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第二節(jié)基因工程的應(yīng)用第三節(jié)蛋白質(zhì)工程第二節(jié)基因工程的應(yīng)用1【考綱考情】最新考綱及要求三年考情(以山東高考卷為例)2014年2013年2012年基因工程的應(yīng)用ⅡT36·非選擇題無無蛋白質(zhì)工程Ⅰ無無無【考綱考情】最新考綱及要求三年考情(以山東高考卷為例)2012【知識梳理】考點一基因工程的工具1.轉(zhuǎn)基因植物:
類別應(yīng)用實例抗蟲殺蟲基因主要有Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制劑基因、淀粉酶抑制劑基因、植物凝集素基因等抗病抗病毒基因:病毒外殼蛋白基因和病毒的復(fù)制酶基因抗真菌基因:幾丁質(zhì)酶基因和抗毒素合成基因【知識梳理】類別應(yīng)用實例抗蟲殺蟲基因主要有Bt毒蛋白基因、蛋3類別應(yīng)用實例抗逆抗鹽堿和抗干旱的調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓基因、抗凍蛋白基因、抗除草劑基因改良①轉(zhuǎn)基因玉米中賴氨酸的含量比對照提高30%②轉(zhuǎn)基因延熟番茄儲存時間可延長1~2個月③轉(zhuǎn)基因矮牽牛呈現(xiàn)出自然界沒有的顏色變異類別應(yīng)用實例抗逆抗鹽堿和抗干旱的調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓基因、抗凍蛋白42.轉(zhuǎn)基因動物:類別應(yīng)用實例提高生長速度轉(zhuǎn)外源生長激素基因綿羊和轉(zhuǎn)外源生長激素基因鯉魚生長速率快、體型大改善畜產(chǎn)品品質(zhì)將腸乳糖酶基因?qū)肽膛;蚪M,使獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中,乳糖的含量大大減低,而其他營養(yǎng)成分不受影響2.轉(zhuǎn)基因動物:類別應(yīng)用實例提高生轉(zhuǎn)外源生長激素基因綿羊和轉(zhuǎn)5類別應(yīng)用實例生產(chǎn)藥物在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白、生長激素和α-抗胰蛋白酶等重要藥品作器官移植的供體①利用基因工程方法對豬的器官進(jìn)行改造,抑制抗原決定基因的表達(dá)②設(shè)法除去抗原決定基因,再結(jié)合克隆技術(shù),培育出沒有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官類別應(yīng)用實例生產(chǎn)藥物在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了63.基因治療與基因診斷:原理操作過程進(jìn)展基因治療基因表達(dá)利用正?;?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中,以表達(dá)出正常性狀來治療臨床實驗基因診斷堿基互補配對制作特定DNA探針與病人樣品DNA混合分析雜交帶情況臨床應(yīng)用3.基因治療與基因診斷:原理操作過程進(jìn)展基因基因利用正常基因7考點二蛋白質(zhì)工程與基因工程
1.區(qū)別:項目蛋白質(zhì)工程基因工程過程預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列目的基因的獲得→重組載體的構(gòu)建→重組載體的導(dǎo)入和篩選→目的基因的表達(dá)和鑒定實質(zhì)定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性,以獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品結(jié)果可生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)只能生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)考點二蛋白質(zhì)工程與基因工程
項目蛋白質(zhì)工程基因工程過程預(yù)82.聯(lián)系:(1)蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上,延伸出來的第二代基因工程。(2)基因工程中所利用的某些酶需要通過蛋白質(zhì)工程進(jìn)行修飾、改造。2.聯(lián)系:9類型一基因工程的應(yīng)用【典例1】(2015·濟南模擬)圖1表示科學(xué)家通過基因工程培育抗蟲棉時,從蘇云金桿菌中提取抗蟲基因,將其“放入”棉花細(xì)胞中與棉花的DNA分子結(jié)合起來而發(fā)揮作用的過程示意圖。請據(jù)圖回答下列有關(guān)問題:類型一基因工程的應(yīng)用10(1)圖2表示在圖1過程①中同時利用EcoRⅠ、EcoR52切割目的基因和載體,以形成兩種不同的黏性末端,這種雙酶切的優(yōu)點是________
。(1)圖2表示在圖1過程①中同時利用EcoRⅠ、EcoR5211(2)圖1中過程③涉及的生物技術(shù)是
;在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)植物細(xì)胞,導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞能否增殖?
,依據(jù)是
。(3)判斷基因轉(zhuǎn)化是否成功,應(yīng)對轉(zhuǎn)基因植物進(jìn)行鑒定,如果培育成功的植株能抗蟲,還應(yīng)進(jìn)行
水平鑒定,以確定該變異能否遺傳給后代。將上述抗蟲棉植株的后代種子種植下去后,往往有很多植株不再具有抗蟲性,原因是_________________________
,為獲得穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)基因植株,還需要對轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行嚴(yán)格的____________________________。(2)圖1中過程③涉及的生物技術(shù)是;在含12(4)圖3表示蘇云金桿菌細(xì)胞中的某些生命活動過程,則①處需要有
酶的催化,①②兩處共有的一種堿基配對方式是
。
(4)圖3表示蘇云金桿菌細(xì)胞中的某些生命活動過程,則①處需要13【解題指南】解答本題應(yīng)明確以下三點:(1)限制性內(nèi)切酶的特點。(2)三幅圖示代表的過程。(3)基因轉(zhuǎn)化成功的標(biāo)志?!窘馕觥?1)使用雙酶切,質(zhì)粒上的黏性末端不同,用DNA連接酶處理時,質(zhì)粒不能自身環(huán)化,同樣技術(shù)獲得的目的基因也不能自身環(huán)化。能夠保證目的基因定向插入到特定的位置。(2)圖1中過程①是重組載體的構(gòu)建,②是導(dǎo)入受體細(xì)胞,③是由受體細(xì)胞獲得棉花植株,原理是植物細(xì)胞的全能性,技術(shù)手段是植物組織培養(yǎng)。分析圖示,目的基因插入的位置是四環(huán)素抗性基因所在【解題指南】解答本題應(yīng)明確以下三點:14位置,即四環(huán)素抗性基因被破壞,倘若培養(yǎng)基中含有四環(huán)素,則導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞不能增殖。(3)生物變異分為可遺傳變異和不可遺傳變異,不可遺傳變異不涉及遺傳物質(zhì),是由環(huán)境條件變化引起的,可遺傳的變異涉及遺傳物質(zhì),因此,此種變異能否遺傳,要通過基因(分子)水平的鑒定??瓜x基因?qū)胫参锛?xì)胞后會整合到細(xì)胞中的染色體上,兩條同源染色體上只有一條會整合抗蟲基因,相當(dāng)于雜合體植株。(4)分析圖示,①處進(jìn)行的生命活動是轉(zhuǎn)錄過程,②處進(jìn)行的是翻譯過程。位置,即四環(huán)素抗性基因被破壞,倘若培養(yǎng)基中含有四環(huán)素,則導(dǎo)入15答案:(1)保證目的基因定向插入特定位置、防止目的基因和質(zhì)粒環(huán)化(答對一點即可)(2)植物組織培養(yǎng)不能在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中,四環(huán)素抗性基因片段被切除(3)分子(基因)抗蟲植株產(chǎn)生的雌雄配子中各有1/2不含抗蟲基因,受精時雌雄配子隨機結(jié)合,可以產(chǎn)生1/4左右的不具有抗蟲性植株連續(xù)自交(4)RNA聚合A—U答案:(1)保證目的基因定向插入特定位置、防止目的基因和質(zhì)粒16【互動探究】(1)圖1中②過程常用方法有哪些?提示:農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法。(2)對轉(zhuǎn)基因抗蟲棉進(jìn)行分子水平的鑒定有哪些方法?提示:轉(zhuǎn)錄的鑒定:核酸分子雜交;翻譯的鑒定:抗原和抗體雜交?!净犹骄俊?7【加固訓(xùn)練】乳腺生物反應(yīng)器是基于轉(zhuǎn)基因技術(shù)平臺,將外源基因?qū)雱游锘蚪M中并定位表達(dá)于動物乳腺,利用動物乳腺能夠天然、高效合成分泌蛋白。如圖為利用生物工程技術(shù)讓羊生產(chǎn)治療心臟病藥物tPA的大致過程。請據(jù)圖分析回答:【加固訓(xùn)練】乳腺生物反應(yīng)器是基于轉(zhuǎn)基因技術(shù)平臺,將外源基因?qū)?8(1)圖中②過程選擇受精卵作為tPA基因受體細(xì)胞的主要原因是
。(2)圖中④表示檢測與篩選過程,通常采用的方法是_________、
。(3)除利用乳腺、膀胱等生物反應(yīng)器外,人們還可以利用_______
、
等方法來生產(chǎn)上述物質(zhì),而傳統(tǒng)生產(chǎn)上述藥品是
中提取的,存在的缺點是___________
。
(1)圖中②過程選擇受精卵作為tPA基因受體細(xì)胞的主要原因是19【解析】(1)受精卵細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中含有很多個體發(fā)育所需的營養(yǎng)物質(zhì),容易產(chǎn)生完整的個體,全能性最高。(2)考查目的基因的檢測和表達(dá):用DNA分子雜交技術(shù)檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因;用分子雜交技術(shù)檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,即用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交;用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),即從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交,有時還需進(jìn)行個體生物學(xué)水平的鑒定,通過生物性狀表達(dá)與否來檢測基因工程的成功與否?!窘馕觥?1)受精卵細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中含有很多個體發(fā)育所需的營養(yǎng)物20(3)乳腺生物反應(yīng)器和膀胱生物反應(yīng)器是轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物的新方法,傳統(tǒng)生產(chǎn)多以微生物發(fā)酵工程或動物細(xì)胞工程為主要方法,但由于受操作條件相對較苛刻等的限制,所以價格較高。(3)乳腺生物反應(yīng)器和膀胱生物反應(yīng)器是轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物的新21答案:(1)受精卵發(fā)育的全能性最容易表達(dá)(2)分子雜交個體生物學(xué)水平鑒定DNA分子雜交抗原—抗體雜交(答對任意兩種即可)(3)工程菌培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)直接從生物組織、細(xì)胞或血液由于受操作條件相對較苛刻等的限制,價格十分昂貴答案:(1)受精卵發(fā)育的全能性最容易表達(dá)22類型二蛋白質(zhì)工程的應(yīng)用【典例2】(2013·新課標(biāo)全國卷Ⅰ節(jié)選)閱讀如下資料:資料:T4溶菌酶在溫度較高時易失去活性??茖W(xué)家對編碼T4溶菌酶的基因進(jìn)行了改造,使其表達(dá)的T4溶菌酶第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?,在該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成了一個二硫鍵,提高了T4溶菌酶的耐熱性。類型二蛋白質(zhì)工程的應(yīng)用23回答下列問題:該資料屬于________工程的范疇。該工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對____________進(jìn)行改造,或制造一種________的技術(shù)。在該實例中,引起T4溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的__________序列發(fā)生了改變?;卮鹣铝袉栴}:24【解析】資料中對基因進(jìn)行改造,結(jié)果得到耐熱性提高的蛋白質(zhì),因此屬于蛋白質(zhì)工程的范疇。蛋白質(zhì)工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新蛋白質(zhì)的技術(shù)。對基因進(jìn)行改造后,第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?,該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成了二硫鍵,引起了空間結(jié)構(gòu)的改變,所以最終是由于氨基酸序列的改變導(dǎo)致了空間結(jié)構(gòu)的改變。答案:蛋白質(zhì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)新蛋白質(zhì)氨基酸【解析】資料中對基因進(jìn)行改造,結(jié)果得到耐熱性提高的蛋白質(zhì),因25【加固訓(xùn)練】胰島素可以用于治療糖尿病,但是胰島素被注射入人體后,會堆積在皮下,要經(jīng)過較長時間才能進(jìn)入血液,而進(jìn)入血液的胰島素又容易分解,治療效果受到影響。如圖是用蛋白質(zhì)工程設(shè)計的速效胰島素的生產(chǎn)過程,請據(jù)圖回答有關(guān)問題:【加固訓(xùn)練】胰島素可以用于治療糖尿病,但是胰島素被注射入人體26(1)構(gòu)建新的蛋白質(zhì)模型是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵,圖中構(gòu)建新的胰島素模型的主要依據(jù)是
。(2)圖中從新的胰島素模型到新的胰島素基因的基本思路是什么?(3)新的胰島素基因與載體(質(zhì)粒)結(jié)合過程中需要限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶。已知限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-。請畫出質(zhì)粒被限制性內(nèi)切酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端:
。DNA連接酶對所連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求?
。(1)構(gòu)建新的蛋白質(zhì)模型是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵,圖中構(gòu)建新的胰島27(4)若將含有新的胰島素基因的表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞中,最常用的方法是
。(5)若要利用大腸桿菌生產(chǎn)速效胰島素,需用到的生物工程有
、
和發(fā)酵工程。(4)若將含有新的胰島素基因的表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞中,最常用28【解析】(1)構(gòu)建新的胰島素模型的主要依據(jù)是蛋白質(zhì)的預(yù)期功能。(2)根據(jù)蛋白質(zhì)的預(yù)期功能,推測新的胰島素中氨基酸的序列,進(jìn)而推斷基因中的脫氧核苷酸序列來合成新的胰島素基因。(3)將目的基因?qū)胫参镏?,最常用的轉(zhuǎn)化方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(4)限制性內(nèi)切酶識別特定的核苷酸序列,產(chǎn)生特定的黏性末端或平末端,而DNA連接酶對所連接的DNA兩端堿基序列卻沒有專一性要求。(5)生產(chǎn)自然界中本來沒有的蛋白質(zhì)需要用到蛋白質(zhì)工程、基因工程等技術(shù)?!窘馕觥?1)構(gòu)建新的胰島素模型的主要依據(jù)是蛋白質(zhì)的預(yù)期功能29答案:(1)蛋白質(zhì)的預(yù)期功能(2)根據(jù)新的胰島素中氨基酸的序列,推測出其基因中的脫氧核苷酸序列,然后利用DNA合成儀來合成新的胰島素基因。(3)否(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(5)蛋白質(zhì)工程基因工程答案:(1)蛋白質(zhì)的預(yù)期功能30【資源平臺】蛋白質(zhì)組計劃和人類基因組計劃的比較項目蛋白質(zhì)組計劃人類基因組計劃啟動時間2003年正式啟動1990年正
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