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實(shí)驗(yàn)一顯微鏡的結(jié)構(gòu)及油鏡的使用實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.學(xué)習(xí)并掌握普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和油鏡的使用技術(shù)及維護(hù)的基本知識(shí)2.初步認(rèn)識(shí)細(xì)菌的形態(tài)特征二、實(shí)驗(yàn)原理顯微鏡的構(gòu)造1.光學(xué)部分:目鏡、物鏡、照明裝置(聚光鏡、虹彩光圈、反光鏡等)。它使檢視物放大,生成物象。2.機(jī)械部分:鏡座、鏡臂、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺(tái)、載物臺(tái)轉(zhuǎn)移器、粗調(diào)節(jié)器、細(xì)調(diào)節(jié)器等部件.它起著支持調(diào)節(jié)固定等作用.顯微鏡的放大倍數(shù)和分辨率1.放大倍數(shù):物鏡放大倍數(shù)×目鏡放大倍數(shù)2.顯微鏡的分辨率:是表示顯微鏡辨析兩點(diǎn)之間距離的能力??捎霉奖硎緸椋篋=λ/2N.A=λ/2n·sin(α/2)式中D:物鏡分辨出物體兩點(diǎn)間的最短距離。λ:可見光的波長(zhǎng)(平均0.55m)n:物鏡和被檢標(biāo)本間介質(zhì)的折射率。α:鏡口角(即入射角)。D值越小,分辨率越高,看到的物象越清晰。油鏡使用的原理油鏡,即油浸接物鏡。當(dāng)光線由反光鏡通過玻片與鏡頭之間的空氣時(shí),由于空氣與玻片的密度不同,使光線受到曲折,發(fā)生散射,降低了視野的照明度。若中間的介質(zhì)是一層油(其折射率與玻片的相近),則幾乎不發(fā)生折射,增加了視野的進(jìn)光量,從而使物象更加清晰。根據(jù)公式D=λ/2n·sin(α/2),增大分母,使得D值減小,分辨率增大。實(shí)驗(yàn)材料金黃色葡萄球菌、四聯(lián)球菌、枯草芽孢桿菌等示范片實(shí)驗(yàn)步驟(油鏡的使用)1.低倍鏡觀察:粗調(diào)、細(xì)調(diào)。依次再進(jìn)行中倍、高倍觀察2.油鏡觀察:高倍鏡下找到清晰的物象后,提升聚光鏡,在標(biāo)本中央滴一滴香柏油,使油鏡鏡頭浸入香柏油中,細(xì)調(diào)至看清物象為止。3.換片:另?yè)Q新片,必須從第一條開始操作。4.用后復(fù)原:觀察完畢,上懸鏡筒,先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油,然后再用擦鏡紙沾取少量二甲苯擦去殘留的油,最后用擦鏡紙擦去殘留的二甲苯,后將鏡體全部復(fù)原。
注意:油鏡使用完畢后一定要用二甲苯擦拭鏡頭試驗(yàn)結(jié)果金黃色葡萄球菌100X枯草芽孢桿菌(手繪)100X實(shí)驗(yàn)討論使用油鏡時(shí),為什么必須用香柏油?當(dāng)使用普通高倍或低倍物鏡時(shí),透鏡的孔徑較大,所以射入物鏡的光線因?yàn)檎凵涠鴵p失的比率不高,對(duì)觀察影響不大。但油鏡由于需要放大更高的倍數(shù),其鏡孔徑很小,射入的光線很少,視野不明亮,物象模糊不清。加油的目的就是讓油鏡與載物玻片之間加一層與玻璃折光率相近的香柏油介質(zhì),使通過的光線不產(chǎn)生或少產(chǎn)生折射,增加進(jìn)入透鏡的光線,使視野亮度增加,能更清楚的觀察物象。鏡檢標(biāo)本時(shí),為什么先用低倍鏡觀察,而不是直接用高倍鏡或油鏡觀察?因?yàn)榈捅剁R下視野較大,易于發(fā)現(xiàn)目標(biāo)和確定檢查的位置,而如果直接用高倍鏡觀察,因其視野較小,不易找到觀察的目標(biāo),浪費(fèi)時(shí)間。用低倍鏡方便調(diào)焦,而且物鏡離樣品比較遠(yuǎn),不會(huì)碰壞物鏡或者樣品。。七、顯微鏡保養(yǎng)和使用中的注意事項(xiàng)1.不準(zhǔn)擅自拆卸顯微鏡的任何部件,以免損壞。2.鏡面只能用擦鏡紙擦,不能用手指或粗布,以保證光潔度3.觀察標(biāo)本時(shí),必須依次用低、中、高倍鏡,最后用油鏡。當(dāng)目視接目鏡時(shí),特別在使用油鏡時(shí),切不可使用粗調(diào)節(jié)器,以免壓碎玻片或損傷鏡面。4.拿顯微鏡時(shí),一定要右手拿鏡臂,左手托鏡座,不可單手拿,更不可傾斜拿。5.顯微鏡應(yīng)存放在陰涼干燥處,以免鏡片滋生霉菌而腐蝕鏡片。實(shí)驗(yàn)小結(jié)本次實(shí)驗(yàn)讓我受益良多,首先,清晰觀察到了球菌和桿菌的不同形態(tài)以及排列方式,將書本理論知識(shí)結(jié)合實(shí)際
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