PLGA微球的制備及釋放

一、藥物分析方法學(xué)的建立1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：取標(biāo)準(zhǔn)品10mg（實(shí)際稱取量為9.5mg）,加入10ml容量瓶中，以甲醇為稀釋劑，定容至刻度，定容后即為1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。從中取10、25、50、100uL,以甲醇為稀釋劑，分別定容至10mL，HPLC測(cè)定含量（色譜條件在后面敘述），然后得到線性回歸方程。由曲線可知，在0.95?9.5ug/mL范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，且吸收無干擾。y=52.14x-16.86740FlavopiridolConcentration(ug/mL)40FlavopiridolConcentration(ug/mL)圖1標(biāo)準(zhǔn)曲線2、 HPLC色譜條件：流動(dòng)相為A:Water（0.05%TFA）：B:Acetonitrile=7:3;流速為1mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為264nm;進(jìn)樣量為20uL；最大壓力200bar;柱溫為室溫。3、 HPLC測(cè)定圖譜aVWDA波長(zhǎng)264nm(IEF_LC2012-(4-12VWDA波長(zhǎng)264nm(IEF_LC2012-(4-129令17\皿(701￡mAJ2502D1510050VW1A波長(zhǎng)=64nm(D_C212&C5tl-3l-3\CB3_(301.DmAJ35251.5Q57750PLGA微球mnVW1A波長(zhǎng)=64nm(D_C212&C5tl-3l-3\CB3_(301.DmAJ35251.5Q57750PLGA微球mnVW1A波長(zhǎng)=64rm(D_C2312-06-(511-31-301-0101.D)0N6mn圖2 HPLC色譜圖:a）為Flavopiridol標(biāo)準(zhǔn)品的圖譜;b）為Flavopiridol的PLGA微球的圖譜;c）為空白PLGA微球的圖譜由圖譜可知，在Flavopiridol的出峰時(shí)間處，無空白干擾。二、藥物的PLGA微球制備1、 配制PVA17-88的水溶液（1%）；2、 取100mgPLGA（LA/GA=50/50,分子量5.5萬），溶于1mL的氯仿中；另取10mg藥物，加入此氯仿中，加入10uL三乙胺，靜置10min，觀察是否溶解，若不溶解繼續(xù)加5uL即可。3、 在1000rpm不停攪拌下，取上述氯仿溶液，逐滴加于含PVA17-88的水溶液中，水溶液的體積是氯仿體積的25倍，加完后，高速（7000rpm）均質(zhì)15s。轉(zhuǎn)移至通風(fēng)櫥中，繼續(xù)攪拌（600rpm）2min后，補(bǔ)加等體積蒸餾水，繼續(xù)攪拌4h。4、 待氯仿?lián)]發(fā)完后，取溶液高速離心（15000rpm，溫度4度）10min,加適量蒸餾水分散后，凍干。三、制劑的表征

1、粒徑取5.8mg制劑溶于5mL氯仿中，水浴超聲使分散均勻，然后測(cè)定粒徑Z-AVERAGESIZE(nm)

1080PEAK(nm)Z-AVERAGESIZE(nm)

1080PEAK(nm)867PDI0.0632、含量測(cè)定稱取制劑11.5mg，置于10mL容量瓶中，以氯仿定容至刻度，HPLC測(cè)定含量。計(jì)算得知，此溶液濃度為32.80ug/mL，載藥量為2.85%。3、釋放準(zhǔn)確稱量制劑10mg，以1mLpH7.4的PBS溶液分散后轉(zhuǎn)移至透析袋中。然后將透析袋置于含40mLpH7.4的PBS溶液（含0.1%的Tween-8O）的離心管中，恒溫振蕩（37度，50rpm）。取樣時(shí)間點(diǎn)為2h,4h,6h,8h,12h,24h,