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文檔簡介
生物親代與子代之間,在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上常常相似,這就是遺傳現(xiàn)象。生物的遺傳特性,使生物界的物種能夠保持相對穩(wěn)定。
根據(jù)現(xiàn)代細(xì)胞學(xué)和遺傳學(xué)的研究得知,控制生物性狀的主要遺傳物質(zhì)是脫氧核糖核酸(DNA)。
生物的各項生命活動都有它的物質(zhì)基礎(chǔ)。生物遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)是什么呢?金絲猴的后代仍然是金絲猴牛的后代仍然是牛遺傳物質(zhì)——
DNA與RNA第一組問題?DNA是遺傳物質(zhì)RNA也可以作為遺傳物質(zhì)核酸之外有其他遺傳物質(zhì)嗎?核素的發(fā)現(xiàn)肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗大腸桿菌噬菌體搗碎實驗化學(xué)實驗遺傳物質(zhì)必須具備的基本條件DNA是遺傳物質(zhì)DNA是遺傳物質(zhì)核素的發(fā)現(xiàn)
1868年,瑞士F.Miescher從繃帶上的白細(xì)胞核中分離出一種含磷的酸性物質(zhì),命名為核素。核素的主要成分是染色質(zhì),是DNA和蛋白質(zhì)的混合物。這是首次對基因的化學(xué)本質(zhì)進(jìn)行探索。核酸這一名詞于20年后才被正式啟用。19世紀(jì)末期,DNA和RNA已經(jīng)從細(xì)胞中分離出來,為進(jìn)一步的化學(xué)分析奠定了基礎(chǔ)。20世紀(jì)30年代搞清了DNA和RNA的基本化學(xué)組成。還注意到了DNA和RNA所含核糖的差異。肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗肺炎雙球菌有兩種類型光滑型(S型)粗糙型(R型)Griffth的肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實驗隨堂雙基4:在肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實驗中,將R型活細(xì)菌與加熱后殺死的S型細(xì)菌混合后注射到小鼠體內(nèi),小鼠死亡,則此過程中小鼠體內(nèi)S型、R型細(xì)菌含量變化情況最可能是下圖哪個選項()大腸桿菌噬菌體搗碎實驗
大腸桿菌噬菌體搗碎實驗1952年Herchey和Chase。用32P和35S分別標(biāo)記噬菌體的DNA和蛋白質(zhì),發(fā)現(xiàn)只有DNA進(jìn)入宿主細(xì)菌內(nèi),而蛋白質(zhì)則沒有。首先用含放射性同位素(如32P)的培養(yǎng)基培養(yǎng)
,然后再用上述細(xì)菌培養(yǎng)
,就可得到含放射性元素(如DNA分子中含32P)的T2噬菌體。思考1:制備含放射性同位素T2噬菌體的方法:細(xì)菌噬菌體首先用含放射性同位素(如35S)的培養(yǎng)基培養(yǎng)
,然后再用上述細(xì)菌培養(yǎng)
,就可得到含放射性元素(如蛋白質(zhì)外殼中含35S)的T2噬菌體。
細(xì)菌噬菌體如何制備32P標(biāo)記的噬菌體?如何制備35S標(biāo)記的噬菌體?32P標(biāo)記的噬菌體DNA位置:35S標(biāo)記的噬菌體蛋白質(zhì)位置:磷酸基R基噬菌體侵染細(xì)菌的過程:吸附
侵入
合成
組裝
釋放最后,這些噬菌體由于細(xì)菌的解體而被釋放出來,再去侵染其他的細(xì)菌?;瘜W(xué)實驗不同生物的堿基組成不同,具有嚴(yán)格的種的特異性。單體在不同生物中都是相同的。ATGC等量四種堿基的分子濃度可變。DNA是遺傳物質(zhì)的間接證據(jù)
(1)一種生物不同組織的細(xì)胞,不論年齡大小,功能如何,它的DNA含量是恒定的,而生殖細(xì)胞精子的DNA含量則剛好是體細(xì)胞的一半。多倍體生物細(xì)胞的DNA含量是按其染色體倍數(shù)性的增加而遞增的,但細(xì)胞核里的蛋白質(zhì)并沒有相似的分布規(guī)律。(2)DNA在代謝上較穩(wěn)定。(3)DNA是所有生物的染色體所共有的,而某些生物的染色體上則沒有蛋白質(zhì)。(4)DNA通常只存在于細(xì)胞核染色體上,但某些能自體復(fù)制的細(xì)胞器,如線粒體、葉綠體有其自己的DNA。(5)在各類生物中能引起DNA結(jié)構(gòu)改變的化學(xué)物質(zhì)都可引起基因突變。(1)儲存并表達(dá)遺傳信息:(2)能夠復(fù)制,把遺傳信息傳遞給子代:
(3)物理和化學(xué)穩(wěn)定性:(4)有遺傳變化的能力:遺傳物質(zhì)必須具備以下基本條件:某科學(xué)家做“噬菌體侵染細(xì)菌的實驗”時,對噬菌體的DNA用32P標(biāo)記,讓其中一個已標(biāo)記的噬菌體去侵染未標(biāo)記的細(xì)菌,最后釋放出100個噬菌體,則下列說法正確的是()A.噬菌體侵染細(xì)菌的實驗可以證明DNA是主要的遺傳物質(zhì)B.最后釋放出的100個噬菌體中,有98個噬菌體的DNA含32PC.標(biāo)記噬菌體的方法是用含32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)噬菌體D.標(biāo)記噬菌體的方法是用含32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌,再用此細(xì)菌培養(yǎng)噬菌體RNA也可以作為遺傳物質(zhì)RNA病毒:一些病毒也采用另一種核酸-RNA作為遺傳物質(zhì),如逆轉(zhuǎn)錄病毒。煙草花葉病毒(tobaccomosaicvirus,TMV)
設(shè)計實驗:TMV(煙草花葉病毒)蛋白質(zhì)RNA設(shè)計思路:技術(shù)方法:將蛋白質(zhì)與RNA分離,單獨(dú)觀察自身分離、化學(xué)提取分離、酶解法分離分離DNA與蛋白質(zhì)的技術(shù)手段有三類:(1)自身分離。(同位素標(biāo)記觀察)(2)化學(xué)提取法分離RNA與蛋白質(zhì),(3)用RNA酶和蛋白酶分別處理噬菌體分離分離重組重組感染新的病毒產(chǎn)生哪種病毒?類病毒(viroid)類病毒:不具蛋白質(zhì)衣殼,僅有RNA組成的新病毒。
1922年美國馬鈴薯紡錘形塊莖病毒。特點:單股閉合環(huán)狀的RNA分子,分子量約105da。能耐受紫外線和作用于蛋白質(zhì)的各種理化因素,在90℃下仍能存活。類病毒復(fù)制如何進(jìn)行?由宿主細(xì)胞的酶來完成,其RNA作為復(fù)制模板。類病毒現(xiàn)在僅在高等植物中發(fā)現(xiàn),一般通過接觸,擦傷,節(jié)肢動物和菟絲子傳播。非核酸的其他遺傳物質(zhì)朊病毒:又稱蛋白質(zhì)侵染因子。朊病毒是一類能侵染動物并在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的小分子的無免疫性疏水蛋白質(zhì)。羊瘙癢病1982年,美國發(fā)現(xiàn)羊瘙癢病是蛋白質(zhì)侵染引起的疾病,并稱為“Prion”即朊病毒。馬鹿和鹿的慢性消瘦病、貓的海綿狀腦病。1996年春天“瘋牛病”:牛海綿狀腦炎人慢性退化性紊亂疾病:老年癡呆、帕金森氏病、糖尿病等。朊病毒引起的風(fēng)波致病
正常朊蛋白構(gòu)型發(fā)生異常改變后導(dǎo)致瘋牛病,無需DNA或RNA的參與,致病因子朊蛋白就可以傳染復(fù)制。所謂朊病毒的繁殖就是正常的PrPC蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPSC的過程,而且朊病毒感染后也具有指數(shù)增長的特性。1)合成朊病毒所需的信息可能存在于寄主細(xì)胞中朊病毒的作用,僅在于激活在寄主細(xì)胞中為朊病毒的編碼的基因,使得朊病毒得以復(fù)制繁殖。2)朊病毒的蛋白質(zhì)能為自己編碼遺傳信息發(fā)生逆轉(zhuǎn)譯產(chǎn)生為朊病毒編碼的RNA或DNA,必須存在逆轉(zhuǎn)譯酶,甚至還要有逆轉(zhuǎn)錄酶。蛋白質(zhì)指導(dǎo)下的蛋白質(zhì)合成,即蛋白質(zhì)本身可作為遺傳信息。朊病毒的復(fù)制機(jī)理:大多數(shù)生物以DNA為遺傳物質(zhì)(細(xì)胞生物,DNA病毒)少數(shù)生物以RNA為遺傳物質(zhì)(RNA病毒)所以核酸是一切生物的遺傳物質(zhì),DNA是主要的遺傳物質(zhì)。蛋白質(zhì)不是(是,不是)遺傳物質(zhì)??偨Y(jié)核酸(DNA、RNA)的
化學(xué)組成第二組問題?嘧啶嘌呤1含氮堿基、核苷、核苷酸☉堿基HUracil(U)DNA:D-2-脫氧核糖A,G,C,TRNA:D-2-核糖A,G,C,U2核酸的化學(xué)組成
核酸的元素組成C、H、O、N、P(9-10%)
核酸
核苷酸
磷酸核苷
戊糖堿基3DNA的一級結(jié)構(gòu):即是指四種核苷酸(dAMP、dCMP、dGMP、dTMP)按照一定的排列順序,通過磷酸二酯鍵連接形成的多核苷酸也稱為堿基順序。DNA一級結(jié)構(gòu)的兩種縮寫方式:
線條式:…pTpGpCpApT……pT-G-C-A-T…
文字式:1DNA雙螺旋模型的提出2維持DNA雙螺旋的力3雙螺旋結(jié)構(gòu)的基本形式4變性和復(fù)性第三組問題?研究背景:1950年,大量不同來源DNA樣品的分析發(fā)現(xiàn)了DNA組成的當(dāng)量規(guī)律,即A=T,G=C,A+G=C+T。不同生物種屬的DNA堿基組成不同,同一個體不同器官、不同組織的DNA具有相同的堿基組成。1DNA雙螺旋模型的提出理論化學(xué)家L.Pauling運(yùn)用化學(xué)的簡單定律來推理,研究了蛋白質(zhì)
-螺旋結(jié)構(gòu),此方法啟發(fā)了Watson和Crick。M.Wilkins、R.Franklin等在DNA的X-射線晶體結(jié)構(gòu)方面作出了重大的貢獻(xiàn)。R.Franklin的X-射線衍射圖1953年沃森和克里克提出DNA分子雙螺旋結(jié)構(gòu)模型。DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的提出:Fig.
2-5WatsonandCrick’spaperinNature1953.DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的要點:①脫氧核糖和磷酸通過3’,5’磷酸二酯鍵交互連接,成為螺旋鏈的骨架。兩條鏈方向以反向平行的方式組成右手雙螺旋。②堿基互補(bǔ)配對:只有A和T配對,G和C配對才能滿足正常螺旋(直徑20?)的要求和chargaff的當(dāng)量規(guī)律。堿基互補(bǔ)配對原則應(yīng)用設(shè)DNA一條鏈為1鏈,互補(bǔ)鏈為2鏈。根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則可知:A1=T2,A2=T1,G1=C2,
G2=C1。則在DNA雙鏈中:A=T,G=CA
1T2T1A2G
1C2C1G
2DNA雙鏈例題1、某雙鏈DNA分子中,G占23%,求A占多少?解析:因為DNA分子中,A+G=T+C。所以,A=50%–23%=27%③螺旋參數(shù)螺旋直徑2nm。螺旋每旋轉(zhuǎn)一周10對堿基,每個堿基的旋轉(zhuǎn)角度為36°。螺距3.4nm;堿基平面之間的距離為0.34nm。④
大溝小溝對于遺傳上有重要功能的蛋白質(zhì)識別DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)上的特定信息是非常重要的。大溝(2.2nm)小溝(1.2nm)2維持DNA雙螺旋的力氫鍵GC之間有三條氫鍵,AT之間有兩條氫鍵,這是DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的重要特征之一,DNA的許多物理性質(zhì)如變性、復(fù)性以及Tm值等都與此有關(guān)。堿基堆集力
DNA同一條鏈相鄰堿基之間的非特異性作用力,包括疏水作用力和范德華力。
疏水作用力:不溶于水或難溶于水的兩個分子在水中具有相互聯(lián)合,成串聯(lián)地結(jié)合在一起的趨勢。嘌呤和嘧啶有一定程度的疏水性,雙螺旋結(jié)構(gòu)內(nèi)部形成一個強(qiáng)大的疏水區(qū),使DNA相鄰的堿基有相互堆集在一起的趨勢,這是形成堿基堆集力的重要因素之一。范德華力:存在于分子間的一種吸引力;
DNA雙鏈中嘌呤環(huán)和嘧啶范環(huán)德華的半徑是1.7?左右
,其累積的范德華力是相當(dāng)可觀的,這樣范德華力加強(qiáng)了疏水作用,這是形成堿基堆集力的另一個重要因素。
氫鍵與堿基堆集力的協(xié)同作用已經(jīng)堆基的堿基更容易發(fā)生氫鍵的鍵合,相應(yīng)地已經(jīng)被氫鍵定向的堿基更容易堆集。兩種作用力相互協(xié)同,形成一種非常穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。如果一種作用力被消除,另一種作用力也大為減弱。
磷酸基團(tuán)間的靜電斥力
帶負(fù)電荷的磷酸基的靜電斥力,所以DNA需要保存在含
Na+
生理鹽條件。
堿基分子內(nèi)能
物體的內(nèi)能是物體內(nèi)全部分子的分子動能與分子勢能之和。溫度升高,堿基分子內(nèi)能增加時,堿基的定向排列遭受破壞,消弱了堿基的氫鍵結(jié)合力和堿基的堆集力,會使DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞。不穩(wěn)定因素3雙螺旋結(jié)構(gòu)的基本形式
三種不同形式的DNA構(gòu)象A,B,Z型雙螺旋的特性雙螺旋類型直徑(nm)螺距(nm)每輪堿基數(shù)堿基間距(nm)堿基傾角(°)螺旋扭角(°)存在的條件溝型相對濕度鹽種類大溝小溝A2.32.8110.26133375%Na+、K+、Cs+窄,深寬,深B2.03.410.40.3403692%Na+低鹽寬,中等深窄,中等深Z1.84.6120.389-3043%Na+、Mg2+高鹽平淺窄,深A(yù)BZ大溝寬小溝窄小溝窄大溝窄深小溝寬深大溝不存在小溝窄而深A(yù)構(gòu)象:在相對濕度75%以下獲得的DNA纖維具有不同與B-DNA的結(jié)構(gòu)特點。DNA-RNA雜交分子和RNA-RNA雙鏈結(jié)構(gòu)均采取A構(gòu)象。Z-DNA的形成是DNA單鏈上出現(xiàn)嘌呤和嘧啶交替排列所造成的,比如CGCGCGCG或CACACACACA。Z-DNA
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