天冬乙醇的化學成分研究

天冬乙醇的化學成分研究

天冬是相思植物的提取物，是傳統(tǒng)中醫(yī)的一部分。全國各地均有分布,主產(chǎn)于貴州、廣西、云南、甘肅、安徽、河南、湖南、湖北、四川和江西等地。天冬始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,歷代本草均有記載。其味甘、苦,性寒,歸肺腎經(jīng)。為《中華人民共和國藥典》(2000年版)收載品種。藥理研究表明,天冬的氯仿提取物具有不同程度的對半乳糖致衰小鼠的抗氧化作用,但是抗氧化作用的物質(zhì)基礎(chǔ)尚不清楚,目前對天冬的化學成分研究較為不足,僅報道了一些氨基酸、單糖、低聚糖、多糖和皂苷類化合物等水溶性成分,而脂溶性成分報道較少,作者對天冬的化學成分進行了系統(tǒng)研究,本研究報道從氯仿部分分離得到的8個化合物,其中7個均為首次從該植物中分離得到。1實驗部分1.1紅外光譜測試天津市分析儀器廠RY-2熔點儀(溫度計未校正),BrukerVector22紅外光譜儀,BrukerDRX-500核磁共振儀,Mat-212磁式質(zhì)譜儀。硅膠H(200~300目),青島海洋化工廠生產(chǎn)。藥材購自安徽亳州中藥材市場(產(chǎn)地為湖北黃石),經(jīng)本院生藥教研室鄭漢臣教授鑒定。1.2化合物18的合成天冬藥材粗粉(15~20目)9.5kg,以75%乙醇滲漉提取,提取液減壓濃縮至無乙醇味,加水稀釋,以氯仿萃取,回收溶劑后經(jīng)硅膠柱層析和SephadexLH-20凝膠柱層析得到化合物1~8。2d采用正-三烷基碳-1,3,5淺鉛、雙甲酰胺3e化合物1無色針狀結(jié)晶(氯仿),mp.140~142℃。Libermann-Burchurd反應(yīng)陽性,IR(KBr):3400,2960,1640,1380cm-1,與β-谷甾醇標準譜一致。TLC檢查,兩者Rf值一致,混合熔點不下降,鑒定為β-谷甾醇?；衔?白色無定形粉末(MeOH),mp.287~289℃。Liebermann-Burchard反應(yīng)和Molish反應(yīng)呈陽性。酸水解后檢出葡萄糖和β-谷甾醇。經(jīng)HPTLC與胡蘿卜苷標準品對照,15%硫酸-乙醇顯色,其Rf值和顯色行為與標準品一致。IR譜顯示有3365cm-1(寬峰,-OH),2940cm-1,1376cm-1(-CH3),1078cm-1,839cm-1(Δ5),與胡蘿卜苷標準譜一致,故鑒定化合物2為β-谷甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(胡蘿卜苷)?；衔?白色無定形粉末(MeOH),mp.79~80℃。EI-MSm/z:480[M]+,452[M-CO]+,71[C5H11]+,57(base,[C4H9]+)。1HNMR(CDCl3)δ:0.86(3H,t,-CH3),1.62(2H,m,-CH2CH2CH3),2.35(2H,t,-CH2CH2COOH)。13CNMR(CDCl3)和DEPT(CDCl3)譜顯示只有1個甲基碳信號δ14.4,1個羧基碳的信號δ179.3和若干個-CH2-碳信號。綜合以上信息推斷化合物3為正-三十二碳酸?；衔?白色無定形固體(CHCl3),mp.61~62℃。EI-MSm/z:256[M]+,228[M-CO]+,71[C5H11]+,57(base,[C4H9]+)。1HNMR(CDCl3)δ:0.86(3H,t,-CH3),1.65(2H,m,-CH2CH2CH3),2.34(2H,t,-CH2CH2COOH);13CNMR(CDCl3)和DEPT(CDCl3)譜顯示只有1個甲基碳信號δ14.4,1個羧基碳的信號δ180.4和若干個-CH2-碳信號。其EI-MS譜圖與棕櫚酸EI-MS譜圖完全一致。綜合以上信息推斷化合物4為棕櫚酸?；衔?淺棕色無定形粉末(CHCl3),mp.190~191℃。IR(KBr):2925,2853(=CH),1650(C=C),1463,1231,1110.7,867.6,722cm-1。EI-MSm/z:378[M]+,239[C17H35]+,139[C10H19]+;279[C20H39]+,99[C7H15]+,240[C17H36]+,138[C10H18]+;280[C20H40]+,98[C7H14]+。1HNMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,-CH3),結(jié)合13CNMR(CDCl3)和DEPT(CDCl3)譜推斷有2個甲基碳信號δ14.1,14.1,1個-CH=CH-雙鍵信號δ127.9,130.2,其余均為-CH2-碳信號,由此推斷化合物5為一直鏈單烯烴,根據(jù)質(zhì)譜開裂信號推斷雙鍵應(yīng)在9位。綜合以上信息鑒定化合物5為9-二十七碳烯?；衔?無色針狀結(jié)晶(CHCl3),mp.193~194℃。Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽性,反應(yīng)產(chǎn)物最終為綠色,該化合物對A試劑(Anisddehyde試劑)顯色,對E試劑(Ehrlich試劑)不顯色,表明該化合物為螺甾烷類化合物。IR(KBr):3329.7(-OH),2929.3,1376(-CH3),986.4,917,896,849cm-1;917cm-1處吸收強于896cm-1處吸收,由此推斷25位為S構(gòu)型。EI-MSm/z:416[M]+,139,115,126,357,386,273,302,287。其碳譜數(shù)據(jù)與菝葜皂苷元碳譜數(shù)據(jù)基本一致,故鑒定該化合物為菝葜皂苷元。1HNMR(CDCl3)δ:4.1(1H,m,3-H),4.3(1H,dd,J=7Hz,15Hz,16-H),0.75(3H,s,18-CH3),0.9(3H,s,19-CH3),1.3(3H,d,J=7Hz,21-CH3),3.3(1H,d,J=11Hz,26-H),3.9(1H,dd,J=2Hz,11Hz,26-H),1.0(3H,d,J=6.4Hz,27-CH3)。13CNMR(CDCl3)δ:30.3(C-1),27.4(C-2),67.4(C-3),30.3(C-4),36.9(C-5),26.9(C-6),26.9(C-7),35.6(C-8),40.2(C-9),35.6(C-10),21.2(C-11),40.7(C-12),41.0(C-13),56.8(C-14),32.1(C-15),81.4(C-16),62.5(C-17),16.8(C-18),24.2(C-19),42.5(C-20),14.7(C-21),110.1(C-22),26.3(C-23),26.1(C-24),28.1(C-25),65.4(C-26),16.4(C-27)。化合物7無色針狀結(jié)晶(CHCl3),mp.206~208℃。Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽性,該化合物對A試劑顯色,對E試劑不顯色,表明該化合物為螺甾烷類化合物。IR(KBr):3314(-OH),2931,1375(-CH3),1650(C=C),985,961,920,898,850cm-1;920cm-1處吸收小于898cm-1處吸收,由此推斷25位為R構(gòu)型。EI-MSm/z:414[M]+,139,282,159,300,342,271,253,EI-MS還顯示有282次強峰,提示C5,C6間有雙鍵。碳譜數(shù)據(jù)與薯蕷皂苷元碳譜數(shù)據(jù)基本一致,故鑒定該化合物為薯蕷皂苷元。1HNMR(CDCl3)δ:40(1H,m,3-H),4.2(1H,dd,J=7Hz,15Hz,16-H),0.76(3H,s,18-CH3),0.92(3H,s,19-CH3),1.3(3H,d,J=7Hz,21-CH3),1.1(3H,d,J=6.5Hz,27-CH3)。13CNMR(CDCl3)δ:37.3(C-1),31.8(C-2),71.6(C-3),42.5(C-4),141.2(C-5),121.8(C-6),32.2(C-7),30.6(C-8),50.4(C-9),37.0(C-10),21.4(C-11),38.5(C-12),40.4(C-13),56.9(C-14),31.8(C-15),81.2(C-16),62.4(C-17),19.8(C-18),12.7(C-19),42.5(C-20),14.8(C-21),109.6(C-22),31.8(C-23),29.0(C-24),30.6(C-25),67.2(C-26),16.6(C-27)?；衔?無色針狀結(jié)晶(CHCl3),mp.252~254℃。Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽性。[α]D20-61.5°[C=0.80,CHCl3/MeOH(1∶1)];IR(KBr):3400(-OH),2930,1377(-CH3),986,914,896,850,685cm-1。ESI-MSm/z:747[M+Na]+,推斷化合物分子量為724。13CNMR和DEPT(DMSO-d6)譜亦顯示有兩個端基碳的信號:δ100.5,δ100.8;一個螺碳的信號:δ108.8;五個甲基碳信號:δ14.4,δ15.9,δ16.1,δ23.5,δ17.7。由此推斷該化合物為螺甾皂苷。該化合物經(jīng)酸水解,檢出葡萄糖和鼠李糖,由端基質(zhì)子的偶合常數(shù)J=7.8Hz知葡萄糖為β-構(gòu)型。由IR譜中915cm-1處的吸收峰大于896cm-1處的吸收峰可知25-C為S-構(gòu)型。13CNMR(DMSO-d6)譜在高場區(qū)信號與菝葜皂苷元圖譜基本一致,糖信號與薯蕷皂苷元-3-O-[α-L-鼠李吡喃糖基(1-4)]-β-D-葡萄吡喃糖苷的糖信號基本一致,故將該化合物結(jié)構(gòu)鑒定為菝葜皂苷元-3-O-[α-L-鼠李吡喃糖基(1-4)]-β-D-葡萄吡喃糖苷。1HNMR(DMSO-d6)δ:0.7(3H,s,19-CH3),0.9(3H,s,18-CH3),0.92(3H,d,J=6.9Hz,27-CH3),1.02(3H,d,J=7.1Hz,21-CH3),1.11(3H,d,J=6.2Hz,Rha-CH3),4.71(1H,brs,Rha-H1),4.19(1H,d,J=7.8Hz,Glu-H1)。13CNMR(DMSO-d6)δ:29.3(C-1),26.1(C-2),73.7(C-3),30.0(C-4),35.8(C-5),26.3(C-6),25.9(C-7),34.8(C-8),39.6(C-9),34.6(C-10),20.4(C-11),39.6(C-12),40.1(C-13),55.6(C-14),31.4(C-15),80.3(C-16),61.8(C-17),16.1(C-18),23.5(C-19),41.5(C-20),14.4(C-21),108.8(C-22),25.5(C-23),25.4(C-24),26.4(C-25),64.9(C-26),15.9(C-27),3-O-Glu:100.5(C-1),72.6(C-2),75.3(C-3),76.8(C-4),75.3(C-5),60.0(C-6),Rha:100.8(C-1),70.6(C-2),70.7(C-3),71.9(C-4),68.6(C-5),17.7(C-6)。體外藥理實驗表明,化合物8具有抗真菌活性和抗腫瘤活性?；衔?對