生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)習(xí)題及參考答案

PAGEPAGE1生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)習(xí)題及解答一、名詞解釋1、pI：指氨基酸的正離子濃度和負(fù)離子濃度相等時(shí)的pH值，用符號(hào)pI表示。2、層析：按照在移動(dòng)相和固定相（可以是氣體或液體）之間的分配比例將混合成分分開的技術(shù)。3、透析：通過小分子經(jīng)過半透膜擴(kuò)散到水（或緩沖液）的原理，將小分子與生物大分子分開的一種分離純化技術(shù)。4、SDS-聚丙烯酰氨凝膠電泳：在去污劑十二烷基硫酸鈉存在下的聚丙烯酰氨凝膠電泳。SDS只是按照分子的大小，而不是根據(jù)分子所帶的電荷大小分離的。5、蛋白質(zhì)變性：生物大分子的天然構(gòu)象遭到破壞導(dǎo)致其生物活性喪失的現(xiàn)象。蛋白質(zhì)在受到光照，熱，有機(jī)溶濟(jì)以及一些變性濟(jì)的作用時(shí)，次級(jí)鍵受到破壞，導(dǎo)致天然構(gòu)象的破壞，使蛋白質(zhì)的生物活性喪失。6、復(fù)性：在一定的條件下，變性的生物大分子恢復(fù)成具有生物活性的天然構(gòu)象的現(xiàn)象。7、Tm值：核酸分子變性過程中，紫外吸收達(dá)到最大增量一半時(shí)的溶解溫度。8、同工酶：能催發(fā)相同的反應(yīng)類型但其理化性質(zhì)及免疫學(xué)性質(zhì)不同的酶。9、Km值：反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度。是酶的特征物理學(xué)常數(shù)之一。近似表示酶與底物的親和力。10、DNA變性：DNA雙鏈解鏈，分離成兩條單鏈的現(xiàn)象。11、退火：既DNA由單鏈復(fù)性、變成雙鏈結(jié)構(gòu)的過程。來源相同的DNA單鏈經(jīng)退火后完全恢復(fù)雙鏈結(jié)構(gòu)的過程，同源DNA之間`DNA和RNA之間，退火后形成雜交分子。12、增色效應(yīng)：當(dāng)雙螺旋DNA熔解（解鏈）時(shí)，260nm處紫外吸收增加的現(xiàn)象。二、基礎(chǔ)理論單項(xiàng)選擇題1、A；2、C；3、B；4、A；5、A；6、B；7、B；8、C；9、D；10、A；11、A；12、D；13、A；1、用下列方法測(cè)定蛋白質(zhì)含量，哪一種方法需要完整的肽鍵？（）A、雙縮脲反應(yīng)B、凱氏定氮C、紫外吸收D、羧肽酶法2、下列哪組反應(yīng)是錯(cuò)誤的？（）A、葡萄糖——Molish反應(yīng)B、膽固醇——Libermann-Burchard反應(yīng)C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反應(yīng)D、氨基酸——茚三酮反應(yīng)3、Sanger試劑是（）A、苯異硫氰酸B、2，4-二硝基氟苯C、丹磺酰氯D、-巰基乙醇4、肽鍵在下列哪個(gè)波長具有最大光吸收？（）A、215nmB、260nmC、280nmD、340nm5、下列蛋白質(zhì)組分中，哪一種在280nm具有最大的光吸收？（）A、色氨酸的吲哚基B、酪氨酸的酚環(huán)C、苯丙氨酸的苯環(huán)D、半胱氨酸的硫原子6、SDS凝膠電泳測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子量是根據(jù)各種蛋白質(zhì)（）A、在一定pH值條件下所帶的凈電荷的不同B、分子大小不同C、分子極性不同D、溶解度不同7、蛋白質(zhì)用硫酸銨沉淀后，可選用透析法除去硫酸銨。硫酸銨是否從透析袋中除凈，你選用下列哪一種試劑檢查？（）A、茚三酮試劑B、奈氏試劑C、雙縮脲試劑D、Folin-酚試劑8、蛋白質(zhì)變性是由于（）A、一級(jí)結(jié)構(gòu)改變B、亞基解聚C、空間構(gòu)象破壞D、輔基脫落9、用生牛奶或生蛋清解救重金屬鹽中毒是依據(jù)蛋白質(zhì)具有（）A、膠體性B、粘性C、變性作用

D、沉淀作用

10、有關(guān)變性的錯(cuò)誤描述為（）A、蛋白質(zhì)變性后，其一級(jí)結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)改變B、蛋白質(zhì)變性后，其理化性質(zhì)和生物學(xué)活性改變C、加熱、紫外線照射、超聲波等可以引起蛋白質(zhì)變性D、變性蛋白質(zhì)粘度增加，易被酶水解，易沉淀11、雙鏈DNA熱變性后（）A、黏度下降B、沉降系數(shù)下降C、浮力密度下降D、紫外吸收下降12、酶的活化和去活化循環(huán)中，酶的磷酸化和去磷酸化位點(diǎn)通常在酶的哪一種氨基酸殘基上？（）A、天冬氨酸B、脯氨酸C、賴氨酸D、絲氨酸13、在生理?xiàng)l件下，下列哪種基團(tuán)既可以作為H+的受體，也可以作為H+的供體？（）A、His的咪唑基B、Arg的胍基C、Cys的巰基D、Trp的吲哚基三、填空1、脯氨酸和羥脯氨酸與茚三酮反應(yīng)產(chǎn)生（）色物質(zhì)，而其他氨基酸與茚三酮產(chǎn)生（）色的物質(zhì)。2、通?？捎米贤夥止夤舛确y(cè)定蛋白質(zhì)的含量，這是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)分子中的（）、（）、（）三種氨基酸的共軛雙鍵有紫外吸收能力。3、移液槍在每次實(shí)驗(yàn)后應(yīng)將刻度調(diào)至（），讓彈簧回復(fù)原型以延長移液槍的使用壽命，并嚴(yán)禁吸取（）。4、使用離心機(jī)時(shí)，如有噪音或機(jī)身振動(dòng)時(shí)，應(yīng)立即（），并且離心管須對(duì)稱放入套管中，防止機(jī)身振動(dòng)，若只有一支樣品管，則另外一支要用（）代替。5、測(cè)定蛋白質(zhì)濃度的方法主要有（）、（）、（）。6、利用蛋白質(zhì)不能通過半透膜的特性，使它和其他小分子物質(zhì)分開的方法有（）和（）等。7、核酸在260nm附近有強(qiáng)吸收，這是由于（）。11、蛋白質(zhì)分離和純化的一般方法？答：主要有以下一些方法：透析及超濾法；丙酮沉淀、鹽析及免疫沉淀；電泳；層析；超速離心。12、如何正確選擇核酸電泳指示劑？答：核酸電泳常用的指示劑有溴酚蘭和二甲苯青及銀染色。溴酚蘭在堿性液體中呈紫蘭色，在0.6%、1%、1.4%和2%瓊脂糖凝膠電泳中，溴酚蘭的遷移率分別與1Kb、0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的雙鏈線性DNA片段大致相同.二甲苯青的水溶液呈蘭色，它在1%和1.4%瓊脂糖中電泳時(shí)，其遷移速率分別與2Kb和1.6Kb的雙鏈線性DNA大致相似。

染色劑：核酸電泳后，需經(jīng)染色后才能顯現(xiàn)出帶型，最常用的是溴化乙錠染色法，其次是銀染色。三、填空1、黃、紫2、Trp、Tyr、phe3、最大、強(qiáng)揮發(fā)性、強(qiáng)腐蝕性的液體。4、切斷電源，即時(shí)排除故障；等質(zhì)量的水5、雙縮脲法、Folin-酚試劑法、凱氏定氮法6、透析、超濾7、在嘌呤堿基和嘧啶堿基中存在