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文檔簡介

現(xiàn)代生物技術(shù)概述

ModernBiotechnology基因操作的基本步驟獲取目的基因形成重組DNA分子將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞4.篩選含有目的基因的受體細(xì)胞5.目的基因的表達(dá)提取目的基因的方法將需要的基因從供體生物的細(xì)胞內(nèi)提取出來提取目的基因的方法取出DNA用限制酶切斷DNA

目前被較廣泛提取使用的目的基因有：蘇云金桿菌抗蟲基因、人胰島素基因、人干擾素基因、種子貯藏蛋白基因、植物抗病基因等。1.直接分離基因人工基因合成法2.人工基因合成法目的基因與運載體結(jié)合-----形成重組DNA直接合成法：已知某基因的序列的前提下,可以用化學(xué)方法合成或用PCR技術(shù)擴增大量獲取目的因.(如胰島素基因)想一想:還有其他的方法可以合成目的基因嗎?逆轉(zhuǎn)錄法:以信使RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下將脫氧核苷酸合成合成DNA(基因)。根據(jù)蛋白質(zhì)的氨基酸順序推算出信使RNA核苷酸順序，再據(jù)此推算出基因DNA的脫氧核苷酸順序。用游離脫氧核苷酸直接合成相應(yīng)的基因。DNA合成儀PCR擴增儀

用限制酶切割目的基因和用相同的限制酶切割質(zhì)粒使之出現(xiàn)一個切口，將目的基因插入切口處，讓目的基因的黏性末端與切口上的黏性末端互補配對后，在DNA連接酶的作用下連接形成重組DNA分子目的基因與運載體結(jié)合-----形成重組DNA提取質(zhì)粒并用限制酶切割用連接酶將目的基因和質(zhì)粒連接將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞并擴增基因工程中常用的受體細(xì)胞有大腸桿菌、枯草桿菌、酵母菌和動植物細(xì)胞等。如用質(zhì)粒作運載體,則選大腸桿菌為受體細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞常用的方法是借鑒細(xì)菌或者病毒侵染細(xì)胞的途徑。通常還要對一些受體細(xì)胞進(jìn)行增大通透性的處理。目的基因可以隨著受體細(xì)胞進(jìn)行快速的繁殖，在很短的時間內(nèi)獲得大量的基因。將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞并擴增將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將受體細(xì)胞進(jìn)行擴增篩選含有目的基因的受體細(xì)胞

前三步的處理十分繁鎖，為保證目的基因得到有效利用，通常用大量的受體細(xì)胞來接受不多的目的基因。這樣，處理的受體細(xì)胞中真正攝入了目的基因的很少，必須將它從中檢測出來。篩選含有目的基因的受體細(xì)胞受體細(xì)胞是否具運載體特有的“標(biāo)記基因”所控制的性狀檢測依據(jù)：目的基因的表達(dá)1.外源基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的理論基礎(chǔ)

基因是控制生物性狀的基本單位生物界共用一套遺傳密碼

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