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Microscopicalidentification是利用顯微鏡來觀察生藥的組織構(gòu)造、細(xì)胞形狀以及內(nèi)含物,描述顯微特征,制定顯微鑒別依據(jù),用以鑒定生藥品種和質(zhì)量的重要手段之一。通常適用于性狀鑒定不易識(shí)別的生藥,性狀相似不易區(qū)別的多來源生藥、破碎生藥、粉末生藥以及用粉末生藥制成的丸散錠丹等中藥成方制劑的鑒定。第五節(jié)顯微鑒定一顯微鑒定常用的方法
顯微制片橫切片或縱切片表面制片粉末制片解離組織片:氫氧化鉀法或硝鉻酸法細(xì)胞內(nèi)含物的鑒定細(xì)胞壁性質(zhì)鑒定:木質(zhì)化(加間苯三酚及濃鹽酸顯紅色)、木栓化(加蘇丹試液顯紅色)、纖維素化、硅質(zhì)化細(xì)胞壁細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物的測(cè)量(一)顯微鑒定的方法
1、橫切片或縱切片:選取藥材適當(dāng)部位,軟化后用徒手或滑走切片法,切成10~20μm的薄片,選用甘油醋酸或水合氯醛等試液觀察。無支持劑切片法:徒手切片法、滑走切片法(鮮嫩)有支持劑切片法石蠟切片法、冰凍切片法
2、表面制片(葉類、花類、果實(shí)種子類、全草類):將樣品濕潤(rùn)軟化后,切取一部分或撕取其表面,加適當(dāng)?shù)脑囈海^察各部位的表皮特征。
平軸式氣孔直軸式氣孔不定式氣孔不等式氣孔環(huán)式氣孔腺毛腺鱗果實(shí)表面非腺毛
3、粉末制片:將藥材粉末少量置于玻璃片上,攤平,加水合氯醛試液(透化)進(jìn)行觀察。簇晶淀粉粒導(dǎo)管導(dǎo)管石細(xì)胞纖維鱗葉表皮細(xì)胞纖維
4、解離組織片:用以觀察單個(gè)細(xì)胞的完整形狀,如導(dǎo)管、管胞、纖維、石細(xì)胞等。根據(jù)木化程度不同可分別用氫氧化鉀法、硝鉻酸法、氯酸鉀法等。
解理劑破壞胞間層(果膠層、中膠層),使各個(gè)細(xì)胞分離。在解理前應(yīng)先將樣品切成寬或厚約2mm的小條或片,放在試管中,加解理劑,加熱至用玻璃棒能離散為止。傾去解理液,加水洗滌后,取少量置于載玻片上,用稀甘油裝置觀察。
5、花粉及孢子制片:取花粉、花藥(或小花朵)或孢子囊群(干燥品浸于冰醋酸中軟化),搗碎,離心,醋酐-硫酸(9:1)處理,加熱2~3分鐘,沉淀水洗2次,加50%甘油與苯酚3~4滴,用品紅甘油膠封藏。也可用水合氯醛裝片觀察。二、顯微鑒定要點(diǎn)(一)根類生藥根類生藥大多取自被子植物的根,包括藥用為根或以根為主帶有部分根莖的生藥。如人參、何首烏、牛膝、三七等。首先根據(jù)維管組織,區(qū)別其為雙子葉植物根或單子葉植物根。雙子葉植物根的初生構(gòu)造,皮層寬,中柱小、韌皮部束及木質(zhì)部束數(shù)目少,相間排列,初生木質(zhì)部呈星芒狀,一般無髓。
雙子葉植物根次生構(gòu)造的特征1)表層為木栓組織,少數(shù)為表皮;2)皮層狹窄,一般初生皮層不存在,為次生皮層,韌皮部發(fā)達(dá),有形成層;3)木質(zhì)部有導(dǎo)管、管胞、木纖維、木薄壁細(xì)胞及木射線;4)根大多無髓,少數(shù)有明顯的髓部,如龍膽、烏頭等。單子葉植物根的特征1)無木栓組織,其表皮細(xì)胞外壁有時(shí)增厚或由表皮發(fā)育成數(shù)列根被細(xì)胞,壁木栓化或木質(zhì)化,有的壁上有增厚的細(xì)條紋,如百部;2)皮層寬廣,占根的大部分;3)無形成層,內(nèi)皮層凱氏點(diǎn)明顯;韌皮部束和木質(zhì)部束數(shù)目多,相間排列成一圈,無射線4)有髓,髓部大,多為薄壁細(xì)胞。
甘草百部塊根橫切面:根被為3-5列細(xì)胞,壁木化。皮層寬廣;內(nèi)皮層細(xì)胞較小,類方形或類長(zhǎng)方形,壁木化增厚。中柱約占根的1/5-1/8;中柱鞘為1-2列薄壁細(xì)胞;韌皮部束15-24個(gè),與木質(zhì)部束相間排列,各束木質(zhì)部?jī)?nèi)側(cè)由木化組織連接成環(huán)層。髓薄壁細(xì)胞類圓形,非木化。有些雙子葉植物根有異常的三生構(gòu)造,如何首烏塊根的形成層環(huán)外有數(shù)個(gè)異型復(fù)合維管束;牛膝根有數(shù)輪同心排列的維管束;商陸根有數(shù)輪形成層環(huán)等。
何首烏塊根商陸-羅盤紋
根的分泌組織大多分布在韌皮部,如乳汁管(桔梗、黨參),樹脂道(人參、三七),油室(木香、當(dāng)歸),油細(xì)胞(細(xì)辛、青木香)。常有草酸鈣結(jié)晶,簇晶(何首烏、人參),針晶(天冬、麥冬),砂晶(牛膝),方晶及晶纖維(甘草、紅芪)。
2.粉末特征根類粉末生藥的鑒定,重點(diǎn)鑒別有鑒別特征的1)細(xì)胞后含物(淀粉粒、菊糖、草酸鈣結(jié)晶、硅質(zhì)塊等);2)厚壁組織(纖維、纖維管胞、晶纖維、分隔纖維、石細(xì)胞等);3)分泌組織(分泌細(xì)胞、分泌腔、分泌道、乳汁管等);其次鑒別表皮、下皮、根被或木栓組織、內(nèi)皮層、導(dǎo)管及管胞。(二)根莖類生藥根莖類生藥是以植物的地下莖入藥,包括根狀莖(根莖)、塊莖、鱗莖和球莖,如天南星、百合、大黃等。1.性狀鑒定根莖類生藥表面有節(jié)和節(jié)間,以單子葉植物的根莖為明顯,節(jié)上常見有退化的鱗片狀葉,有時(shí)可見葉痕和芽痕,周圍或下側(cè)有不定根或根痕。蕨類植物根莖的表面常有鱗片或鱗毛,有的周圍密布整齊的葉柄基。根莖類生藥的橫斷面,雙子葉植物根莖呈放射狀結(jié)構(gòu),中心有明顯的髓;單子葉植物的根莖不呈放射狀,內(nèi)皮層環(huán)大多明顯,環(huán)圈內(nèi)外均散有維管束小點(diǎn);蕨類植物根莖有的中心為木部,無髓,有的木部呈完整的環(huán)圈,中心有髓,有的數(shù)個(gè)分體中柱斷續(xù)排列為圈狀。2.組織構(gòu)造
觀察根莖類生藥的組織構(gòu)造,首先根據(jù)中柱、維管束的類型,區(qū)別其為蕨類植物、雙子葉植物或單子葉植物的根莖。蕨類植物根莖的最外層,多為厚壁性的表皮及下皮細(xì)胞,基本薄壁組織較發(fā)達(dá)。中柱的類型有下圖4種。金毛狗脊
蕨類植物根莖也可觀察葉柄基橫斷面分體中柱的數(shù)目和排列情況作為鑒別點(diǎn)。雙子葉植物根莖大多有木栓組織,或有木栓石細(xì)胞(如蒼術(shù)、白術(shù));皮層中有時(shí)可見根跡維管束;中柱維管束無限外韌型,環(huán)列;中心有髓。
黃連少數(shù)種類有三生構(gòu)造,髓部有異型復(fù)合維管束(如大黃)。掌葉大黃唐古特大黃藥用大黃單子葉根莖的最外層多為表皮,皮層中有葉跡維管束,內(nèi)皮層大多明顯;中柱中散有多數(shù)有限外韌維管束,也有周木維管束(如菖蒲)。有的根莖類生藥有油室(如川芎、蒼術(shù)、白術(shù))或油細(xì)胞(如菖蒲、石菖蒲、香附)。根莖類生藥頗多含草酸鈣針晶束(如天南星、半夏、天麻、白及、玉竹、黃精、山藥),針晶束大多存在于粘液細(xì)胞中。此外,還應(yīng)注意厚壁組織、導(dǎo)管以及草酸鈣結(jié)晶的類型。半夏粉末——針晶束3.根莖類生藥粉末的觀察與根類相似。注意鱗莖、塊莖、球莖常含多量較大的淀粉粒,其形狀、大小、臍點(diǎn)、層紋以及復(fù)粒、半復(fù)粒、多臍點(diǎn)單粒(如貝母類)等特征是鑒別的重要依據(jù)。(三)莖藤類生藥莖類中藥,以植物的地上莖或莖的一部分入藥,包括木本植物的莖藤,如關(guān)木通、海風(fēng)藤、大血藤、雞血藤等;草本植物莖藤,如首烏藤、天仙藤;莖枝,如桂枝、桑枝、桑寄生等;莖刺,如皂角刺;也有僅用莖的髓部,如通草,小通草,燈心草等。
1.性狀鑒定木質(zhì)藤本和莖枝,多呈圓柱形或扁圓柱形,有的扭曲不直,黃棕色,粗細(xì)大小不一。少數(shù)具特殊顏色,如大血藤呈紅紫色。表面粗糙,可見深淺不一的裂紋及皮孔,節(jié)膨大,具葉痕及枝痕。質(zhì)地堅(jiān)實(shí),斷面纖維性或裂片狀,平整的橫切面木質(zhì)部占大部分,呈放射狀結(jié)構(gòu),有的導(dǎo)管小孔明顯可見,如關(guān)木通,青風(fēng)藤;有的可見特殊的環(huán)紋,如雞血藤。氣味常可幫助鑒別,如海風(fēng)藤味苦,有辛辣感,青風(fēng)藤味苦而無辛辣感。
草質(zhì)藤本較細(xì)長(zhǎng),圓柱形或干縮時(shí)因維管束和機(jī)械組織的存在,而形成數(shù)條縱向的隆起線,也有呈類方柱形,表面多呈枯綠色,也有呈紫紅褐色,如首烏藤;節(jié)和節(jié)間、枝痕、葉痕較明顯。質(zhì)脆,易折斷,斷面可見明量的髓部,類白色,疏松,有的呈空洞狀,有些草本植物莖,如石斛,麻黃,則列入全草類中藥。
2.莖類生藥的組織構(gòu)造:(1)周皮或表皮
木質(zhì)莖最外方為周皮,幼嫩莖??梢姷奖砥?。草質(zhì)莖最外方為表皮,角質(zhì)層的厚度、毛茸和氣孔,都是鑒別的主要特征。(2)皮層(3)韌皮部(4)形成層注意是否明顯,一般都成環(huán)狀。(5)木質(zhì)部注意導(dǎo)管、管胞、纖維、薄壁細(xì)胞、射線細(xì)胞的形狀和排列情況。(6)髓部大多由薄壁細(xì)胞構(gòu)成,多具明顯的細(xì)胞間隙。草質(zhì)莖髓部較發(fā)達(dá),木質(zhì)莖髓部較小。3.粉末生藥的觀察除了無葉肉組織外,其他組織一般都可能存在。(四)皮類生藥皮類生藥通常是指來源于裸子植物或被子植物(其中主要是雙子葉植物)的莖干、枝和根的形成層以外的部分的藥材。它由內(nèi)向外包括次生和初生韌皮部、皮層和周皮等部分。其中大多為木本植物莖干的皮,少數(shù)為根皮或枝皮。1.性狀鑒定應(yīng)注意皮類生藥的形狀、外表面、內(nèi)表面、折斷面和氣味等方面的特征。(1)形狀(2)內(nèi)表面顯不同顏色,如肉桂呈紅棕色,杜仲呈紫褐色。有的皮類生藥,內(nèi)表面刻劃有油痕,如肉桂、厚樸。(3)外表面一般較粗糙。注意外表顏色、皮孔。皮孔的形狀、顏色、分布的密度,常是鑒別皮類的特征之一。如杜仲的皮孔呈斜方形,牡丹皮的皮孔呈橫長(zhǎng)略凹陷。少數(shù)皮類外表面有釘狀物,如海桐皮。部分皮類,木栓層已去或部分除去而較光滑,如黃柏。(4)折斷面性狀主要有:平坦組織中富有薄壁細(xì)胞而無石細(xì)胞群或纖維束的皮,折斷面較平坦,無顯著突起物,如牡丹皮。顆粒狀組織中富有石細(xì)胞群的皮,折斷面顆粒狀突起,如肉桂。纖維狀組織中富含纖維的皮,如合歡皮。層狀組織構(gòu)造中的纖維束和薄壁組織成環(huán)帶狀間隔排列,折斷時(shí)形成明顯的層片狀,如黃柏。另外,杜仲有膠絲。(5)氣味各種皮的外形有時(shí)相似,但氣味卻完全不同。如香加皮和地骨皮,前者有特殊香氣,味苦而有刺激感,后者氣味均較微弱。2.皮類生藥構(gòu)造可分為:(1)周皮包括木栓層、木栓形成層與栓內(nèi)層。(2)皮層可見纖維、石細(xì)胞和分泌組織(油細(xì)胞、乳管、粘液細(xì)胞等)及內(nèi)含物,如淀粉粒和草酸鈣結(jié)晶。(3)韌皮部包括韌皮部束和射線兩部分。3.粉末的顯微觀察一般不應(yīng)有木質(zhì)部的組織,主要有木栓細(xì)胞、纖維、分泌組織、石細(xì)胞及草酸鈣結(jié)晶。
厚樸(皮)
厚樸(五)木類生藥
木(Lignum)類中藥,指木本植物莖形成層以內(nèi)的木質(zhì)部部分入藥,通稱木材。木材又分邊材和心材,邊材形成較晚,含水分較多,顏色稍淺,亦稱液材;心材形成較早,位于木質(zhì)部?jī)?nèi)方,蓄積了較多的物質(zhì),如樹脂、樹膠、丹寧、油類等,顏色較深,質(zhì)地較致密。木類中藥多采用心材部分,如沉香、降香、蘇木等。木類中藥多呈不規(guī)則的塊狀、厚片狀或長(zhǎng)條狀。表面黃白色如沉香,紫紅色如降香,棕紅色如蘇木,許多木類生藥表面應(yīng)具有棕褐色樹脂狀條紋或斑塊。質(zhì)地和氣味??梢詭椭b別,如沉香質(zhì)重,具香氣;白木香質(zhì)輕,香氣較淡。
2.木類生藥的組織構(gòu)造應(yīng)分別制作三個(gè)方向的切面:即橫切面、徑向縱切面、切向縱切面。觀察下列組織特征:(1)導(dǎo)管通常木類生藥的導(dǎo)管大多為具緣紋孔及網(wǎng)紋導(dǎo)管。(2)木纖維占木材的大部分,縱切面觀為狹長(zhǎng)的厚壁細(xì)胞,長(zhǎng)度為寬度的30~50倍,細(xì)胞腔狹小,壁厚有斜裂隙狀的單紋孔。橫切面觀多呈類三角形,具胞腔。(3)木薄壁細(xì)胞是貯藏養(yǎng)料的生活細(xì)胞,有時(shí)內(nèi)含淀粉?;虿菟徕}結(jié)晶。(4)木射線over(六)葉類生藥葉類(Folium)生藥多用完整長(zhǎng)成的干燥葉,也有用復(fù)葉的小葉,如番瀉葉;少數(shù)帶有嫩枝,如側(cè)柏葉等。1.性狀鑒定(1)組成單葉或復(fù)葉。(2)形狀完整葉片的外形、葉緣、葉端、葉基與葉脈的特征,葉柄、托葉、葉鞘的有無與特征等。(3)大小(4)表面特征這是鑒定葉類生藥的重要依據(jù)之一。注意觀察上下表面的色澤、質(zhì)地(草質(zhì),革質(zhì)、紙質(zhì)或肉質(zhì))、光滑或粗糙、有無毛茸、腺點(diǎn)或其它色點(diǎn)、對(duì)光觀察有無透明點(diǎn)(油點(diǎn))或灰色斑點(diǎn)(草酸鈣結(jié)晶)等。(5)氣味鑒定葉類生藥的依據(jù)之一。2.顯微鑒定通常在距葉柄1/3~l/2處,通過主脈,切制成橫切片:觀察表皮、葉肉與主脈三個(gè)部分的特征。(l)表皮通常上下表皮各具一列表皮細(xì)胞。在橫切面上多為扁平長(zhǎng)方形或方形。禾本科植物的上表皮細(xì)胞有較大的“運(yùn)動(dòng)細(xì)胞’(淡竹葉);有的表皮細(xì)胞內(nèi)含葡萄狀鐘乳體(桑葉)、螺旋狀鐘乳體(穿心蓮葉)、簇狀橙皮苷結(jié)晶(薄荷葉)等。
有的表皮細(xì)胞向外突出而形成突起或毛茸。觀察表皮的毛茸極為重要,注意觀察毛茸的種類(腺毛或非腺毛),組成非腺毛的細(xì)胞數(shù),組成腺毛頭部和柄部的細(xì)胞數(shù)、行列數(shù)、是否分叉,有無疣狀突起,毛茸壁的厚度等。干燥葉類生藥,毛茸脫落形成毛痕。表皮上的氣孔也是葉類生藥的重要鑒定依據(jù)。氣孔的型式與植物的科、屬、種之間有一定的關(guān)系,同一張葉片上也可能有不只一種形式的氣孔,氣孔的數(shù)目常以下表皮為多。2.葉肉通常分化為柵欄組織與海綿組織。(1)柵欄組織:由一至數(shù)列長(zhǎng)柱形細(xì)胞組成,內(nèi)含大量葉綠粒。柵欄組織一般位于上表皮細(xì)胞的下方,形成異面葉,也有上下表皮細(xì)胞內(nèi)方均有柵欄組織,形成等面葉(桉葉、番瀉葉)。柵欄細(xì)胞與表皮細(xì)胞之間有一定的關(guān)系。一個(gè)表皮細(xì)胞下的柵欄細(xì)胞的平均數(shù)目稱為“柵表比”。(2)海綿組織:占葉肉組織的大部分,注意細(xì)胞后含物。3.葉脈表皮細(xì)胞氣孔厚角細(xì)胞靛藍(lán)結(jié)晶橙皮苷結(jié)晶(七)花類生藥花類(Flos)生藥包括干燥的花、花序或花的一部分。完整的花分為已開花(如洋金花、紅花)和花蕾(如辛夷、丁香、槐米、金銀花);花序亦有用未開放的花蕾(如款冬花)和已開放的花(如旋復(fù)花、菊花);花的一部分,如番紅花系其花的柱頭;松花粉、蒲黃則為花粉粒等。1.性狀鑒定 花類生藥由于經(jīng)過采收、干燥,因此常干縮、破碎,改變?cè)瓉淼男螤罴邦伾?。?yīng)注意觀察生藥樣品的全形、顏色、大小、氣味。然后放在熱水中軟化,以便觀察它們的構(gòu)造。
(3)雄蕊群雄蕊分花絲和花藥兩部分。花粉粒形狀多樣,有球形、橢圓形或多面形等;外壁平滑,但多數(shù)具脊、刺狀、顆粒狀突起或網(wǎng)格狀雕紋及萌發(fā)孔或萌發(fā)溝?;ǚ哿5男螒B(tài)特征是花類生藥的重要鑒別依據(jù).花粉的外壁有各種形態(tài),有的光滑,如番紅花、槐米等,有的有刺狀突起,如紅花、金銀花等,有的具放射狀雕紋如洋金花,有的具網(wǎng)狀紋理?;ǚ哿5男螤钣袌A形如金銀花、洋金花、紅花等,三角形如丁香,四分體形如鬧羊花。2.顯微鑒定
金銀花
4.雌蕊群花類粉末生藥的觀察。以花粉粒、花粉囊內(nèi)壁纖維層細(xì)胞增厚特征、非腺毛、腺毛為主要點(diǎn),并注意草酸鈣結(jié)晶、分泌組織及色素細(xì)胞等。
(八)果實(shí)類生藥
果實(shí)類(Fructus)生藥包括完整的果實(shí)或果實(shí)的一部分。采用果皮或其中一部分的,如陳皮、山萸肉、大腹皮;采用果柄或宿萼的,譬如甜瓜蒂、柿蒂;采用完整果實(shí)的,如山楂、牛蒡子等。1.性狀鑒定應(yīng)注意觀察果實(shí)的類型、形狀、大小、顏色、表面、氣味和切面特征;頂部有時(shí)可見殘余的花被、宿存的花柱或疤痕;基部有時(shí)可見宿萼、果柄或果柄痕。果實(shí)類生藥的表面多平滑,有的也有毛茸、疣點(diǎn)、棱脊、皺紋及油點(diǎn)等。果皮的質(zhì)地可能為肉質(zhì)、革質(zhì)、膜質(zhì)或堅(jiān)硬木質(zhì)。在橫切面上應(yīng)注意果室的數(shù)目,室中種子數(shù)目及著生情況。2.顯微鑒定果實(shí)類生藥如果采用的是完整的果實(shí),則其內(nèi)部構(gòu)造分果皮及種子兩部分。果皮的構(gòu)造可分為外果皮、中果皮、內(nèi)果皮三部分:1.外果皮與葉的下表皮相當(dāng),通常為1列表皮細(xì)胞,外被角質(zhì)層;有的可見表皮毛,如吳茱萸、蔓荊子;有的在表皮細(xì)胞間嵌有油細(xì)胞,如五味子;有的含有色素,如花椒。2.中果皮與葉肉組織相當(dāng),由多層薄壁細(xì)胞組成,其中有細(xì)小維管束散在。有時(shí)可能有石細(xì)胞、油細(xì)胞、油室或油管等存在,如小茴香的中果皮內(nèi)可見油管;有的可見草酸鈣結(jié)晶分布,如山茱萸、豆蔻;在鑒定上具有重要意義。3.內(nèi)果皮與葉的上表皮相當(dāng),大多為1層薄壁細(xì)胞,也有部分為石細(xì)胞,如辣椒;或完全為石細(xì)胞,如胡椒、花椒。核果的內(nèi)果皮則由多層厚壁細(xì)胞組成。傘形科果實(shí)的內(nèi)果皮是由5~8個(gè)狹長(zhǎng)的薄壁細(xì)胞并列為一群,各群細(xì)胞以斜角連合,略似鑲嵌式地板,稱為鑲嵌細(xì)胞層,是傘形科果實(shí)的共同特征之一。如小茴香。種子的顯微觀察見種子類生藥。(九)種子類生藥種子類(Semen)生藥大多用完整的種子。也有用種子的一部分:有的用種皮,如綠豆衣;有的用假種皮,如龍眼肉;有的用除去種皮的種仁,如火麻仁、柏子仁;有用胚,如蓮子芯。尚有用種子的加工制品,如淡豆豉。種子類生藥應(yīng)注意觀察種子的形狀、大小、顏色及表面特征,如種臍、種脊、合點(diǎn)、珠孔位置和形狀,各種紋理、突起、毛茸、種阜的有無以及縱橫剖面等,剝?nèi)シN皮后,注意有無胚乳。一般無胚乳種子的內(nèi)胚乳僅為一層透明膜狀物,子葉發(fā)達(dá);有胚乳種子的內(nèi)胚乳有的富油質(zhì),有的角質(zhì)樣,子葉富油質(zhì)或粉性。其中特別要注意表面紋理、毛茸及形態(tài)學(xué)特征。種子類生藥種子類生藥的顯微鑒定特征主要在于種皮,因?yàn)榉N皮的構(gòu)造依植物種類而異,最富變化,因而可以檢出在鑒定上有意義的特征。胚乳發(fā)達(dá)的種子,其胚乳細(xì)胞的形狀和內(nèi)含物的種類也常作為鑒定的依據(jù),特別是對(duì)種仁類生藥,在鑒定上有極重要的意義。1.種皮是種子的外包被。種皮常由下列一種或數(shù)種組織組成。粘液細(xì)胞層如亞麻子、芥子、車前子等種皮的表皮常有層含粘液質(zhì)的細(xì)胞。厚壁細(xì)胞層多數(shù)種子的種皮有一層或數(shù)層厚壁細(xì)胞,形狀多種多樣,豆科植物種皮的表皮常為極厚的柵狀細(xì)胞,有時(shí)在中部偏外側(cè)部分可見光輝帶;茄科植物的種子,其表皮細(xì)胞的垂周壁及內(nèi)壁常強(qiáng)烈的增厚而形成杯狀的厚壁細(xì)胞層。馬錢子的表皮細(xì)胞呈石細(xì)胞狀,而且外壁延長(zhǎng)成毛茸。姜科植物的種子,如豆蔻、砂仁種子內(nèi)種皮為一列整齊排列的小形石細(xì)胞,內(nèi)側(cè)壁加厚而外側(cè)壁很薄,有的細(xì)胞內(nèi)含硅質(zhì)顆粒。色素層有顏色的種子的種皮的某一層可含有色素。如:砂仁、豆蔻。油細(xì)胞層含揮發(fā)油的種子,種皮中常有一層形狀較大的含油細(xì)胞,如砂仁、豆蔻。營(yíng)養(yǎng)層是由若干層薄壁細(xì)胞組成的。在種子發(fā)育初期,其中充滿淀粉,在發(fā)育過程中淀粉粒逐漸被消耗,薄壁細(xì)胞亦逐漸被壓縮,在橫切面上常不易觀察。2.胚乳通常是由含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的薄壁細(xì)胞組成,有時(shí)可見紋孔和胞間連絲,如馬錢子。有少數(shù)種子部分種皮和外胚乳或僅外胚乳嵌入內(nèi)胚乳形成特殊花紋的錯(cuò)入組織,形成檳榔紋。如檳榔、肉豆蔻。
3.胚是種子中未發(fā)育的幼體。子葉占胚的大部分,細(xì)胞中貯存有大量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);有胚乳種子子葉較菲薄,形狀較小。子葉的構(gòu)造與葉相似,但較簡(jiǎn)單,全由薄壁細(xì)胞組成,通常在上表皮的下方可見明顯的柵狀組織。4.種子中貯存的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)種子中貯存的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要是脂肪油、淀粉粒和蛋白質(zhì)。其中以蛋白質(zhì)的存在形式最為特殊,蛋白質(zhì)常成為具有特殊形狀的顆?!哿?。在植物器官中只有種子含糊粉粒,因此糊粉粒是確定種子類生藥的重要特征。糊粉粒的形狀、大小和構(gòu)造常因植物而異,因此在生藥鑒定中有重要意義。(十)全草類生藥
全草類生藥是指藥用的草木全植物體或地上部分。涉及的植物體器官,包括了根、根莖、莖、葉、花、果實(shí)與種子。其顯微鑒定可參照以上各類生藥的鑒別特征。(十一)菌類生藥大多以子實(shí)體或菌核入藥菌類生藥幾個(gè)概念:菌核真菌為了度過不良環(huán)境,菌絲體上的菌絲密結(jié)、特化所形成的菌絲休眠體。質(zhì)地堅(jiān)硬,在適宜的條件下,可萌發(fā)成菌絲體或子實(shí)體.如茯苓。子實(shí)體真菌的有性孢子,容納在1個(gè)菌絲組織結(jié)構(gòu)上的結(jié)構(gòu)類型。如靈芝、香菇。子座真菌的子座是容納子實(shí)體的褥座。子座形成后,往往隨即在上面產(chǎn)生子實(shí)體。
常見的菌類生藥有冬蟲夏草、麥角、茯苓、豬苓、靈芝、雷丸、馬勃、云芝、銀耳等。觀察時(shí)應(yīng)注意菌絲及結(jié)晶,應(yīng)無淀粉粒和高度植物的顯微特征出現(xiàn)。菌類生藥常含多糖類、氨基酸、生物堿、蛋白酶、甾醇和三萜類成分,其中多糖類成分比較普遍,而且多糖類成分大多數(shù)有增強(qiáng)免疫及抗腫瘤作用。
(十二)動(dòng)物類生藥1.全動(dòng)物類水蛭、地龍、全蝎、蜈蚣2.角骨類鹿茸、羚羊角、鱉甲、豹骨3.貝殼類牡蠣、石決明、蛤殼、珍珠母4.臟器類蛤士蟆油、熊膽、雞內(nèi)金、紫河車,鹿鞭、鹿胎5.生理、病理產(chǎn)物蟾酥、珍珠,牛黃、麝香、僵蠶、五靈脂6.加工品阿膠、鹿角膠1.性狀鑒定鑒定動(dòng)物類中藥,要具有動(dòng)物學(xué)的分類和解剖的基礎(chǔ)知識(shí)。對(duì)于藥材是完整的動(dòng)物體,可根據(jù)其形態(tài)特征,進(jìn)行動(dòng)物分類學(xué)鑒定,確定其品種,如蜈蚣、土鱉蟲、金錢白花蛇等;對(duì)于藥材是動(dòng)物體的某一部分,如羚羊角、龜甲、骨類(豹骨、猴骨等)和貝殼類(石決明、牡蠣等)藥材等,鑒定時(shí)主要靠性狀鑒定以辨別真?zhèn)蝺?yōu)劣,必要時(shí)進(jìn)行顯微磨片觀察:對(duì)去皮蛇類藥材可進(jìn)行脊椎骨或鱗片的形態(tài)和組織切片觀察。對(duì)有些采自動(dòng)物體的分泌物或生理、病理產(chǎn)物的藥材)如麝香、牛黃、蟾酥等,除一般性狀鑒定外,主要靠顯微和理化分析,以防偽充或摻假。鑒定牛黃除用傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別方法外,還要用顯微觀察或紅外光譜等來考察純度防止摻偽,同時(shí)要做主要成分膽酸、膽紅素的定性定量分析;對(duì)有的動(dòng)物產(chǎn)物,如蜂蠟、蟲白蠟等,還應(yīng)測(cè)定其熔點(diǎn)、熔解度或酸值、皂化值等以控制藥材的質(zhì)量。值得指出,動(dòng)物類藥材的主要成分不同于植物類藥材,含有大量的蛋白質(zhì)及其水解產(chǎn)物,許多都是動(dòng)物藥的主要有效成分?,F(xiàn)已有了大量報(bào)到,利用它們含蛋白質(zhì)、氨基酸的組成和性質(zhì)的不同,用聚丙烯酰胺凝蛋白電泳可成功的把動(dòng)物藥材與類似品、偽品區(qū)別開來。如阿膠的鑒別,不但可用上法進(jìn)行,采用蛋白質(zhì)等電點(diǎn)檢測(cè)法或蛋白質(zhì)運(yùn)動(dòng)粘度法進(jìn)行鑒別也均獲得成功。
(十三)礦物類生藥
礦物是由地質(zhì)作用而形成的天然單體或化合物。大多數(shù)礦物是固態(tài)的(如辰砂、石膏),少數(shù)是液態(tài)的(如水銀)和氣態(tài)的(如硫化氫)。除龍骨等少數(shù)化石類生藥外,一般無植(動(dòng))物性顯微特征。具有鑒定意義的特性有:結(jié)晶形狀、結(jié)晶習(xí)性、透明度、顏色、光澤、硬度、脆性、延展性和彈性、磁性、比重、解理、斷口及氣味。礦物粉末的顏色,在礦物學(xué)上稱為“條痕”,即礦物在白色毛磁板上劃過后所留下的顏色線條。條痕比礦物的表面顏色更為固定,因而具有鑒定意義。如赭石和磁石表面均為灰黑色,赭石條痕為櫻桃紅色,磁石條痕為黑色。礦物類生藥包括可供藥用的天然礦物、礦物加工品及動(dòng)物化石等,是以無機(jī)化合物為主要成分的一類重要藥物。
隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展,國(guó)內(nèi)外對(duì)礦物藥的鑒定已采用了許多新技術(shù)。如用X射線衍射法分析龍骨的成分;用X射線衍射、差熱分析和X射線熒光分析研究了滑石的成分;用固體熒光法和比色法測(cè)定龍骨中放射性元素鈾的含量等.能快速、準(zhǔn)確地定性和定量。三、中成藥顯微鑒別要點(diǎn)中藥丸散錠丹等成方制劑,大多直接用各種粉末生藥配制而成。只要掌握了各個(gè)組成生藥的粉末特征,就可應(yīng)用粉末鑒定的方法加以鑒定。以六味地黃丸為例:組成:熟地黃、山茱萸、牡丹皮、山藥、茯苓、澤瀉
特征:(1)山藥:淀粉粒較大者呈三角狀卵形或圓形,臍點(diǎn)短縫狀或人字狀,草酸鈣針晶束,存在于淡黃色粘液細(xì)胞中。(2)茯苓:無色不規(guī)則分枝狀團(tuán)塊,遇水合氯醛液溶化。菌絲無色或淡棕色。(3)熟地黃:暗棕色或黑棕色組織碎片易見,細(xì)胞皺縮,內(nèi)含一棕色核狀物。(4)山茱萸:果皮表皮細(xì)胞黃棕色,表面觀呈多角形,垂周壁略呈連珠狀增厚。(5)牡丹皮:草酸鈣簇晶直徑約至37cm,有時(shí)數(shù)個(gè)含晶細(xì)胞縱向連接,簇晶成行排列。(6)澤瀉:薄壁細(xì)胞形大,類圓形,具多數(shù)橢圓形紋孔,集成紋孔域。
注意:應(yīng)選取藥物專屬性強(qiáng)的顯微特征,排除類似的細(xì)胞組織或后含物等的干擾和影響。四、掃描電鏡等的應(yīng)用1.偏振光顯微鏡2.掃描電子顯微鏡第六節(jié)理化鑒定
生藥的理化鑒定是利用物理的或化學(xué)的分析方法,對(duì)生藥中所含主要成分或有效成分進(jìn)行定性和定量分析,來鑒定其真?zhèn)魏推焚|(zhì)優(yōu)劣的一種方法。定性分析—確定生藥的真實(shí)性定量分析—確定生藥的品質(zhì)優(yōu)良度一、一般理化鑒別1.物理常數(shù)相對(duì)密度旋光度折光率:凝點(diǎn)熔點(diǎn)
2.呈色反應(yīng):利用生藥的化學(xué)成分能與某些試劑產(chǎn)生特殊的顏色反應(yīng)來鑒別。3.沉淀反應(yīng):利用生藥某些化學(xué)成分能與某些試劑產(chǎn)生特殊的沉淀反應(yīng)來鑒別。4.泡沫反應(yīng)和溶血指數(shù):利用皂苷的水溶液振搖后能產(chǎn)生持久性的泡沫和溶解血液中紅細(xì)胞的性質(zhì),可測(cè)定皂苷類成分生藥的泡沫指數(shù)或溶血指數(shù)作為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。4.微量升華利用生藥中所含的某些化學(xué)成分在一定溫度下能升華的性質(zhì),獲得升華物,在顯微鏡下觀察其形狀、顏色以及化學(xué)反應(yīng)作為鑒別特征。大黃微量升華——針晶大黃微量升華——針狀向羽毛狀過渡羽毛狀結(jié)晶5.顯微化學(xué)反應(yīng):指細(xì)胞及其代謝產(chǎn)物與一定的化學(xué)試劑作用,所發(fā)生的顏色變化、沉淀產(chǎn)生、結(jié)晶生成、氣體逸出等一系列化學(xué)反應(yīng)現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)時(shí)將生藥的干粉、手切片或浸出液少量,置于載玻片上滴加某些化學(xué)試劑使產(chǎn)生沉淀或結(jié)晶,在顯微鏡下觀察反應(yīng)結(jié)果,或產(chǎn)生特殊的顏色,從而進(jìn)行鑒定。
黃連粉末
稀HCl
針簇狀鹽酸小檗堿結(jié)晶30%硝酸
針狀結(jié)晶。直立百部加氯化金試液
皮層有微黃色玫瑰花狀結(jié)晶(生物堿)。肉桂氯仿浸漬液
+2%鹽酸苯肼1d,可見黃色針狀或桿狀結(jié)晶(桂皮醛反應(yīng))。馬錢子胚乳薄片置白瓷板上,加1%釩酸銨的硫酸試液1d,迅速顯紫色(番木鱉堿),內(nèi)層色深;另取切片加發(fā)煙硝酸1滴,顯橙紅
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