改組織學(xué)緒論(7版)

組織學(xué)與胚胎學(xué)

第一章組織學(xué)緒論目的要求

1．掌握組織的基本概念和類(lèi)型，細(xì)胞、組織、器官、系統(tǒng)的關(guān)系。2．熟悉組織學(xué)常用研究技術(shù)的基本原理及其應(yīng)用。3．了解組織學(xué)研究?jī)?nèi)容和學(xué)習(xí)這門(mén)課程的目的。一、組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容組織學(xué)（histology）：研究機(jī)體微細(xì)結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功能的科學(xué)組織學(xué)常用量度單位微米(1μm=0.001mm)納米(1nm=0.001μm)

消化系統(tǒng)

食管上皮組織肌組織結(jié)締組織復(fù)層扁平上皮涂片組織學(xué)研究?jī)?nèi)容細(xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)組織上皮組織結(jié)締組織肌肉組織神經(jīng)組織器官和系統(tǒng)人體意義：

只有深入了解機(jī)體的結(jié)構(gòu)才可能透徹闡明其功能。掌握組織學(xué)的基本知識(shí)和技能,是將來(lái)學(xué)好生理學(xué)和病理學(xué)的前提。二、組織胚胎學(xué)研究技術(shù)問(wèn)題

解決方法

觀(guān)察對(duì)象太小

放大

顯微鏡

觀(guān)察對(duì)象無(wú)色，無(wú)反差

染色（HE染色）

觀(guān)察對(duì)象生化成分不同

細(xì)胞化學(xué)、免疫組織化學(xué)

觀(guān)察對(duì)象是活體

培養(yǎng)(一)光鏡技術(shù)分辨率(Resolution)是指能夠分辨相鄰兩點(diǎn)之間的最小距離。LM的分辨率約為0.2μm。1.切片(Section):將組織切薄使光線(xiàn)可以透過(guò)。a.固定(Fixation):為保存新鮮組織的微觀(guān)結(jié)構(gòu)，盡快將組織浸入到酒精，甲醛等固定劑中。b.石蠟包埋(Paraffinembedding):*脫水(Dehydration):用濃度逐漸升高的酒精(70~100%)將組織中的水完全置換出來(lái)。*透明(Clearing):用二甲苯完全置換出酒精。*浸蠟(Infiltration):在60~62?C時(shí)，用液態(tài)石蠟完全置換出二甲苯。室溫時(shí)石蠟?zāi)坛晒虘B(tài)，內(nèi)含待切組織。c.切片:用切片機(jī)將組織切成1~20μm厚的蠟片，然后將其放到溫水上，待其完全展開(kāi)后，裱到有粘附劑的載玻片上。2.染色(Staining):染料可以將微觀(guān)結(jié)構(gòu)顯示不同的顏色以便觀(guān)察鑒別。在染色前，需要脫蠟入水，因?yàn)槿玖鲜撬苄缘?。HE染色：蘇木精（Hematoxylin）伊紅（Eosin）染色堿性染料將嗜堿性物質(zhì)（本身酸性）染成藍(lán)色細(xì)胞核中的DNA、RNA細(xì)胞質(zhì)中的RNA酸性染料將嗜酸性物質(zhì)（本身堿性）染成紅色細(xì)胞質(zhì)、膜性結(jié)構(gòu)（線(xiàn)粒體、溶酶體、滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）H.E.染色切片在染色后，重新進(jìn)入酒精和二甲苯，最后用中性樹(shù)膠封片，以便長(zhǎng)期保存。*切片:固定→梯度酒精→二甲苯→石蠟。*染色:石蠟→二甲苯→梯度酒精→水。*保存:水→梯度酒精→二甲苯→中性樹(shù)膠。其他染色法:硝酸銀→神經(jīng)細(xì)胞、活體染色、特殊染色其他切片技術(shù):火棉膠包埋,冰凍切片,涂片,鋪片,磨片。銀染色方法親銀性(直接染色)嗜銀性(+還原劑)硝酸銀溶液直接染色(或+還原劑)銀染色法活體染色特殊染色

H&E染色的中等動(dòng)靜脈不同的染色方法，其結(jié)果不同。醛復(fù)紅染色的中等動(dòng)靜脈鋪片涂片

smear磨片(二)電鏡技術(shù)（ElectronMicroscopy）透射電鏡（Transmissionelectronmicroscopy

TEM）用途:觀(guān)察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)掃描電鏡（ScanningelectronmicroscopySEM）用途:觀(guān)察組織或細(xì)胞表面的立體結(jié)構(gòu)

透射電子顯微鏡

Transmissionelectronmicroscope觀(guān)察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)以電子束穿透樣品,經(jīng)聚合放大后,顯像于熒光屏上進(jìn)行觀(guān)察與攝片

掃描電鏡（Scanningelectronmicroscope,SEM）

觀(guān)察細(xì)胞或組織的表面結(jié)構(gòu)組織塊經(jīng)取材固定后,干燥,在標(biāo)本表面先后噴一層碳膜和合金膜,鏡下掃描成像透射電鏡電子密度高:當(dāng)電子束投射到密度大吸附重金屬多的結(jié)構(gòu)時(shí),電子被散射的多,因此,射落到熒光屏上的電子少而呈暗像,電鏡照片呈黑或深灰色,稱(chēng)為電子密

度高。反之稱(chēng)為電子密度低。影像較黑稱(chēng)電子密度高反之稱(chēng)電子密度低(三)組織化學(xué)術(shù)組織化學(xué)術(shù):為應(yīng)用化學(xué)、物理、生物化學(xué)、免疫學(xué)或分子生物學(xué)原理和技術(shù),與組織學(xué)技術(shù)相結(jié)合而產(chǎn)生的技術(shù),能在組織切片定性、定位、定量地顯示某種物質(zhì)的存在與否以及分布狀態(tài)。細(xì)胞