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PCR-DGGE技術及其應用

多聚酶鏈反應-變性梯度凝膠電泳分析技術(PCR-DGGE)可提供微生物種群的結構和進化譜圖，是近年來微生物學研究中應用較廣泛的分子技術之一。1PCR-DGGE技術的基本原理2PCR-DGGE技術的操作過程3PCR-DGGE技術的應用進展

1PCR-DGGE技術的基本原理

DGGE是一種可將長度相同而序列不同的DNA片段分離開的電泳方法。其基本原理是：DNA分子中4種堿基的組成和排列差異,使不同序列的雙鏈DNA分子具有不同的解鏈溫度。當雙鏈DNA分子在含梯度變性劑(尿素、甲酰胺)聚丙烯酰胺凝膠中進行電泳時,因其解鏈的速度和程度與其序列密切相關,所以當某一雙鏈DNA序列遷移到變性凝膠的一定位置,并達到其解鏈溫度時,即開始部分解鏈,部分解鏈的DNA分子的遷移速度隨解鏈程度增大而減小,從而使具有不同序列的DNA片段滯留于凝膠的不同位置,結束電泳時,形成相互分開的帶譜。理論上認為,只要選擇的電泳條件如變性劑梯度、電

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