人類疾病動物模型

人類疾病動物模型

的制作1編輯ppt動物模型的制作1.查找文獻并咨詢動物實驗所需動物和條件是否可行，了解前人所積累的經(jīng)驗，避免低水平的重復(fù)或缺乏科學(xué)依據(jù)的盲動所造成人力物力的浪費；2.從動物品種品系、年齡、性別、體重、生物學(xué)特點、動物微生物污染級別等方面選取最可比擬的動物，不可認為選越高級動物可比性越高。2編輯ppt基本病理過程動物模型復(fù)制方法水和電解質(zhì)紊亂：給家兔耳緣靜脈注射5%氯化鉀1ml/kg，劑量依次遞增。描記心電圖，測量血鉀濃度。酸堿平衡紊亂：復(fù)制急性呼吸性酸中毒模型（用止血鉗夾閉氣管插管的2/3，持續(xù)10分鐘，測動脈血氣指標。）復(fù)制急性代謝性酸中毒模型（耳緣靜脈注射5%的乳酸1ml/mim）復(fù)制代謝性堿中毒模型（耳緣靜脈注射5%的碳酸氫鈉10ml/kg）3編輯ppt發(fā)熱：大腸桿菌內(nèi)毒素法、大腸桿菌法、傷寒桿菌內(nèi)毒素法彌漫性血管內(nèi)凝血：用幼犬或家兔，靜脈注射10%高分子右旋糖酐(40萬-50萬U)15ml/kg在3分鐘內(nèi)注入、纖維蛋白原90mg/kg。給藥后的20分鐘、40分鐘、60分鐘分別采血查Hb、RBC、BPC、PT、TT、KPTT和纖維蛋白原。休克：失血性休克（家兔、放血法）感染性休克（大鼠、尾靜脈注射內(nèi)毒素）4編輯ppt腫瘤疾病模型的復(fù)制根據(jù)建立的方法不同

自發(fā)性腫瘤模型誘發(fā)性腫瘤模型移植性腫瘤模型5編輯ppt（1）自發(fā)性腫瘤模型是指利用實驗動物本身某種自發(fā)腫瘤發(fā)病率高所建立的動物模型，如利用AKR小鼠建立白血病模型、利用C3H小鼠建立乳腺癌模型。優(yōu)點：自發(fā)性腫瘤通常比用實驗方法誘發(fā)的腫瘤與人類所患的腫瘤更為相似，有利于將試驗結(jié)果推用到人；這一類腫瘤發(fā)生的條件比較自然，有可能通過細致觀察和統(tǒng)計分析而發(fā)現(xiàn)原來沒有發(fā)現(xiàn)的環(huán)境致癌因子。缺點：腫瘤的發(fā)生率參差不齊，不可能在短時間內(nèi)獲得大量的腫瘤學(xué)材料，觀察時間長，實驗消耗大。6編輯ppt

某個近交系動物在一定年齡內(nèi)，可以發(fā)生一定比率的某種自發(fā)性腫瘤。目前已培育了許多種小鼠自發(fā)腫瘤，從腫瘤發(fā)生學(xué)上看，這些自發(fā)瘤與人體腫瘤相似。AKR小鼠－－→白血病，出生后1.5年90%的發(fā)病率C3H小鼠－－→乳癌，繁殖雌鼠100%發(fā)病率A系小鼠－－→肺癌，18個月內(nèi)90%發(fā)病率7編輯ppt（2）誘發(fā)性腫瘤模型是指對實驗動物給予致癌物質(zhì)、射線以及某些致病病毒而誘發(fā)各種腫瘤的動物模型。如利用二乙基亞硝胺誘發(fā)小鼠肺癌；利用甲基膽葸誘發(fā)小鼠胃癌和宮頸癌；感染小鼠白血病病毒可誘發(fā)白血病等等。8編輯ppt（2）誘發(fā)性腫瘤模型：1.方法：原位誘發(fā)：指將致癌物直接與動物靶組織或靶器官接觸而誘發(fā)該組織或器官發(fā)生腫瘤，接觸方法可通過涂抹、灌注、喂養(yǎng)或埋置等。異位誘發(fā)：將與致癌物接觸后的動物組織或器官埋置于該動物或另一正常動物皮下而產(chǎn)生的該組織或器官的腫瘤。異位誘發(fā)腫瘤具有易于觀察和取材的優(yōu)點。2.誘癌物：放射線局部照射、化學(xué)致癌物（烷化劑、亞硝胺類、芳香胺類）、生物毒素（黃曲酶毒素）、細菌（幽門螺桿菌）、腫瘤病毒感染。9編輯ppt舉例：1.二乙基亞硝胺(DEN)誘發(fā)小鼠肺癌：采用小鼠皮下注射1％DEN水溶液，每周一次，(每次劑量為56mg/kg體重，總劑量為868mg)。觀察時間為100d左右。此模型誘發(fā)率約40%。若將DEN總劑量增到1176mg時，半年誘發(fā)率可達90％以上。

亞硝胺類致癌物特點：①致癌性強，小劑量一次性可致癌；②對多種動物的多個器官能致癌，甚至可通過胎盤致癌；③具有不同結(jié)構(gòu)的亞硝胺有明顯的器官親和性，如：二甲基亞硝胺等對稱的衍生物常引起肝癌；不對稱的亞硝胺誘發(fā)食管癌.10編輯ppt2.亞胺基偶氮甲苯(OAAT)誘發(fā)小鼠肝癌：用l％OAAT苯溶液涂于動物兩肩胛間皮膚上，隔日1次，每次2—3滴、一般涂100次。7個月以上誘發(fā)肝腫瘤約55％。

芳香胺及偶氮染料類致癌特點：①需要長期大量給藥才能致癌；②腫瘤發(fā)生于遠離作用部位（肝、膀胱等）；③明顯的種屬差異；④其本身不是致癌物，致癌是由于某種代謝產(chǎn)物的作用；⑤其致癌作用受營養(yǎng)及激素的影響，如：鄰位氨基偶氮甲苯引起雌性大鼠的肝癌。11編輯ppt3.黃曲霉素誘發(fā)大鼠肝癌：在大鼠飼料中加入黃曲霉素，含0.011-0.015ppm，喂養(yǎng)6個月，誘發(fā)率達80％。

黃曲霉素的毒性很強，很小劑（1mg/Kg）可致動物死亡，致癌性很強，是化學(xué)致癌物中最強的；它能誘發(fā)多種動物從魚到猴的肝癌。滴入氣管內(nèi)可引起肺磷狀細胞癌。12編輯ppt注意事項：1.必須適當(dāng)選擇：致瘤方法、動物種系、致癌物種類與溶劑、給藥劑量與途徑及觀察時間等盡量簡便可行，有較好的重復(fù)性，并有利于與人腫瘤比較。2.方法和種系應(yīng)對所用致瘤物敏感。3.致癌物的劑量應(yīng)能保證動物存活率較高、誘發(fā)期較短而又可誘發(fā)較高頻率的腫瘤。

13編輯ppt（3）移植性腫瘤模型是將腫瘤細胞接種于相關(guān)種屬的實驗動物所建立的動物模型。常以裸鼠為移植受體。一般最常用的就是皮下移植和原位移植。14編輯ppt腫瘤組織塊移植法腹水瘤細胞移植法腫瘤細胞培養(yǎng)液移植法腫瘤組織懸液移植法腫瘤組織移入動物體內(nèi)的方法15編輯ppt腫瘤組織塊移植法：

腫瘤細胞皮下接種——7-10d處死荷瘤動物——選擇生長良好、無壞死液化的瘤組織——2-3mm3+生理鹽水或其它營養(yǎng)液——無菌套管針抽吸——接種同種受體動物右前腋窩皮下。整個過程盡量在腫瘤切除后1小時內(nèi)完成。16編輯ppt腫瘤組織懸液移植方法：選取生長良好、有光澤、淡紅色的瘤組織塊，剪成1mm2的小塊，在加有PBS的玻璃培養(yǎng)皿中剪碎，再在玻璃勻漿器內(nèi)研磨制成懸液后，經(jīng)80-100目網(wǎng)篩過濾成單細胞懸液。移植：按每只0.2ml,細胞數(shù)為1×106個。本法適于成活率高的移植瘤的常規(guī)接種和大批量的動物接種，優(yōu)點是一次可以移植大批動物，所用瘤細胞數(shù)可定量，缺點是不易按需要定位。17編輯ppt腫瘤細胞培養(yǎng)液移植方法：

一般采用先分離培養(yǎng)原代瘤組織，再做瘤細胞培養(yǎng)。包括儀器準備、物品清洗準備、無菌操作環(huán)境準備、取材與消化分離、細胞懸液培養(yǎng)、腫瘤細胞培養(yǎng)液的制備、腫瘤細胞培養(yǎng)液移植。移植：對腫瘤細胞培養(yǎng)液經(jīng)臺盼蘭染色和計數(shù)，當(dāng)活細胞比率大于90%，細胞濃度1×106個/ml時，即可按每只裸鼠0.2ml接種于皮下或其他所需部位。18編輯ppt腹水瘤細胞移植：

腫瘤細胞皮下接種——7-10d處死荷瘤動物——取腹水——含葡萄糖平衡鹽水稀釋至適當(dāng)濃度——腹腔注射（腹水瘤）或皮下注射（實體瘤）。

使用雜交瘤細胞制備單克隆抗體的過程中，雜交瘤細胞在BALB/c小鼠體內(nèi)傳代是典型的腹水瘤細胞移植方式。19編輯ppt評價:1.同時接種同樣量的瘤細胞，生長速度較一致，個體差異較小。2.接種成活率近100%。3.對宿主影響相類似。4.可連續(xù)傳代，試驗周期短，條件易于控制。5.主要問題是宿主對移植物產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)。20編輯ppt移植途徑皮下移植原位移植腎包膜下移植肌肉移植腹腔移植21編輯ppt皮下移植：

就是將腫瘤細胞種植到皮下。皮下移植模型移植的優(yōu)點就是成功率高，操作非常方便，對動物本身影響也小，皮下瘤生長相對較慢，所以干預(yù)時間長些。一般常用在抗腫瘤藥物的篩選上。皮下移植使用腫瘤組織塊、組織懸液或細胞培養(yǎng)液均可。一般選擇右側(cè)腋下、背部、腹股溝等部位皮下移植。22編輯ppt人膀胱EJ細胞皮下移植23編輯ppt原位移植：

即將腫瘤細胞移植于腫瘤原發(fā)部位相同的動物臟器內(nèi)，如將人肝癌細胞移植于裸鼠的肝臟，人胃癌細胞移植于裸鼠的胃。原位移植模型的優(yōu)點就是更接近腫瘤發(fā)生發(fā)展的實際情況，實驗說服力強，缺點就是操作復(fù)雜。24編輯ppt高分辨率小動物超聲影像系統(tǒng)

Vevo770High-ResolutionImagingSystemHUAWANG,MAKOTOSATOH,HISASHIABE，etal.UROLOGY68(3),2006動物活體成像系統(tǒng)VivoBioluminescenceImagingSystemYANLI.TUMOR2009,29(1).25編輯ppt腎包膜下移植：腎包膜下移植一般選用腫瘤組織塊移植，因為腫瘤組織塊可固定于一定位置，而用組織懸液或細胞培養(yǎng)液移植，瘤細胞易于溢出包膜外，并呈廣泛彌散。

還有肌肉、腹腔移植等。26編輯ppt移植瘤模型成功的影響因素腫瘤組織惡性程度：惡性和轉(zhuǎn)移的復(fù)發(fā)瘤成功率較高；種類：細胞系的成活率大于活檢標本；來源：淋巴瘤、骨腫瘤成功率低；部位：腫瘤塊的外周部接種易成活。27編輯ppt裸鼠

遺傳背景：胰腺癌接種BALB/c成功，NIH失??；性別：雌激素依賴性腫瘤接種雄鼠生長慢；鼠齡：4-6周；動物健康狀態(tài)。28編輯ppt接種部位

原位移植成功率高，移植腫瘤與人類原發(fā)瘤相似。有些腫瘤需要接種在特定的部位，如對雌激素依賴的乳腺癌MCF-7細胞系，需接種乳腺脂肪墊才能成活。29編輯ppt其他環(huán)境：細菌病毒可以影響NK細胞活性；接種時間：越早越好;無菌操作。30編輯ppt胃癌移植瘤模型注意：選用皮下移植還是選用原位移植，關(guān)鍵取決于你的實驗?zāi)康?，具體的實驗方法和手段都是為你的研究目的而服務(wù)的。如果你只是觀察某種藥物對某種胃癌細胞的體內(nèi)作用，做皮下瘤就行，當(dāng)然做原位移植更好；如果你要研究胃癌細胞的侵襲或轉(zhuǎn)移，就要做原位移植了。方法：1）術(shù)前準備：眼科剪2把，眼科鑷2把，培養(yǎng)皿2個，1ml注射器1套，小鼠固定板，眼科小圓針2根，8/0絲線、3/0絲線若干消毒備用。無菌手術(shù)衣、手套、口罩、帽子；麻醉劑、甲醛固定液、生理鹽水、RPMI-1640培養(yǎng)液、超凈工作臺或?qū)恿鞴瘛Ｐg(shù)前1小時紫外照射30分鐘。31編輯ppt2）移植方法：取6-8周健康裸鼠，術(shù)前禁食12小時，以0.5%的戊巴比妥鈉麻醉，消毒，選擇左側(cè)正中旁切口，打開腹腔后將胃拉出，用眼科剪細心剪破腺胃胃壁漿膜，將瘤組織塊埋入漿膜下，再以8/0絲線穿透全層將瘤組織縫掛在胃壁上，最后以4/0絲線分別縫合腹膜（含肌層）及皮膚。若以腫瘤細胞懸液或細胞培養(yǎng)液移植時，可用注射器刺入胃壁漿膜注射。注射后，應(yīng)觀察到明顯隆起的小包。否則，可能是穿透胃壁，注入胃內(nèi)。應(yīng)重新再試。

32編輯ppt3）術(shù)后觀察：術(shù)后1周左右動物傷口愈合，皮膚縫線脫落。術(shù)后第3-4周左上腹可觸及0.2cm-0.3cm的小結(jié)節(jié)，5-6周左上腹結(jié)節(jié)逐漸增大且質(zhì)地變硬。8-10周左右可觸及1.0cm-1.5cm的包塊，左上腹包塊透壁可見，表面呈結(jié)節(jié)狀，動物逐漸消瘦。12周以后動物極度消瘦，活動受限，部分動物瘤體突出至皮下。16周以后動物拒食，逐漸衰竭而死亡。生存期約為16-24周。33編輯ppt

高血壓的研究

最常用的是犬和大鼠。犬與人類的高血壓有很多相似之處：1.高血壓早期波動較大，以后逐漸升高，并維持在高水平；2.環(huán)境和緊張刺激引起血壓明顯升高；3.高血壓發(fā)展過程中出現(xiàn)高級神經(jīng)活動障礙；4.部分動物血中兒茶酚胺含量增加。

34編輯ppt若研究高血壓病理、生理和藥理，SHR（自發(fā)性高血壓大鼠）是良好的模型，1.遺傳因素占主要地位；2.高血壓早期無明顯器質(zhì)性改變；3.病程相似，血壓升高隨年齡增加而加??；4.緊張刺激和大量食鹽等環(huán)境刺激加重高血壓的發(fā)展，5.血壓上升早期或高血壓前期有高血流動力學(xué)的特征；6.發(fā)生繼發(fā)性心血管損害，出現(xiàn)心腦腎合并癥。

35編輯ppt實驗性高血壓動物模型復(fù)制實驗性高血壓模型常選用犬、貓、家兔和猴等，復(fù)制方法很多，如通過神經(jīng)反射、外源性兒茶酚胺類或其他體液加壓物質(zhì)的注射直接刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)等。36編輯ppt1．聽源性高血壓

采用大白鼠與家鼠雜交生的大灰鼠（比純種大白鼠較易誘發(fā)成功），4月齡，放入隔音室內(nèi)籠養(yǎng)，噪音刺激可由電鈴或揚聲器發(fā)出，發(fā)音器是一個音頻振蕩器，連接一個20W高音揚聲器。噪音刺激應(yīng)經(jīng)常在700～1000周/秒中變換，噪音刺激每30秒一次，亦可每隔1分鐘刺激30秒。可隨時變換毋須恒定，但噪音干擾須日夜不止，連續(xù)數(shù)月。噪音刺激連續(xù)3個月后血壓普遍升高，大灰鼠正常平均收縮壓為113±8mmHg，此時可升高到130～140mmHg，有40%動物收縮壓可高達160mmHg。此種高血壓動物模型與人的高血壓病相類似，適用于降藥物的篩選。

37編輯ppt2.縮窄腎動脈法?？s窄腎動物致高血壓是十分經(jīng)典的動物模型。腎動脈縮窄可造成腎臟缺血，導(dǎo)致腎臟內(nèi)腎素形成，血管緊張素含量增加，使血壓升高，晚期高血壓維持因素也包括神經(jīng)血管機制。下面以犬和家兔為例，介紹動脈縮窄性高血壓動物模型的復(fù)制方法。38編輯ppt

將犬和家兔麻醉后，腹向下固定，腹下墊一長枕使腰部頂起，從脊柱旁1.5-2㎝處開始，右側(cè)順肋骨緣，左側(cè)在離肋骨緣約兩指寬的地方作4㎝長的皮膚切口。切開皮下組織和腰背筋膜，并在內(nèi)外斜肌筋膜連接處旁邊，切開內(nèi)斜肌筋膜，推開背長肌，暴露蓋在腎周圍空隙上的腹橫機肌腱。順肌纖維切開肌肉，并將肌肉分離開。用手指通過手術(shù)區(qū)摸到腎臟，并在腎切跡與主動脈之間找到強力搏動著的腎動脈。按所需長度，小心地鈍性分離出一段腎動脈。選用一定直徑的銀夾或銀環(huán)套在腎動脈上，或者用縫線將相應(yīng)直徑的鐵圈綁扎在血管上面，將縫線結(jié)扎緊后取下鐵圈。如果是單側(cè)腎動脈縮窄，則應(yīng)將另一側(cè)腎切除。后一手術(shù)在間隔10-12天進行。一般腎切除手術(shù)后幾天，血壓開始升高，1-3月后達到高峰。并可長期維持下去。39編輯ppt3．腎外包扎性高血壓

腎外異物包扎，可致腎周圍炎，在腎外形成一層纖維素性鞘膜，壓迫腎實質(zhì)，造成腎組織缺血，使腎素形成增加，血壓上升。40編輯ppt

選用120～150g大白鼠，麻醉后，皮膚消毒，從第10胸椎到第3腰椎處沿脊椎中線切開皮膚，在左側(cè)季助下1.5～2cm和距脊椎1cm處用小血管鉗分開肌肉，用兩脂從腹下部將腎臟自創(chuàng)口中擠出，小心地將腎臟與周圍組織剝離，將自制的雙層乳膠薄膜剪成“X”形，繞腎門將腎臟交叉包扎，然后在相對側(cè)切開，取出右腎，分離后切除，分別縫合肌肉和皮膚創(chuàng)口。皮下注射1～2萬單位青霉素G。術(shù)后可加飲1%氯化鈉溶液作為促進因素，約經(jīng)20天，有70%以上的大白鼠出現(xiàn)高血壓。收縮壓一般可升高50%以上。41編輯ppt模型概述

糖尿病動物模型復(fù)制方法主要包括6種：自發(fā)性模型:KK糖尿病小鼠；BBwistar

大鼠；NIH肥胖大鼠品系（SHR/N-cp）；中國地鼠（黑線倉鼠）。2.注射致高血糖因子，如生長激素、胰高糖素、糖皮質(zhì)激素以及兒茶酚胺類激素等，復(fù)制出某些繼發(fā)性糖尿病模型。糖尿病動物模型42編輯ppt3.注射化學(xué)物質(zhì)引起胰島β細胞的損傷，如鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)、四氧嘧啶、二苯硫代卡肥腙可造成胰島β細胞不可逆損傷；環(huán)丙庚哌、天門冬素酶、6—氨基尼克酰胺(Nicotinamide)、2—脫氧葡萄糖、甘露庚酮糖可引起β細胞可逆性損傷。43編輯ppt4.

注射生物及生物制品引起β細胞破壞，如鼠腦炎、心肌炎病毒M型變異可誘發(fā)若干品系的成年小鼠糖尿病，IL—1在一定劑量和范圍內(nèi)對β細胞有選擇性細胞毒作用，導(dǎo)致IDDM。5.

手術(shù)切除胰腺的大部分或全部，并給予高糖飲食刺激，引起繼發(fā)性永久性糖尿病。6.

篩選、引種、繁殖遺傳性及自發(fā)性糖尿病，這類動物模型更接近人類糖尿病的自然起病及發(fā)展，尤其適于研究糖尿病的病因?qū)W。44編輯ppt一、病毒誘發(fā)法

DBA/2雌性小鼠，皮下接種腦炎、心肌炎病毒M型變異株4—7天后出現(xiàn)明顯的高血糖，伴有血中及胰腺中胰島素含量降低。

評價：

其高血糖為特發(fā)性，伴明顯低胰島素血癥，在某些小鼠中可自然緩解，但糖耐量異常及高血糖在恢復(fù)期中仍將存在.造模方法45編輯ppt二、四氧嘧啶法

SD大鼠200g左右，40mg/kg四氧嘧啶靜脈注射1次，觀察血糖>300mg/dL，持續(xù)2周可以認為造模成功。三、鏈脲佐菌致糖尿病Wistar大鼠

鏈脲佐菌素可造成動物胰島β細胞大量壞死，通過不同給藥方法，可復(fù)制出速發(fā)型類似NIDDM和遲發(fā)型類似IDDM的動物模型。46編輯ppt1)速發(fā)型：

STZ用0.1mmol/L無菌枸櫞酸—枸櫞酸鈉緩沖液新鮮配制成2％溶液，調(diào)節(jié)pH至4.5，濾菌器過濾除菌。大鼠禁食10h按50～65mg/kg腹腔內(nèi)或尾靜脈一次性注射，24h內(nèi)隨機血糖≥16.7mmol/L，穩(wěn)定5d即可作為成功模型。2)遲發(fā)型：

鏈脲佐菌配制同前，福氏佐劑(CFA)按4:1稱取液體石蠟和羊毛脂，研碎混勻，經(jīng)高壓消毒后低溫保存，使用前按1.5mg/0.5ml加入無菌滅活卡介苗。第1天腹腔注射0.5mlCFA，次日按25mg/kg腹腔內(nèi)注射STZ溶液。每周1次，連續(xù)3周，第2周部分大鼠就可成模型，第3周成模率87.5％。47編輯ppt評價：1.速發(fā)型

一次足量給予鏈脲佐菌素，造成β細胞大量損傷，胰島素合成和分泌減少，引起糖代謝紊亂，導(dǎo)致糖尿病。速發(fā)型模型較適于NIDDM的相關(guān)研究。通常單劑量達50mg/kg體重不出現(xiàn)自然緩解現(xiàn)象，第6～27天，胰島有一定程度再生，功能部分恢復(fù)，但仍處于高血糖狀態(tài)。2.遲發(fā)型

福氏完全佐劑可激發(fā)機體免疫功能，將小劑量STZ和CFA聯(lián)合使用，可激活大鼠體內(nèi)淋巴細胞誘導(dǎo)胰島β細胞發(fā)生輕度改變，被激活的HLC可將輕度變性的細胞作靶細胞攻擊，導(dǎo)致自身免疫，胰島β細胞損害加重，引起糖尿病。遲發(fā)型模型有免疫學(xué)的改變，更接近人類IDDM的發(fā)生發(fā)展變化，有報道可測得大鼠體內(nèi)抗胰島細胞抗體。48編輯ppt3.化學(xué)誘導(dǎo)是一種簡便，價廉的方法。其中STZ優(yōu)于四氧嘧啶，其造模穩(wěn)定，快速，無自然緩解，種屬選擇性不強(豚鼠只能用鏈脲菌素造模)，復(fù)制前不需禁食。糖尿病形成后無需特意安排動物飼養(yǎng)條件。STZ可作用于對四氧嘧啶致糖尿作用有抵抗的豚鼠。但價格較四氧嘧啶貴。4.四氧嘧啶和鏈脲菌素均為一種可以選擇性作用于胰島β細胞的化學(xué)物質(zhì)，其作用機制目前有不同認識，有人認為是破壞了細胞本身，有人則認為僅是細胞脫顆?；蚴前ど掀咸烟鞘荏w的變化。49編輯ppt四、高糖飼喂誘發(fā)法

選用SHR/NLH—CP大鼠5周齡，喂飼含54％庶糖飲食。1個月時，觀察到OGTT異常，6.5個月時胰島素反應(yīng)異常，9個月時可見體重減輕，衰弱。

評價：

一些動物品系有自發(fā)或在施加誘導(dǎo)的條件下發(fā)生糖尿病的傾向。SHR/NLH-CP大鼠模型某些代謝和組織病理特征與人類非胰島素依賴性糖尿病相似，該模型還可觀察糖尿病肝腎損害。50編輯ppt

1982年，Hegreberg與Leathers發(fā)表了一部兩卷的動物模型目錄，第1卷“自發(fā)性動物疾病模型”包括了1298篇文獻，第2卷“誘發(fā)性動物疾病模型”包括了2707篇文獻。國內(nèi)施新猷主編“醫(yī)學(xué)動物實驗方法”（人民衛(wèi)生出版社，1980年）、郭鷂編“人類疾病的動物模型”第1輯，（人民衛(wèi)生出版社，1982年），可供參考。另外也可在一些藥理實驗方法學(xué)專著中找到，特別是那些容易復(fù)制、已經(jīng)成為定型的（或所謂經(jīng)典的）模型、可供篩選藥物之用的動物模型，這類書中均有介紹。疾病動物模型的復(fù)制方法還可在美國《醫(yī)學(xué)索引》（IndexMedicus）中的“動物疾病模型”（DiseaseModel,Animal）主題之下找到。51編輯ppt國內(nèi)研究趨勢

2001年11月16日，科技部正式發(fā)文（國科發(fā)計字[2001]474號）通告，由南京大學(xué)與揚州大學(xué)聯(lián)合申報的"國家遺傳工程小鼠資源庫"（以下簡稱"小鼠資源庫"）項目已完成可行性論證及課題的招投標工作，列入"十五"國家科技攻關(guān)計劃并作為重點項目組織實施。

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資源庫目前已基本完成保種、繁育、基因型鑒定、質(zhì)量監(jiān)控等資源庫基本功能運行所必需的技術(shù)平臺和基因組改造必須的轉(zhuǎn)基因、基因剔除和化學(xué)誘變技術(shù)平臺的建設(shè)。胚胎冷凍和精子冷凍保種技術(shù)均達到項目要求，具備了所有基因型的鑒定方法，并已成功繁育64種不同品系的遺傳工程小鼠和4種近交系品系，并進行了一系列質(zhì)量監(jiān)控檢查。53編輯ppt

通過轉(zhuǎn)基因和克隆技術(shù)、系統(tǒng)化表型分析技術(shù)，以及實驗動物新品種質(zhì)量標準和關(guān)鍵項目檢測技術(shù)的研究，自主創(chuàng)新地建立人類重大疾病動物模型和實驗動物新品種（長爪沙鼠、樹鼩、稀有鮈鯽等）。豐富和完善疾病動物模型比較數(shù)據(jù)庫和生物學(xué)特性數(shù)據(jù)庫。54編輯ppt

利用遺傳工程小鼠進行生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)的研究是當(dāng)前生命科學(xué)發(fā)展的主要內(nèi)容之一，國際上所有一流的生物和醫(yī)學(xué)研究機構(gòu)、醫(yī)學(xué)院、大學(xué)都建立了利用各種模式生物，特別是小鼠進行研究的實驗室，80％以上的這類研究單位是以研究模式生物為主，并取得了重大的研究成果。例如，對果蠅和小鼠進行的研究則使人們第一次能誘導(dǎo)出額外眼的生長。目前，小鼠、果蠅和線蟲基因組測序已經(jīng)完成，斑馬魚基因組序列也將明了，這些基因組序列的公布，必將進一步促進利用模式生物進行的發(fā)育生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究。國外研究現(xiàn)狀和趨勢55編輯ppt

美國杰克遜實驗室和橡樹林國家實驗室等在政府的大力支持下，投資5千多萬美金進行小鼠的ENU化學(xué)誘變和疾病模型研究，英國國立醫(yī)學(xué)研究院和德國GSF醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)研究所等也投入巨資進行相類似的研究。美國Lexicon公司和Regeneron公司等正在構(gòu)建各種基因失活的小鼠品系，用以篩選具有重要功能的基因。56編輯ppt1.從表型出發(fā)的高通量篩選和從單一基因出發(fā)的轉(zhuǎn)基因／基因剔除兩種研究方法的綜合運用

高通量篩選已經(jīng)成為現(xiàn)代生物學(xué)的一個重要原則和發(fā)展趨勢。在小鼠遺傳學(xué)領(lǐng)域，運用表型鑒定的方法，篩選化學(xué)誘變或射線誘變的小鼠來建立人類疾病模型近年來已經(jīng)在發(fā)達國家流行。例如，美、英、德、日、澳和加拿大等國先后建立了基于ENU（乙基亞硝基脲）誘變的大規(guī)模篩選中心，數(shù)以千計新的小鼠品系，模擬人類代謝性疾病、自身免疫疾病、老年性疾病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病的模型正在不斷被建立起來，相關(guān)基因開始被克隆。57編輯ppt

傳統(tǒng)的單一基因的轉(zhuǎn)基因／基因剔除技術(shù)也同時在各實驗室越來越普及，新的方法和手段也不斷建立，特別是可誘變轉(zhuǎn)基因小鼠和組織特異性基因剔除小鼠的建立，使分析特定基因在特定發(fā)育時空的功能成為可能，所以在生物學(xué)研究中運用越來越廣泛。

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線蟲、果蠅、斑馬魚和小鼠等模式動物各有其優(yōu)勢。例如，線蟲的細胞分化譜系明確，為研究細胞－細胞間相互作用和特定細胞功能提供了很好的模型，Brenner、Horvitz和Sulston利用線蟲發(fā)現(xiàn)細胞凋亡調(diào)控的關(guān)鍵基因。果蠅的遺傳背景清楚，基因定位與表型效應(yīng)的關(guān)系明確，各種遺傳分析方法也較成熟，利用這些優(yōu)勢，Morgan闡明了染色體遺傳連鎖規(guī)律，而Lewis、Nusslein-Volhard和Wieschaus在突變表型分析的基礎(chǔ)上建立了現(xiàn)代發(fā)育生物學(xué)的基本框架。斑馬魚通體透明，是研究器官發(fā)生的最佳材料之一。

2．不同種類模式動物的綜合利用59編輯ppt

由于小鼠和人類的高度同源，更多的研究以小鼠為對象，從Snell通過小鼠的皮膚移植提出組織相容性抗原概念到現(xiàn)代遺傳學(xué)家通過小鼠基因組改造建立人類疾病模型和研究基因功能，小鼠研究已經(jīng)一次次證明了其對生命科學(xué)發(fā)展的重要性及產(chǎn)生的重大影響。我國在除小鼠外，對其他幾種模式動物的研究均較為薄弱。目前開展果蠅研究的有復(fù)旦大學(xué)、湖南師范大學(xué)、東南大學(xué)和南京大學(xué)等，開展斑馬魚研究的有清華大學(xué)、南京大學(xué)、北京大學(xué)和中科院上海生命研究院等，整合和加強這些研究力量將對推動模式動物研究的全面發(fā)展至關(guān)重要。60編輯ppt2011年9月，來自美國美國梅奧臨床醫(yī)學(xué)院（MayoClinicCollegeofMedicine）和日本山口大學(xué)的研究人員通過基因改造成功地培育出一種熒光貓，這種貓帶有能抵抗貓科動物艾滋病病毒(FIV)感染的細胞。這一研究成果于9月11日在線發(fā)表在國際頂級學(xué)術(shù)期刊《Naturemethods》上。由于FIV與人類艾滋病毒HIV是近親，科學(xué)家們希望能利用這種熒光貓研究出治療人類艾滋病的方法。目的是想了解這種能讓猴子抵抗艾滋病的TRIMCyp蛋白是否幫助貓抵抗艾滋病毒感染。

61編輯ppt2011年，來自中科院昆明動物研究所，中科院生物物理研究所，腦與認知科學(xué)國家重點實驗室等處的研究人員分析了出生后就與母猴分離的獼猴的創(chuàng)傷行為，發(fā)現(xiàn)這些獼猴可能遭受持續(xù)的焦慮癥狀，這一研究說明獼猴可能是研究兒童期創(chuàng)傷經(jīng)歷的一個適宜實驗?zāi)Ｐ?。這一研究成果公布在《美國國家科學(xué)院院刊》（PNAS）雜志上。62編輯ppt動物實驗論文的撰寫及注意事項

涉及動物實驗的論文撰寫，除了要按照其他實驗性研究論文撰寫的要求外，還有一定的特定要求。主要表現(xiàn)在對實驗動物和動物實驗方面的描述，描述是否規(guī)范一定程度上影響論文的質(zhì)量。63編輯ppt實驗動物和動物實驗描述的主要內(nèi)容包括：

動物種系名稱、背景資料、動物規(guī)格，以及飼養(yǎng)條件和某些處理方式。

背景資料中應(yīng)包括動物來源、遺傳學(xué)分類及微生物學(xué)分類、質(zhì)量合格證號和飼養(yǎng)環(huán)境合格證號。64編輯ppt1.

實驗動物名稱：論文中應(yīng)準確、規(guī)范描述實驗動物的品種或品系名稱，避免使用通俗稱謂，如SD大鼠不能寫成SD大白鼠，更不能簡寫成大白鼠，KM小鼠不能寫俗稱小白鼠。65編輯ppt

2.動物背景資料：動物從何獲得，屬于遺傳學(xué)分類（近交系、突變系、封閉群、雜交群）中的哪一類，屬于微生物分級（普通級、清潔級、SPF級、無菌級）中的哪一級，必須在論文中描述清楚。有時，報告中還要敘述所用動物的合格證號及頒發(fā)合格證的單位。66編輯ppt3.動物規(guī)格：論文中應(yīng)準確描述實驗所用動物的數(shù)量、性別、體重、年齡等。67編輯ppt4.動物實驗條件：論文中應(yīng)對動物飼養(yǎng)方式（如飼料種類、營養(yǎng)成分、飼喂方式、飲水方式、飼養(yǎng)密度、籠具及墊料種類）實驗觀察環(huán)境（如溫度、濕度、照度、噪音、環(huán)境潔凈度、通風(fēng)換氣方式等）動物飼養(yǎng)環(huán)境的級別，以及相應(yīng)級別的實驗條件使用合格證號及頒布單位，作出盡可能的描述。68編輯ppt5、動物實驗的某些處理方式：使用麻醉劑的種類、劑量與方法，動物的處死方法等均應(yīng)注明。69編輯ppt例：材料和方法

實驗動物：BALB/c（nu-nu）裸鼠20只，18-22g，雌雄各半，由蘭州大學(xué)實驗動物中心提供。動物質(zhì)量許可證：

甘實動管第01號。實驗鼠在SPF條件下飼養(yǎng)，飼喂