混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL通過(guò)磷酸化RIP3引發(fā)壞死性的膜破裂課件整理

混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL通過(guò)磷酸化RIP3引發(fā)壞死性的膜破裂6、法律的基礎(chǔ)有兩個(gè)，而且只有兩個(gè)……公平和實(shí)用?！?、有兩種和平的暴力，那就是法律和禮節(jié)。——歌德8、法律就是秩序，有好的法律才有好的秩序。——亞里士多德9、上帝把法律和公平湊合在一起，可是人類卻把它拆開(kāi)?！椤た茽栴D10、一切法律都是無(wú)用的，因?yàn)楹萌擞貌恢鼈儯鴫娜擞植粫?huì)因?yàn)樗鼈兌兊靡?guī)矩起來(lái)?！轮円怂够旌舷盗械鞍准っ笜咏Y(jié)構(gòu)域MLKL通過(guò)磷酸化RIP3引發(fā)壞死性的膜破裂混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL通過(guò)磷酸化RIP3引發(fā)壞死性的膜破裂6、法律的基礎(chǔ)有兩個(gè)，而且只有兩個(gè)……公平和實(shí)用?！?、有兩種和平的暴力，那就是法律和禮節(jié)?！璧?、法律就是秩序，有好的法律才有好的秩序?！獊喞锸慷嗟?、上帝把法律和公平湊合在一起，可是人類卻把它拆開(kāi)?！椤た茽栴D10、一切法律都是無(wú)用的，因?yàn)楹萌擞貌恢鼈?，而壞人又不?huì)因?yàn)樗鼈兌兊靡?guī)矩起來(lái)。——德謨耶克斯混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL被RIP3磷酸化可引發(fā)壞死性的膜破裂HuayiWang,LimingSun,LijingSu,2JosepRizo,LeiLiu,Li-FengWang,FuShengWang,andXiaodongWang王華翌、孫麗明、LijingSu、Joseprizo、劉磊、王立峰、王福生(北京302醫(yī)完)、王曉東(Molecularcel,20l4)匯報(bào)人:付瑋瑋前言程序性細(xì)胞死亡在多細(xì)胞個(gè)體的成長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中扮有重要作用,主要分為兩種途徑—凋亡和壞死,它們有著不同的形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)變化凋亡主要表現(xiàn)為細(xì)胞體積縮小、核膜破裂、DNA降解為約180200bp的整數(shù)倍、并最終形成胞膜包被的凋亡小體,很快被巨噬細(xì)胞和鄰近細(xì)胞所吞噬。這些凋亡過(guò)程中形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)的變化主要由類半胱氨酸蛋白酶caspases執(zhí)行。這些蛋白酶通過(guò)外在的死亡誘導(dǎo)信號(hào)激活,如腫瘤壞死因子受體或Bc-2家族蛋白,它們可使原來(lái)位于線粒體膜間隙的蛋白質(zhì)釋放到胞漿,其中一種釋放細(xì)胞色素C,與胞漿中的Apaf1結(jié)合后激活caspases作為一名農(nóng)村生物學(xué)教師，我認(rèn)為在生物教學(xué)中應(yīng)結(jié)合農(nóng)村的具體特點(diǎn)，才能更好地培養(yǎng)學(xué)生主動(dòng)參與、樂(lè)于探究、勤于動(dòng)手、交流合作的學(xué)習(xí)方式和良好的情感態(tài)度與價(jià)值觀。一、農(nóng)村生活的知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)為學(xué)生學(xué)習(xí)生物學(xué)提供幫助加強(qiáng)課堂內(nèi)容與學(xué)生生活的聯(lián)系，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣是新課程理念“課程是生活世界的有機(jī)組成，而不是孤立于世界的抽象存在”的表現(xiàn)之一，因?yàn)閷W(xué)生已有的知識(shí)經(jīng)驗(yàn)是學(xué)生自身發(fā)展的基礎(chǔ)。學(xué)生們生活在農(nóng)村，與之相關(guān)的信息會(huì)潛移默化地進(jìn)入學(xué)生的腦海。如在學(xué)習(xí)“植物呼吸會(huì)產(chǎn)生水”之前，學(xué)生已知放在密封塑料袋的植物會(huì)在塑料袋上形成一層水霧；在學(xué)習(xí)兩棲動(dòng)物、環(huán)節(jié)動(dòng)物之前，很多學(xué)生已抓過(guò)蟾蜍、青蛙、蚯蚓，有些學(xué)生甚至已解剖過(guò)蟾蜍、蚯蚓等；在學(xué)習(xí)哺乳動(dòng)物前，有些學(xué)生養(yǎng)過(guò)兔子，知道兔子的一些生活習(xí)性，如喜歡吃什么。這些直接生活經(jīng)驗(yàn)是學(xué)生學(xué)習(xí)生物的興奮劑和催化劑，在課堂中充分利用這些，會(huì)使學(xué)生覺(jué)得生物學(xué)知識(shí)不是空洞無(wú)味的，從而提高學(xué)習(xí)興趣，有效激發(fā)學(xué)生在以后的生活中更主動(dòng)地去觀察、探究周圍的生物現(xiàn)象，變“要我學(xué)”為“我要學(xué)”。二、農(nóng)村便利豐富的動(dòng)植物資源是學(xué)生學(xué)習(xí)生物學(xué)的優(yōu)勢(shì)農(nóng)村學(xué)生在動(dòng)植物資源的擁有上有著得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì)，在教學(xué)過(guò)程中要充分利用。例如：在《觀察種子的結(jié)構(gòu)》《測(cè)定種子的發(fā)芽率》等試驗(yàn)中，除了用課本中提到的種子，還可以引導(dǎo)、鼓勵(lì)、表?yè)P(yáng)那些用其他種子做實(shí)驗(yàn)的學(xué)生。結(jié)果，學(xué)生利用了家中的各種種子，多種簡(jiǎn)易的器材，完成了多組實(shí)驗(yàn)。又如在實(shí)驗(yàn)《觀察蚯蚓的結(jié)構(gòu)》中，學(xué)生們自己去挖蚯蚓，知道了蚯蚓喜歡生活在富含腐殖質(zhì)的濕潤(rùn)土壤中，并仔細(xì)觀察解剖了自帶的蚯蚓，再經(jīng)分析比較綜合得出結(jié)論。實(shí)驗(yàn)時(shí)有學(xué)生提出疑問(wèn)，蚯蚓吃泥土使得蚯蚓的毛細(xì)血管不易觀察清楚，怎樣才能讓蚯蚓的毛細(xì)血管清楚地呈現(xiàn)出來(lái)呢？帶著這樣的問(wèn)題，學(xué)生對(duì)蚯蚓做了處理，讓蚯蚓啃食草紙讓其泥土排除，結(jié)果能清楚地看到蚯蚓的毛細(xì)血管。這樣，既鍛煉了學(xué)生的動(dòng)手能力、發(fā)散思維能力，又培養(yǎng)了學(xué)生通過(guò)多次實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論的科學(xué)態(tài)度和科學(xué)精神。三、提高學(xué)生農(nóng)業(yè)實(shí)踐能力是學(xué)生學(xué)習(xí)生物學(xué)的根本農(nóng)村的生物學(xué)教學(xué)價(jià)值應(yīng)體現(xiàn)在為培養(yǎng)一支高素質(zhì)的大農(nóng)業(yè)科技隊(duì)伍奠定基礎(chǔ)，服務(wù)于大農(nóng)業(yè)的發(fā)展觀。1.校內(nèi)實(shí)踐在教學(xué)中除完成課本規(guī)定的內(nèi)容外，還可以根據(jù)當(dāng)?shù)氐霓r(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)適當(dāng)增加一些地方性教學(xué)內(nèi)容。例如：在學(xué)習(xí)有關(guān)家蠶的內(nèi)容時(shí)，補(bǔ)充一些家蠶飼養(yǎng)的知識(shí)，并將有興趣的學(xué)生分為幾組，自己動(dòng)手飼養(yǎng)家蠶。學(xué)生們從家中帶來(lái)必要的材料用具，在飼養(yǎng)過(guò)程中不斷向課本、向蠶農(nóng)請(qǐng)教且同學(xué)相互間的討論、競(jìng)爭(zhēng)、合作，他們的知識(shí)、能力（包括搜集和處理信息的能力，獲取新知識(shí)的能力，分析和解決問(wèn)題的能力，動(dòng)手能力），科學(xué)探究精神隨著蠶的蛻變、成蛹，羽化和產(chǎn)卵而不斷提高，為將來(lái)大農(nóng)業(yè)生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。2.農(nóng)田實(shí)踐農(nóng)村有廣闊的農(nóng)田，結(jié)合教學(xué)內(nèi)容，鼓勵(lì)學(xué)生利用雙休日帶著一顆學(xué)習(xí)的心到田間地頭去勞作，并寫(xiě)農(nóng)田實(shí)踐報(bào)告，匯報(bào)實(shí)踐的收獲（包括知識(shí)、能力、情感態(tài)度價(jià)值觀）。這樣，不僅能使學(xué)生生動(dòng)形象地學(xué)到生物學(xué)知識(shí)，更能培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手實(shí)踐能力和對(duì)農(nóng)民，對(duì)土地的熱愛(ài)。例如，在農(nóng)忙季節(jié)到田間幫忙干活，播撒花生、蠶豆種子，搬稻谷插秧等，不僅能學(xué)到操作技能，還會(huì)學(xué)到有關(guān)株距、行距，合理密植的知識(shí)；很多農(nóng)家都有塑料大棚，學(xué)生在幫忙時(shí)就會(huì)知道水、溫度、空氣、肥料、陽(yáng)光等因素是植物正常生長(zhǎng)必不可少的條件，對(duì)合理灌溉、合理施肥等有了初步認(rèn)識(shí)；還知道了雜草會(huì)影響農(nóng)作物的正常生長(zhǎng)，它們之間是競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系；還有如玉米人工輔助授粉提高產(chǎn)量，棉花打頂摘心去除頂端優(yōu)勢(shì)等。這樣，不僅增加了學(xué)生的生物學(xué)知識(shí)，更使學(xué)生知道種田不易，種田需要科學(xué)知識(shí)，將來(lái)要科學(xué)種田。3.森林實(shí)踐我縣地形以丘林為主，學(xué)校周邊都有大小森林，利用雙休日帶學(xué)生到森林去調(diào)查，結(jié)合教學(xué)內(nèi)容，如調(diào)查森林的植物分類；被子植物、裸子植物、蕨類植物、苔蘚植物、藻類植物的數(shù)量以及分布情況。森林的動(dòng)物數(shù)量和分布，如哺乳動(dòng)物、爬行動(dòng)物、兩棲動(dòng)物、昆蟲(chóng)等；和平原對(duì)比一下溫度、空氣、水、土壤等環(huán)境因素的差異，學(xué)生可能更深刻理解了“人間四月芳菲盡，山寺桃花始盛開(kāi)”中的生物知識(shí)。四、增強(qiáng)農(nóng)村的環(huán)保意識(shí)是學(xué)習(xí)生物學(xué)的首要任務(wù)比較歷年江蘇高考《考試說(shuō)明》，不難發(fā)現(xiàn)，高考語(yǔ)文對(duì)于學(xué)生閱讀鑒賞能力的要求越來(lái)越高。其意在鼓勵(lì)當(dāng)代高中學(xué)生廣泛涉獵文字閱讀，提高閱讀鑒賞文學(xué)作品的水平，傳承民族文化瑰寶。然而在實(shí)際教學(xué)中，我們遺憾地看到，農(nóng)村中學(xué)的學(xué)生在文學(xué)作品閱讀上存在著很大的問(wèn)題：一方面，由于地處農(nóng)村，這里閱讀硬件前提匱乏，農(nóng)村中學(xué)的學(xué)生無(wú)書(shū)可讀；另一方面，由于一直就沒(méi)有讀好書(shū)、好讀書(shū)的氛圍，農(nóng)村中學(xué)的學(xué)生懶于讀書(shū)。他們中大部分學(xué)生的閱讀面基本上可以用幾冊(cè)教科書(shū)來(lái)衡量，偶爾有幾個(gè)好讀書(shū)、多讀書(shū)的，也總是為休閑解悶而讀多過(guò)為治學(xué)修身而讀，更令人尷尬的是還有很多同學(xué)干脆就認(rèn)為讀書(shū)只是課內(nèi)的事。研究農(nóng)村中學(xué)學(xué)生的閱讀現(xiàn)狀，引導(dǎo)他們走進(jìn)閱讀，正是致力于農(nóng)村高中語(yǔ)文教育的青年教師所面臨的一個(gè)大課題。一、研究農(nóng)村中學(xué)學(xué)生文學(xué)作品閱讀現(xiàn)狀的必要性（一）研究閱讀文學(xué)作品與語(yǔ)文能力之間的關(guān)系對(duì)比江蘇省每一年的高考成績(jī)和試卷答題情況，我們不難發(fā)現(xiàn)，蘇南的學(xué)生在語(yǔ)文能力上更具優(yōu)勢(shì)；而就我們本地來(lái)說(shuō)，城區(qū)中學(xué)學(xué)生比農(nóng)村中學(xué)學(xué)生在語(yǔ)文答題上顯得更加嚴(yán)謹(jǐn)合理；從學(xué)生個(gè)體來(lái)講，每一個(gè)有著較高語(yǔ)文素養(yǎng)的學(xué)生都是喜歡讀書(shū)、廣泛讀書(shū)的人。究其原因，其實(shí)很簡(jiǎn)單，是閱讀左右著一個(gè)學(xué)生在語(yǔ)文學(xué)科上的表現(xiàn)。（二）研究農(nóng)村中學(xué)學(xué)生文學(xué)作品閱讀現(xiàn)狀的意義1.準(zhǔn)確把握農(nóng)村中學(xué)學(xué)生的語(yǔ)文學(xué)習(xí)狀態(tài)若一個(gè)學(xué)生厭惡閱讀，甚至憎恨閱讀，那么他在語(yǔ)文學(xué)習(xí)上必然呈現(xiàn)出極端消極的態(tài)度。農(nóng)村高中的許多學(xué)生正是由于自身或環(huán)境的原因，在學(xué)業(yè)成長(zhǎng)過(guò)程中讀書(shū)少，更有甚者懶于讀書(shū)或者干脆不讀書(shū)，因而語(yǔ)言文字信息獲取得少，長(zhǎng)此以往，慢慢地變得對(duì)于語(yǔ)言文字失去敏感性，語(yǔ)言文字運(yùn)用能力差，缺乏寫(xiě)作素材，鑒賞詩(shī)詞抓不住情感字眼，考試答題時(shí)語(yǔ)言組織無(wú)條理。2.洞悉農(nóng)村中學(xué)學(xué)生的目標(biāo)追求和價(jià)值觀念農(nóng)村高中學(xué)生的讀書(shū)行為往往帶有著很強(qiáng)的“功利色彩”：專注于學(xué)業(yè)前程的學(xué)生往往想方設(shè)法去大范圍閱讀“有用”書(shū)籍；專注于自己個(gè)人成長(zhǎng)感受的學(xué)生則會(huì)多去閱讀情感洋溢的散文、隨筆類書(shū)籍。當(dāng)你能夠了解到你的學(xué)生正在讀著哪些書(shū)時(shí)，其實(shí)也就不難洞悉他在高中階段所持有的對(duì)于未來(lái)的態(tài)度和對(duì)于人生價(jià)值觀念的認(rèn)識(shí)。二、農(nóng)村中學(xué)學(xué)生的文學(xué)作品閱讀現(xiàn)狀（一）多種因素制約農(nóng)村中學(xué)學(xué)生閱讀文學(xué)作品1.升學(xué)壓力制約閱讀。農(nóng)村學(xué)生往往承受著比城市學(xué)生更大的升學(xué)壓力，他們的父母全都來(lái)自于農(nóng)村，或面土背天刨食作活，或打工在外蟻居城市，一輩子辛苦勞碌之下他們把所有的期望都寄托在孩子身上。于是，農(nóng)村高中的學(xué)生眼中便只能裝著考試分?jǐn)?shù)，他們追求的也是在短時(shí)之內(nèi)就能夠收到的成效。而文學(xué)作品閱讀是一個(gè)耗時(shí)長(zhǎng)，見(jiàn)效慢的過(guò)程，而且就算提高了閱讀水平，也未見(jiàn)得就能化為試卷上的語(yǔ)文分?jǐn)?shù)。急功近利之下，又有幾人能夠耐得住性子，耐得下心去品味書(shū)韻。2.硬件設(shè)施制約閱讀。農(nóng)村中學(xué)地處偏遠(yuǎn)，硬件設(shè)施條件有限。無(wú)法配備獨(dú)立的圖書(shū)館、閱覽室、自修室等閱讀場(chǎng)所，能為學(xué)生提供的閱讀場(chǎng)所只有教室。而在書(shū)籍方面，農(nóng)村中學(xué)由于物質(zhì)條件的制約，藏書(shū)少，種類偏而不全，難以支持學(xué)生們的閱讀需要。（二）農(nóng)村中學(xué)學(xué)生閱讀太隨意，閱讀內(nèi)容復(fù)雜在農(nóng)村中學(xué)，學(xué)生們的閱讀特點(diǎn)還表現(xiàn)在沒(méi)有目的性上，很隨意。他們不懂閱讀文學(xué)作品可以豐富一個(gè)人的文化內(nèi)涵、提高一個(gè)人的精神境界，他們不懂文學(xué)作品能夠在你無(wú)法行萬(wàn)里路的情況下知天下事、識(shí)人間情理，他們更不懂得閱讀可以幫助你做出正確的立身處世價(jià)值取舍。農(nóng)村中學(xué)的很多學(xué)生之所以閱讀，最大的原因是因?yàn)橛X(jué)得這本書(shū)“好看”，可以打發(fā)無(wú)聊時(shí)間、可以獲得精神愉悅、可以增加談資笑資，所以他們才會(huì)去閱讀。農(nóng)村中學(xué)學(xué)生在閱讀上所表現(xiàn)出的隨意性，只會(huì)讓他們的閱讀處境更加尷尬，因?yàn)樗麄円呀?jīng)習(xí)慣于這樣的速食性?shī)蕵?lè)閱讀，習(xí)慣于這樣的無(wú)目的性閱讀。而有著深刻內(nèi)蘊(yùn)的優(yōu)秀文藝作品，只會(huì)讓他們感到負(fù)擔(dān)和不自在。三、提高農(nóng)村中學(xué)學(xué)生文學(xué)作品閱讀質(zhì)量的思考農(nóng)村中學(xué)學(xué)生的閱讀現(xiàn)狀不得不引起我們的重視，農(nóng)村中學(xué)學(xué)生的語(yǔ)文學(xué)習(xí)前景也不得不讓我們擔(dān)憂，怎么樣針對(duì)他們閱讀中出現(xiàn)的種種問(wèn)題提出建設(shè)性的解決策略，怎么樣站在提高農(nóng)村中學(xué)學(xué)生整體語(yǔ)文素養(yǎng)的高度上提高他們文學(xué)作品閱讀的質(zhì)量，這將是一個(gè)很值得我們研究的課題。對(duì)此，我有如下幾點(diǎn)不成熟的建議：1.學(xué)習(xí)設(shè)立讀書(shū)日，竭盡能力提供條件。一方面，我們可以積極向?qū)W校、向上級(jí)教育主管部門(mén)爭(zhēng)取，爭(zhēng)取讓農(nóng)村中學(xué)的學(xué)生們能夠有更多、更優(yōu)秀的書(shū)籍閱讀。另一方面，我們也可以發(fā)動(dòng)學(xué)生將自己的書(shū)籍帶來(lái)，帶到教室里來(lái)，相互交換進(jìn)行閱讀。2.巧用教材讀本，建立作家系列閱讀體系。農(nóng)村中學(xué)可借閱書(shū)籍有限，學(xué)生手里文學(xué)書(shū)籍又不多，那怎么讓農(nóng)村中學(xué)學(xué)生讀文學(xué)作品？其實(shí)這問(wèn)題可以巧妙地解決，現(xiàn)在江蘇省高中使用的教材名家名篇非常多，涉及面非常廣，又兼有配套讀本，大大地豐富了學(xué)生的閱讀內(nèi)容。我們完全可以充分地重視并運(yùn)用起這些教材和讀本上的優(yōu)秀作品，有體系地分時(shí)代、風(fēng)格、作家系列來(lái)向?qū)W生進(jìn)行介紹，發(fā)動(dòng)他們從中發(fā)掘自己的興趣?；旌舷盗械鞍准っ笜咏Y(jié)構(gòu)域MLKL通過(guò)磷酸化RIP3引發(fā)壞死性1混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL被RIP3磷酸化可引發(fā)壞死性的膜破裂HuayiWang,LimingSun,LijingSu,2JosepRizo,LeiLiu,Li-FengWang,FuShengWang,andXiaodongWang王華翌、孫麗明、LijingSu、Joseprizo、劉磊、王立峰、王福生(北京302醫(yī)完)、王曉東(Molecularcel,20l4)匯報(bào)人:付瑋瑋混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL被2前言程序性細(xì)胞死亡在多細(xì)胞個(gè)體的成長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中扮有重要作用,主要分為兩種途徑—凋亡和壞死,它們有著不同的形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)變化凋亡主要表現(xiàn)為細(xì)胞體積縮小、核膜破裂、DNA降解為約180200bp的整數(shù)倍、并最終形成胞膜包被的凋亡小體,很快被巨噬細(xì)胞和鄰近細(xì)胞所吞噬。這些凋亡過(guò)程中形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)的變化主要由類半胱氨酸蛋白酶caspases執(zhí)行。這些蛋白酶通過(guò)外在的死亡誘導(dǎo)信號(hào)激活,如腫瘤壞死因子受體或Bc-2家族蛋白,它們可使原來(lái)位于線粒體膜間隙的蛋白質(zhì)釋放到胞漿,其中一種釋放細(xì)胞色素C,與胞漿中的Apaf1結(jié)合后激活caspases前言3腫瘤壞死因子(TNF)還可誘導(dǎo)細(xì)胞壞死,表現(xiàn)為細(xì)胞腫脹、胞內(nèi)細(xì)胞器變形或腫大、細(xì)胞ATP含量減少、細(xì)胞膜破裂。這種形式的壞死,又稱為necroptosis,需要受體互作的蛋白激酶RIP1、RIP3的激活。研究采用RIP3敲除的小鼠證實(shí)這種形式的細(xì)胞死亡對(duì)于應(yīng)答微生物感染和炎癥介導(dǎo)的組織損傷具有重要意義RIP3如何引發(fā)細(xì)胞壞死以及該途徑是否自然運(yùn)行在人類組織中是我們理解細(xì)胞壞死面臨的兩大難題。RIP1,RIP3以及MLKL相互結(jié)合形成個(gè)信號(hào)復(fù)合體,被稱作“necrosome”。且MLKL激酶結(jié)構(gòu)域的357位的蘇氨酸和358位的絲氨酸(人源)在細(xì)胞程序性壞死被啟動(dòng)后被RIP3磷酸化。MLKL是擁有激酶結(jié)構(gòu)域(與RIP3結(jié)合)但無(wú)激酶功能的假激酶。MLKL敲除的小鼠被證實(shí)與RIP3敲除的小鼠對(duì)細(xì)胞壞死具有相似的抵抗能力。但MLKL磷酸化導(dǎo)致細(xì)胞壞死的機(jī)制目前尚不清楚腫瘤壞死因子(TNF)還可誘導(dǎo)細(xì)胞壞死,表現(xiàn)為細(xì)胞腫脹、胞內(nèi)4在當(dāng)前研究中,我們開(kāi)發(fā)了特異性檢測(cè)人類MLKL蛋白在細(xì)胞壞死途徑中第357位蘇氨酸和358位絲氨酸磷酸化的單克隆抗體。通過(guò)一系列的生化試驗(yàn),我們發(fā)現(xiàn)necrosome從胞漿向質(zhì)膜和細(xì)胞器膜上轉(zhuǎn)位,這種轉(zhuǎn)變使MLKL在磷酸化驅(qū)使的聚合后獲得與脂質(zhì)直接結(jié)合的能力。一旦這些變化發(fā)生在膜上,聚合的MLKL將形成膜通透性孔道,破壞膜的完整性,引起細(xì)胞壞死。在當(dāng)前研究中,我們開(kāi)發(fā)了特異性檢測(cè)人類MLKL蛋白在細(xì)胞壞5文章的總體模式圖RIP1,RIP3以及MKL相互MonomerMLKLX:OligomerMLKL結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞壞死復(fù)O:RIP合體“necrosome”;MKL激酶結(jié)構(gòu)域的T357/S358位被RIP3磷酸化;磷酸化的MLKL從單體狀態(tài)向寡聚體狀態(tài)轉(zhuǎn)化;寡聚化的MLKL結(jié)合磷酸肌醇和心肌磷脂,整個(gè)復(fù)合體從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜和細(xì)胞器膜上并在這些膜結(jié)構(gòu)上形成通透性孔道,破壞膜的完整性,引起細(xì)胞壞死文章的總體模式圖6、文章的亮點(diǎn)1.RIP3激酶對(duì)MLKLT357/358位的磷酸化驅(qū)使MLKL形成寡聚物2.MLKL寡聚物從胞漿易位到細(xì)胞器膜和質(zhì)膜上;3.MLKL寡聚物在細(xì)胞壞死過(guò)程中直接破壞細(xì)胞膜的完整性MLKL磷酸化發(fā)生在藥物引起的肝損傷病人活檢組織、文章的亮點(diǎn)7四、文章結(jié)構(gòu)框架流程圖在要通過(guò)7幅圖展開(kāi)1.MLKL磷酸化是細(xì)胞壞死的標(biāo)志2.磷酸化的MLKL在細(xì)胞壞死過(guò)程中易位到膜部分;3.Necrosomes復(fù)合體在細(xì)胞壞死過(guò)程中轉(zhuǎn)移到質(zhì)膜和細(xì)胞器膜4.MLKL在細(xì)胞壞死過(guò)程中形成寡聚體;5MLKL結(jié)合磷脂和脂質(zhì)體;6.MIKL通過(guò)在膜上形成通透性孔道引起膜泄漏和細(xì)胞壞死;7藥物引起的肝損傷病人活檢組織中檢測(cè)到MLKL磷酸化信號(hào)。四、文章結(jié)構(gòu)框架流程圖在要通過(guò)7幅圖展開(kāi)8圖、MLKL磷酸化是細(xì)胞壞死的標(biāo)志圖、MLKL磷酸化是細(xì)胞壞死的標(biāo)志9Treatment圖A:采用MKL磷酸特異性抗體檢測(cè)12345678MLKL在細(xì)胞壞死過(guò)程中的磷酸化情況(HT-29細(xì)胞處理8h);1-7孔道為細(xì)胞壞死誘導(dǎo)物,D:二甲基亞砜;T100TNFa;S:Smac類似物;z:Zp-MLKL:VAD-fmk;文獻(xiàn)表明Smac類似物可以刺激細(xì)胞自分泌TNFα。MLKL:sss.0下圖為HT-29細(xì)胞采用不同的細(xì)胞壞死誘導(dǎo)物處理12h后的細(xì)胞存活率Actin:使用的為Ce1Titer-Glok試劑盒ATP是活細(xì)胞新陳代謝的一個(gè)指標(biāo)通過(guò)對(duì)ATP定量測(cè)定可以檢測(cè)培養(yǎng)物0000000中的活細(xì)胞數(shù)目;磷酸化的MKL與細(xì)胞死亡具有一定的相關(guān)性Treatment10BTreatmentTIS/ZTime(hr):012346810p-MLKL:ctin:圖B進(jìn)一步驗(yàn)證了MKL磷酸化CellSurviv與細(xì)胞死亡相關(guān);從圖可以看ATPLevel100出HT-29細(xì)胞在TSZ共同處理下不同時(shí)間的p-MLKL、ATP水平和膜泄漏情況(通過(guò)測(cè)定胞質(zhì)蛋白酶的活性得到,CytoTox-Glokit);6小時(shí)后三個(gè)信號(hào)0123456789101112同時(shí)出現(xiàn)變化。CellDeath-MembraneLeakage(o)0◆●●012345678910111BTreatment11混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL通過(guò)磷酸化RIP3引發(fā)壞死性的膜破裂課件整理12混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL通過(guò)磷酸化RIP3引發(fā)壞死性的膜破裂課件整理13混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL通過(guò)磷酸化RIP3引發(fā)壞死性的膜破裂課件整理14混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL通過(guò)磷酸化RIP3引發(fā)壞死性的膜破裂課件整理15混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL通過(guò)磷酸化RIP3引發(fā)壞死性的膜破裂課件整理16混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL通過(guò)磷酸化RIP3引發(fā)壞死性的膜破裂課件整理17混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL通過(guò)磷酸化RIP3引發(fā)壞死性的膜破裂課件整理18混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL通過(guò)磷酸化RIP3引發(fā)壞死性的膜破裂課件整理19混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域MLKL通過(guò)磷酸化RIP3引發(fā)壞死性的膜破裂課件整理20