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文檔簡介
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解普通植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室和工廠育苗植物組織培養(yǎng)室的差別;2.掌握植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的組成及各分室的功能;3.學(xué)會(huì)分析各種類型植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn);4.學(xué)會(huì)常見植物組織培養(yǎng)設(shè)備的使用方法。二、試驗(yàn)原理1.物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室是完成植物組織培養(yǎng)的重要場所,植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)合理與否植影響著植物組織培養(yǎng)的成敗。2.植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室有:準(zhǔn)備室、接種室、培養(yǎng)室、溫室。①準(zhǔn)備室:在準(zhǔn)備室主要進(jìn)行一些常規(guī)實(shí)驗(yàn)操作,如各種藥品的儲(chǔ)備,稱量,器皿洗滌,培養(yǎng)基配制,培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿的滅菌,培養(yǎng)材料的預(yù)處理等。為了方便管理還可以將準(zhǔn)備室進(jìn)行適當(dāng)?shù)姆謪^(qū),如劃分為藥瓶儲(chǔ)藏室,洗滌室,培養(yǎng)基配制室及滅菌室等。1藥品儲(chǔ)藏室主要用于存放各種化學(xué)藥品,要求室內(nèi)干燥、通風(fēng)、避光、應(yīng)配制、備藥品柜、冰箱等。各類化學(xué)試劑應(yīng)按要求分類存放,需要低溫保存的藥劑應(yīng)置于冰箱內(nèi)保存,有毒藥品應(yīng)按規(guī)定存放和管理。⑵
洗滌室
用于玻璃器皿、用具及實(shí)驗(yàn)用具的洗滌、干燥和存放;;培養(yǎng)材料的預(yù)處理與清洗
:組培苗的出瓶、清洗與整理等。要求有電源、自來水和水槽,上下水道暢通,排水良好,地面耐濕、防滑,便于清潔。應(yīng)配備工作臺(tái)、烘箱、曬瓶架、周轉(zhuǎn)筐、毛刷等。(3)培養(yǎng)基配制室用于培養(yǎng)基的配制,還可以分為稱重分室和配制分室。藥品稱量需配制各種規(guī)格的天平,包括普通天平和分析天平。培養(yǎng)基配制需要配備工作臺(tái)、蒸餾水器、電爐(電飯鍋或微波爐)、水浴鍋、磁力攪拌器、過濾裝置、酸度計(jì)、分注器、各種試管、三角瓶、燒杯、量筒、吸管、移液管及移液管架以及貯藏母液的冰箱、移動(dòng)式載物臺(tái)(醫(yī)用小推車)、周轉(zhuǎn)筐等。(4)滅菌室用于培養(yǎng)基、器皿、用具、及其它物品的滅菌。滅菌室根據(jù)工作量的大小決定其面積的大小,一般控制在30~50㎡。要求、通風(fēng)、明亮,墻壁和地面應(yīng)防潮、耐高溫。應(yīng)配置高壓電源和排水設(shè)施、高壓蒸汽滅菌裝置、干熱消毒柜或烘箱、細(xì)菌過濾裝置及移動(dòng)式載物臺(tái)、周轉(zhuǎn)筐等。準(zhǔn)備室也可設(shè)計(jì)成大的通間,使試驗(yàn)操作的各個(gè)環(huán)節(jié)在同一房間按程序完成,以便于程序化操作與管理,從而提高工作效率。此外還便于培養(yǎng)基的配制、分裝和滅菌的自動(dòng)化操作程序設(shè)計(jì),從而減少規(guī)?;a(chǎn)的人工勞動(dòng),更便于無菌操作體系的建立。②無菌操作室(接種室)
無菌操作室也叫接種室,主要用于植物材料的消毒、接種、培養(yǎng)物的繼代轉(zhuǎn)接等無菌操作。由于植物組織培養(yǎng)時(shí)間較長,尤其需要防止細(xì)菌、真菌污染。因此,接種室內(nèi)無菌條件控制的好壞直接影響培養(yǎng)物的污染率及接種工作效率等重要指標(biāo)。接種室面積根據(jù)需要和環(huán)境控制的難易程度而定,在工作方面的前提下易小不宜大。室內(nèi)地面、墻面、天花板應(yīng)采用防水或耐腐蝕材料,符合無塵積累要求,易于清潔和消毒;門窗要求密閉性好,一般用滑動(dòng)門窗,不能安裝風(fēng)扇,通風(fēng)換氣需通過空氣調(diào)節(jié)裝置進(jìn)行。無菌室內(nèi)安裝紫外燈,每周照射1~2h,每次使用前照射10~30min;定期用甲醛和高錳酸鉀(或用臭氧發(fā)生器)熏蒸消毒。接種室內(nèi)應(yīng)配備超凈工作臺(tái)、滅菌器或酒精燈、酒精瓶及酒精棉球、接種工具、器械支架及移動(dòng)式載物臺(tái)。接種室外還應(yīng)設(shè)置預(yù)備室作為緩沖間,一方面可供操作人員更換工作服、工作帽、拖鞋及器皿準(zhǔn)備、培養(yǎng)材料處理等,另一方面可減少工作人員將外界塵埃、雜菌等污染物直接帶入接種室內(nèi)。緩沖間與接種室之間最好安裝塑鋼玻璃及滑動(dòng)門,以便于觀察;而且緩沖間與接種室的門應(yīng)該錯(cuò)開,也不得同時(shí)開啟,以防止在工作人員進(jìn)出時(shí)空氣對(duì)流帶入雜菌。緩沖間內(nèi)應(yīng)配備鞋架和衣帽掛鉤,并備有清潔的工作服、工作帽、口罩及拖鞋;墻頂應(yīng)安裝1~2盞紫外燈,定時(shí)照射殺菌。③培養(yǎng)室:用于對(duì)接種到培養(yǎng)瓶等器皿中的植物離體材料進(jìn)行控制條件下的培養(yǎng)。培養(yǎng)室內(nèi)放置培養(yǎng)架,方便操作,.并充分利用空間。培養(yǎng)室的大小可根據(jù)生產(chǎn)規(guī)模和培養(yǎng)架的大小、數(shù)目及其他附屬設(shè)備而定,其設(shè)計(jì)以充分利用空間和節(jié)省能源為原則??刹扇《嗍以O(shè)計(jì)方式,每個(gè)培養(yǎng)是面積不宜過大,約10~20㎡,以滿足不同培養(yǎng)材料對(duì)環(huán)境條件控制的不同要求,也便于對(duì)同室內(nèi)環(huán)境條件的均勻控制。室內(nèi)天花板和內(nèi)墻最好用塑鋼板或瓷磚裝修,地面鋪設(shè)水模式或瓷磚,以保持室內(nèi)明亮、平整,并方便清潔和消毒;室內(nèi)還要安裝紫外燈,定時(shí)進(jìn)行殺菌處理。培養(yǎng)室內(nèi)需要安裝空調(diào),以控制室內(nèi)溫度,一般要求保持在20~27℃之間,低于15℃或高于35℃對(duì)植物的生長不利。培養(yǎng)室的光源一般使用白色日光燈,光周期可采用自動(dòng)定時(shí)器來控制,光照強(qiáng)度一般控制為1000~6000lx,每天光照時(shí)間薇10~16h。需要大量的暗培養(yǎng)時(shí)可以增設(shè)暗培養(yǎng)室,或使用暗箱培養(yǎng)。培養(yǎng)室內(nèi)的相對(duì)濕度保持在70%~80%為宜。濕度過高,容易使培養(yǎng)及污染;濕度過低,容易使培養(yǎng)基失水變硬,影響培養(yǎng)物生長。在梅雨季節(jié)可使用除濕機(jī)人工除濕,干燥季節(jié)可利用加濕器來增加濕度,也可采取防治水盆的方法來調(diào)節(jié)濕度。④溫室組培試管苗在進(jìn)入大田栽培之前,必須經(jīng)過一段時(shí)間的煉苗,即馴化移栽過程,使其逐漸適應(yīng)自然條件。北方(長江以北)通常建造日光溫室,而南方通常建造連棟溫室大棚進(jìn)行試管苗得分馴化移栽。⑴日光溫室:日光溫室又稱為鋼拱式日光溫室、節(jié)能溫室,主要利用太陽能做熱源提供室內(nèi)溫度。這種溫室跨度為5~7米,中高2.4~3.0米,后墻用磚砌成,厚50~80厘米,高1.6~2.0米。鋼筋骨架,拱架為單片桁架,上弦為∮14~∮16,的圓鋼,下弦為∮12~∮14∮,的圓鋼,中間用∮8~∮10的鋼筋做拉花,寬15~20厘米,拱架上端搭在中柱上,下端固定在前端預(yù)埋水泥基礎(chǔ)上。拱架間用三道單片桁架花梁橫向拉接,以使整個(gè)骨架成為一體。溫室后屋面可鋪泡沫塑料板和水泥板,抹草泥封蓋防寒,后墻沒隔4~5米設(shè)通風(fēng)口。此種溫室堅(jiān)固耐用,采光和通風(fēng)性好,操作方便,適于北方地區(qū)使用,能充分利用太陽能,降低生產(chǎn)成本。⑵智能連棟式溫室:智能連棟式溫室有屋脊形連棟溫室和拱圓形連棟溫室等類型,是由相等的雙屋面借縱向側(cè)柱相互連通,可以連續(xù)搭接,形成室內(nèi)串通的大型溫室。此類溫室又被
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