口腔免疫研究方法課件

免疫學研究方法免疫學與口腔疾病免疫學1免疫學研究的主要方法免疫熒光技術酶聯(lián)免疫吸附試驗蛋白質印跡流式細胞術免疫學與口腔疾病免疫學研究的主要方法2、免疫熒光免疫熒光概述2.免疫熒光基本原理3.免疫熒光基本操作4.免疫熒光技術的相關應用5.口腔應用實例免疫學與口腔疾病、免疫熒光31.概述免疫熒光技術(Immunofluorescencetechnique)又稱熒光抗體技術。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。該技術的主要優(yōu)缺點ˇ主要優(yōu)點:特異性強、敏感性高、速度快?！χ饕秉c:非特異性染色問題尚未完全解決,結果判定的客觀性不足,技術程序也還比較復雜。免疫學與口腔疾病1.概述42.基本原理直接免疫熒光法直接法是將熒光素標記在抗體上,直接測定相應抗原。標記有熒光素的抗體與相應的抗原反應,在紫外光的照射下,用顯微鏡觀察熒光現(xiàn)象優(yōu)點:方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點:只能檢測一種抗原,靈敏度不高。免疫學與口腔疾病2.基本原理5間接免疫熒光法:間接法與間接ELSA相似,引入標記二抗,可以檢測抗原,也可以檢測抗體?！?yōu)點:一抗可以結合多個標記二抗,固靈敏度比直接法高?！θ秉c:比直接法易出現(xiàn)非特異熒光。免疫學與口腔疾病間接免疫熒光法:6免疫熒光原理示意圖第一籌熒光間接免疫熒光法接鳧疲萸光法熒光標記一抗找原一抗熒光素標記二抗熒先標記一抗免疫學與口腔疾病免疫熒光原理示意圖73.免疫熒光實驗過程細胞爬片(多聚賴氨酸處理,生長密度70-80%)細胞固定(合適的固定液,如4%甲醛溶液等細胞膜穿透(TritonX-100等)封閉(3‰BSA-PBS等)抗孵育熒光抗體孵育熒光二抗孵育胞漿/核襯染(鬼筆環(huán)肽/DAPI/PI)免疫學與口腔疾病封片熒光顯微鏡拍照3.免疫熒光實驗過程84.免疫熒光技術的相關應用①自身抗體檢測000抗核抗體(均質型)抗核抗體(斑點型)抗核抗體(核膜型)第八節(jié)口腔免疫學研究的主要方法免疫學與口腔疾病4.免疫熒光技術的相關應用9②病原體檢測細菌(藤黃微球菌)寄生蟲(猴胚腎細胞內弓形蟲)第八節(jié)口腔免疫學研究的主要方法免疫學與口腔疾病②病原體檢測10口腔免疫研究方法課件11口腔免疫研究方法課件12口腔免疫研究方法課件13口腔免疫研究方法課件14口腔免疫研究方法課件15口腔免疫研究方法課件16口腔免疫研究方法課件17口腔免疫研究方法課件18口腔免疫研究方法課件19口腔免疫研究方法課件20口腔免疫研究方法課件21口腔免疫研究方法課件22口腔免疫研究方法課件23口腔免疫研究方法課件24口腔免疫研究方法課件25口腔免疫研究方法課件26口腔免疫研究方法課件27口腔免疫研究方法課件28口腔免疫研究方法課件29口腔免疫研究方法課件30口腔免疫研究方法課件31口腔免疫研究方法課件32口腔免疫研究方法課件33口腔免疫研究方法課件34口腔免疫研究方法課件35口腔免疫研究方法課件36口腔免疫研究方法課件37口腔免疫研究方法課件38口腔免疫研究方法課件39口腔免疫研究方法課件40口腔免疫研究方法課件41口腔免疫研究方法課件42口腔免疫研究方法課件43口腔免疫研究方法課件44口腔免疫研究方法課件45口腔免疫研究方法課件46口腔免疫研究方法課件47口腔免疫研究方法課件48口腔免疫研究方法課件49口腔免疫研究方法課件50口腔免疫研究方法課件51口腔免疫研究方法課件52口腔免疫研究方法課件53口腔免疫研究方法課件54口腔免疫研究方法課件55口腔免疫研究方法課件56口腔免疫研究方法課件57口腔免疫研究方法課件58口腔免疫研究方法課件59口腔免疫研究方法課件60口腔免疫研究方法課件61口腔免疫研究方法課件62口腔免疫研究方法課件63口腔免疫研究方