基因工程試題

一、名詞解釋粘粒(cosmid)染色體爬行(Chromosomecrawling)生物反應(yīng)器(Bioreactor)基因打靶(Genetargeting)基因文庫(Genelibrary)SD序列(SDsequenee)Ti質(zhì)粒(Tiplasmid)轉(zhuǎn)基因植物(transgeneplant)粘性末端(Stickyends)轉(zhuǎn)染(transfection)染色體步查(chromosomewalking)染色體跳躍(Chromosomejumping)噬菌體(phagemic)多克隆位點(diǎn)(MultiplecloningsiteMCS)基因剔除(geneknock-out)轉(zhuǎn)化(transformation)細(xì)菌人工染色體(Bacterialartificialchromosome，BAC)二、選擇題構(gòu)建cDNA文庫時(shí)，首先需分離細(xì)胞的()染色體DNA線粒體DNA總DNAD．tRNAE.Rrna在對(duì)目的基因和載體DNA進(jìn)行同聚物加尾時(shí)需采用()反轉(zhuǎn)錄酶多聚核苷酸激酶引物酶D．RNA聚合酶E.末端轉(zhuǎn)移酶外源基因在大腸桿菌中高效表達(dá)受很多因素影響其中SD序列的作用是（）提供一個(gè)mRNA轉(zhuǎn)錄終止子提供一個(gè)mRNA起始點(diǎn)提供一個(gè)核糖體結(jié)合位點(diǎn)提供一個(gè)翻譯的終點(diǎn)下列常用于原核表達(dá)體系的是（）A.酵母細(xì)胞B.昆蟲細(xì)胞真菌大腸桿菌關(guān)于東克隆位點(diǎn)的描述不正確的是（）僅位于質(zhì)粒載體中具有多種酶的識(shí)別序列不同酶的識(shí)別序列可以重疊一般是人工合成添加到在體中的切口平移是指在（）的作用下，使（）帶上放射性性標(biāo)記DNA聚合酶I,RNADNA聚合酶I,RNADNA聚合酶III,RNADNA聚合酶III,RNA關(guān)于DNA接頭在基因工程中的作用，下面的說法哪一個(gè)不正確？（）給外源DNA添加適當(dāng)?shù)那悬c(diǎn)人工構(gòu)建載體調(diào)整外源基因的可讀框增加調(diào)控元件基因工程技術(shù)常用的限制性核酸內(nèi)切酶為（）I類酶II類酶III類酶W類酶用下列方法進(jìn)行重組體的篩選，表明出現(xiàn)了外源基因的產(chǎn)物的方法是（）Southern印跡Northern印跡Vesthern印跡菌落原位雜交cDNA文庫包括該種生物的（）某些蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因所有蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因所有的結(jié)構(gòu)基因內(nèi)含子和調(diào)控區(qū)Ti質(zhì)粒（）存在于所有的農(nóng)桿菌細(xì)胞中作為雙鏈DNA被轉(zhuǎn)移在植物中導(dǎo)致腫瘤在植物中作為染色體外質(zhì)粒目前在轉(zhuǎn)基因小鼠中常用的剔除技術(shù)是根據(jù)（）反義核苷酸的抑制作用轉(zhuǎn)座成分的致突變作用離體定向誘變作用同源重組粘粒時(shí)一種人工構(gòu)建的載體，（）具有cos位點(diǎn)，因此可以進(jìn)行體外包裝沒有質(zhì)粒DNA的復(fù)制特性進(jìn)入受體細(xì)胞可引起裂解反應(yīng)進(jìn)入受體細(xì)胞可引起溶源化反應(yīng)關(guān)于質(zhì)粒的不親和性，下面哪種說法不正確（）不同親和群的菌群能夠共存于同一細(xì)胞中質(zhì)粒可以分為若干個(gè)親合群，但不能分為若干親合群如果a、b兩種質(zhì)粒不親和，說明它們的復(fù)制機(jī)制相同屬于同一個(gè)親和群的質(zhì)粒，不僅復(fù)制機(jī)制相同，而且拷貝數(shù)和分子量也相同下列哪個(gè)酶要求有引物才能發(fā)揮作用（）限制性內(nèi)切酶DNA連接酶末端轉(zhuǎn)移酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶以質(zhì)粒為載體將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞的過程稱為（）轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)到接合轉(zhuǎn)染下列載體中隊(duì)外源DNA片段的容量最大的是（）質(zhì)粒粘粒酵母人工染色體（YAC）2噬菌體隨即引物標(biāo)記探針，下列各項(xiàng)中時(shí)不正確的（）雙鏈DNA，單鏈DNA，RNA都是可以標(biāo)記的必須用DNA酶I預(yù)處理模板DNA反應(yīng)時(shí)可用klenow酶反應(yīng)時(shí)可用DNA聚合酶I在切口平移標(biāo)記DNA探針時(shí)只能用（）Aklenow酶DNA聚合酶IDNA聚合酶IIDNA聚合酶III20.klenow酶與大腸桿菌DNA聚合酶I相比，前者喪失了（）3J5'合成酶3'f5'外切酶5'~3'外切酶轉(zhuǎn)移酶三、填空題核型多角體病毒有兩種表現(xiàn)性一和；分別感染_和。TaqDNA聚合酶需要適當(dāng)濃度的My2+才能發(fā)揮作用，My2+濃度升高對(duì)TaqDNA聚合酶的效應(yīng)是，My2+濃度降低對(duì)TaqDNA聚合酶的效應(yīng)是。由于不同構(gòu)型的DNA插入EB的量不同，它們?cè)诃傊悄z電泳中的遷移率也不同，SCDNA的涌動(dòng)速率是，OCDNA的涌動(dòng)速率是，LDNA的涌動(dòng)速率是.入噬菌體主要有兩種類型，插入型和置換型。就酶切位點(diǎn)來說，插入型為個(gè)置換型個(gè)。如果兩個(gè)質(zhì)粒不能穩(wěn)定共存于同一寄主細(xì)胞中，則屬于群，這是因?yàn)樗鼈兊乃?。入噬菌體由于包裝的限制，插入外源DNA片段后，總長度應(yīng)該在噬菌體基因組的的范圍內(nèi)。一個(gè)最簡單的質(zhì)粒載體必須包括以下幾個(gè)部分、和?；蚬こ趟械妮d體主要有三類：、和。利用TaqDNA聚合酶進(jìn)行PCR反應(yīng)所得產(chǎn)物不是平末端，而是在末端有一個(gè)突出的，據(jù)此人們?cè)O(shè)計(jì)了PCD產(chǎn)物的克隆法。限制性內(nèi)切酶的原則是：第一個(gè)字母來自，第二、三個(gè)字母來自、，第四個(gè)字母則表示。那些沒有可以檢測表型的質(zhì)粒稱為。根據(jù)Northern雜交的結(jié)果可以說明，根據(jù)Southern雜交的結(jié)果可以說明，根據(jù)Vesthern雜交的結(jié)果可以說明，根據(jù)原位雜交的結(jié)果可以說明。逆轉(zhuǎn)錄酶具有催化DNA合成的作用，同時(shí)還具有的作用，可以將DNA-RNA雙鏈中的？化掉。14.SD序列是mRNA分子中與結(jié)合的序列，位于密碼子的上游，在基因組中對(duì)應(yīng)的位置是位點(diǎn)位點(diǎn)之間。其結(jié)構(gòu)特征是全部或一部分。15.噬菌體可以被改造作為基因工程載體，主要由于和。四、簡答題1.在原核細(xì)胞中表達(dá)外源真核基因時(shí)，必須考慮那些因素？基因工程的發(fā)展主要得益于哪些重要的發(fā)現(xiàn)和發(fā)明？利用雙脫氧鏈終止法測定儀DNA的片段的堿基序列獲得以下圖譜1）寫出引物合成的DNA核苷酸鏈的堿基序列，標(biāo)出5和3末端；2）寫出作為模板的DNA鏈的堿基序列，標(biāo)出5,和3,末端。某一植戶購買了標(biāo)稱是抗蟲棉花的種子，在大田種植后發(fā)現(xiàn)部分植株效果明顯部分植株較差，甚至于普通棉花種子沒有明顯區(qū)別，他認(rèn)為是買到了假種子，于是就向種子管理部門舉報(bào)，假如你是種子管理部門的技術(shù)負(fù)責(zé)人，你將會(huì)采取何種手段鑒定這些植株是否是抗蟲棉？已知某卩-地中海貧血病是由于卩-珠蛋白基因序列發(fā)生C-T的點(diǎn)突變，隨之在該序列中增加了一個(gè)Mae1內(nèi)酶識(shí)別位點(diǎn)，如下圖，問：1）如何利用PCR方法對(duì)該病做出基因診斷，寫出方法和步驟。2）圖示正常，異常和雜合子個(gè)體診斷結(jié)果并做出解釋。利用Ti質(zhì)粒吧卡那霉素抗性基因（knnamycinresistaneegene）轉(zhuǎn)化入煙草細(xì)胞并獲得兩種具有抗性的植株，植株1與野生型雜交火的的自帶只注重有50%具有抗性，50%敏感；植株2與野生型雜交火的的自帶只注重有75%具有抗性，