→70%酒精表面消毒20~40s→無(wú)菌水漂洗2次→0.1%升汞（HgCl2）浸洗2~10min→無(wú)菌水漂洗4次及其以上→瀝干備用《薯類種子種苗生產(chǎn)技術(shù)》植物脫毒檢測(cè)方法目錄CONTENTS一二直觀檢測(cè)法指示植物檢測(cè)法三抗血清檢測(cè)法四電子顯微鏡檢查法五分子生物學(xué)鑒定法一、直觀檢測(cè)法直接觀察植株生長(zhǎng)狀態(tài)是否異常，莖葉上有無(wú)特定病毒可見癥狀，從而可判斷病毒是否存在。如矮縮病毒引起寄主植物葉片腿綠、壞死、扭曲、植株矮縮，花葉病毒引起寄主植物葉片脈間失綠等。簡(jiǎn)便、直觀、準(zhǔn)確。二、指示植物檢測(cè)法（一）概念1.指示植物對(duì)某種或某幾種病毒及類似病原物或株系具敏感反應(yīng)并表現(xiàn)明顯癥狀的植物稱為指示植物，又稱鑒別寄主。2.指示植物檢測(cè)法是利用病毒在植物體上產(chǎn)生的枯斑作為鑒別病毒種類的依據(jù)，也叫枯斑測(cè)定法。煙草千日紅二、指示植物檢測(cè)法（二）檢測(cè)方法1.汁液涂抹法待鑒試管苗取幼葉1~3g加水和磷酸緩沖液研磨紗布過(guò)濾指示植物上涂一薄層金剛砂手指蘸濾液摩擦5min后沖去葉面汁液和金剛砂至于溫室中2~6天觀察沒有出現(xiàn)不含病毒出現(xiàn)枯斑有病毒二、指示植物檢測(cè)法（二）檢測(cè)方法1.汁液涂抹法二、指示植物檢測(cè)法（二）檢測(cè)方法2.嫁接法適用于木本多年生果樹和草莓、甘薯等無(wú)性繁殖的草本植物，采用汁液接種法比較困難，通常采用嫁接接種的方法，以指示植物作砧木，被檢測(cè)植物作接穗，可采用劈接、靠接、芽接等方法嫁接。二、指示植物檢測(cè)法（三）對(duì)指示植物的要求1.應(yīng)根據(jù)不同的病毒選擇適合的指示植物。2.所選指示植物一年四季都容易栽培。3.能夠在較長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)保持對(duì)病毒的敏感性。4.容易接種。5.較廣的范圍內(nèi)具有同樣的反映。二、指示植物檢測(cè)法（四）指示植物檢測(cè)法的優(yōu)缺點(diǎn)1.優(yōu)點(diǎn)：條件簡(jiǎn)單，操作方便，是一種經(jīng)濟(jì)有效的檢測(cè)方法，所以大多數(shù)植物檢測(cè)用指示植物檢測(cè)法。2.缺點(diǎn)：不能測(cè)出病毒總的核蛋白濃度，而只能測(cè)出病毒的相對(duì)感染力。三、抗血清檢測(cè)法（一）概念抗體是動(dòng)物在外來(lái)抗原的刺激下產(chǎn)生的一種免疫球蛋白，抗體主要存在于血清中，含有抗體的血清即稱為抗血清。不同病毒產(chǎn)生的抗血清都有各自的特異性，因此抗血清在病毒的檢測(cè)中成為一種高度?；缘脑噭?，其特異性高，檢測(cè)速度快，一般幾小時(shí)甚至幾分鐘可以完成。三、抗血清檢測(cè)法（二）檢測(cè)方法1.抗原的制備：病毒的接種繁殖→病葉的研磨→病毒的提純。2.抗血清的制備：動(dòng)物的選擇和飼養(yǎng)→抗原的注射→抗血清的采集（采血）→抗血清的分離→抗血清的保藏。3.抗血清檢測(cè)（免疫反應(yīng)）：（1）葉綠體凝聚法

采用待檢植物葉片提取液與專一抗血清發(fā)生凝結(jié)反應(yīng)檢測(cè)植物病毒，如煙草花葉病毒，馬鈴薯Y病毒等長(zhǎng)形病毒。三、抗血清檢測(cè)法（二）檢測(cè)方法3.抗血清檢測(cè)（免疫反應(yīng)）：（2）試管沉淀法即各種稀釋的抗血清與病毒抗原在小試管中混合反應(yīng)而產(chǎn)生沉淀，是常用的病毒檢測(cè)方法之一。長(zhǎng)形病毒形成絮狀沉淀，球形病毒形成濃密粒狀沉淀。（3）環(huán)形接口法