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細(xì)菌的生理PhysiologyofBacteria
細(xì)菌的生理:主要研究細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)、代謝、生長(zhǎng)繁殖等生理活動(dòng)及其規(guī)律。第一節(jié)、細(xì)菌的理化性狀
第二節(jié)、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)與生長(zhǎng)繁殖
第三節(jié)、細(xì)菌的新陳代謝
第四節(jié)、細(xì)菌的人工培養(yǎng)第五節(jié)、細(xì)菌的分類
細(xì)菌的生理第一節(jié)、細(xì)菌的理化性質(zhì)一、化學(xué)組成1水
75-90%細(xì)胞重2有機(jī)物蛋白質(zhì)、脂類、糖類、核酸等
3無機(jī)離子K、Na、Fe、Mg、Ca、Cl等4
特有成分肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、D型氨基酸、二氨基庚二酸(DAP)、吡啶二羧酸二、物理性狀1光學(xué)性質(zhì)半透明體液體:混濁度與細(xì)菌數(shù)成正比2表面積直徑1μm葡萄球菌1cm3表面積60000cm2意義:物質(zhì)交換3半透性物質(zhì)交換意義:染色、凝集反應(yīng)、抑菌、殺菌4帶電現(xiàn)象固體成分50-80%為蛋白質(zhì)G+菌等電點(diǎn)為pH2-3;G-菌等電點(diǎn)為pH4-5近中性或弱堿性環(huán)境中,細(xì)菌均帶負(fù)電荷,G+菌帶得更多5滲透壓高滲,G+菌大于G-菌意義:高鹽高糖保存食物第一節(jié)、細(xì)菌的理化性狀
第二節(jié)、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)與生長(zhǎng)繁殖
第三節(jié)、細(xì)菌的新陳代謝
第四節(jié)、細(xì)菌的人工培養(yǎng)第五節(jié)、細(xì)菌的分類
細(xì)菌的生理一、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
水
碳源
氮源
無機(jī)鹽
生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)必需但自身不能合成的物質(zhì)自養(yǎng)菌(autotroph)
異養(yǎng)菌(heterotroph)二、細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)類型
自養(yǎng)菌(autotroph)
以無機(jī)物或光合作用合成菌體成分
異養(yǎng)菌(heterotroph)
以有機(jī)物為原料合成菌體成分化能自養(yǎng)菌、光能自養(yǎng)菌所有病原菌都是異養(yǎng)菌,大部分病原菌屬寄生菌腐生菌、寄生菌三、細(xì)菌攝取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的機(jī)制被動(dòng)擴(kuò)散主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)
1.依賴于周漿間隙結(jié)合蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)
2.化學(xué)滲透驅(qū)使轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)
3.基團(tuán)轉(zhuǎn)移4.特異性轉(zhuǎn)運(yùn)二、影響細(xì)菌生長(zhǎng)的因素1營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)2PH(與酶活性相關(guān))病原菌:一般最適pH為7.2-7.6嗜堿菌:霍亂弧菌pH8.4-9.2嗜酸菌:結(jié)核分枝桿菌pH6.5-6.8多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)的pH范圍在6.0~8.03溫度(1)嗜冷菌:-5-30℃最適溫度:10~20℃(2)嗜溫菌:10-45℃最適溫度:20~40℃(3)嗜熱菌:25-95℃最適溫度:50~60℃(病原菌最適宜:37℃)專性需氧菌(obligateaerobe)
微需氧菌(microaerophilicbacterium)兼性厭氧菌(faculatativeanaerobe)
專性厭氧菌(obligateanaerobe)(1)O2
(2)CO2
4.氣體(aeration)破傷風(fēng)梭菌專性厭氧菌在有氧條件下死亡的原因
2O2-+2HH2O2+O22H2O22H2O+O2H2O2+AH22H2O+ASOD觸酶過氧化物酶H2O2+O2O2+OH-+OH·Fe3+/Fe2+5.滲透壓
一般培養(yǎng)基滲透壓適于大多數(shù)細(xì)菌。(一)細(xì)菌個(gè)體的生長(zhǎng)繁殖方式:二分裂無性繁殖五、細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖速度:細(xì)菌分裂數(shù)量倍增所需的時(shí)間稱為代時(shí)(generationtime)。大多數(shù)細(xì)菌20~30min繁殖一代。(二)、細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖(1)遲緩期1-4h(2)對(duì)數(shù)期8-18h(3)穩(wěn)定期(4)衰亡期
生長(zhǎng)曲線5102550不同生長(zhǎng)期的意義
遲緩期對(duì)數(shù)期穩(wěn)定期衰亡期
lagphaselogstationarydecline
適應(yīng)階段快速生長(zhǎng)速度減慢死亡增加
形態(tài)染色
產(chǎn)芽胞、抗形態(tài)顯著生理活性生素、外毒素改變
典型怎樣使細(xì)菌長(zhǎng)期保持對(duì)數(shù)生長(zhǎng)狀態(tài),即連續(xù)培養(yǎng)(continuouscultureofmicroorganism)?
連續(xù)培養(yǎng)裝置
在培養(yǎng)物中不斷加入新鮮營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),同時(shí)移去其中的大量代謝產(chǎn)物,使細(xì)菌長(zhǎng)期保持對(duì)數(shù)生長(zhǎng)狀態(tài)。第一節(jié)、細(xì)菌的理化性狀
第二節(jié)、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)與生長(zhǎng)繁殖
第三節(jié)、細(xì)菌的新陳代謝
第四節(jié)、細(xì)菌的人工培養(yǎng)第五節(jié)、細(xì)菌的分類
細(xì)菌的生理細(xì)菌新陳代謝包括分解代謝與合成代謝營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)分解和轉(zhuǎn)化為能量的過程:分解代謝所產(chǎn)生的能量用于細(xì)胞組分的合成:合成代謝一、細(xì)菌的能量代謝1發(fā)酵(1)概念以有機(jī)物為受氫體的代謝過程(2)分類a)EMP途徑b)磷酸戍糖途徑2需氧呼吸以分子氧為受氫體的代謝過程3厭氧呼吸以其他無機(jī)物為受氫體的代謝過程利用不同種類的細(xì)菌在物質(zhì)分解過程中生成不同產(chǎn)物的特點(diǎn)(具有不同或不完全相同的酶),以鑒別或區(qū)別不同的細(xì)菌而設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)稱細(xì)菌的生化反應(yīng)或生化試驗(yàn)(chemicaltestforbacteria)。生化試驗(yàn)大多利用化學(xué)指示劑以利觀察。一、分解代謝產(chǎn)物及生化反應(yīng)對(duì)糖的發(fā)酵甲基紅試驗(yàn)單糖發(fā)酵試驗(yàn)VP試驗(yàn)對(duì)蛋白質(zhì)的分解吲哚試驗(yàn)硫化氫試驗(yàn)其它試驗(yàn)枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)?zāi)蛩孛冈囼?yàn)臨床常用的生化反應(yīng)(1)單糖發(fā)酵試驗(yàn)試劑:含不同單糖的蛋白胨水培養(yǎng)基指示劑-溴甲酚紫內(nèi)置一小倒管(觀察有無氣體產(chǎn)生)
A:不發(fā)酵-結(jié)果判斷B:發(fā)酵、產(chǎn)酸+C:發(fā)酵、產(chǎn)酸產(chǎn)氣+原理:葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇→二乙?!t色化合物
(2)VP(Voges-Proskauer)試驗(yàn)試劑:葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基
A:35℃4h后仍如故者即為陰性-結(jié)果判斷B:紅色+胍基化合物原理:葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇
葡萄糖→丙酮酸PH<4.5
-+(3)甲基紅(methylred)實(shí)驗(yàn)試劑:葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基指示劑-甲基紅試劑
A:橘黃色為陰性
-結(jié)果判斷B:紅色為弱陽性
C:紅色++PH>6.2原理:利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源,分解枸櫞酸鹽,使培養(yǎng)基變堿性。
A:不變色-結(jié)果判斷B:深藍(lán)色+(4)枸櫞酸鹽利用(citrateutilization)試驗(yàn)
試劑:枸櫞酸鹽培養(yǎng)基指示劑:溴麝香草酚蘭指示劑原理:色氨酸吲哚玫瑰吲哚
吲哚試劑(5)I-吲哚(indol)試驗(yàn)試劑:葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基指示劑:二甲基氨基苯甲醛
A:不變色-結(jié)果判斷B:玫瑰紅+I(xiàn)MViC試驗(yàn)I-吲哚(indol)試驗(yàn)M-甲基紅(methylred)試驗(yàn)V-VP(Voges-Proskauer)試驗(yàn)C-枸櫞酸鹽利用(citrateutilization)試驗(yàn)
IMViC試驗(yàn)大腸埃希菌++--
產(chǎn)氣桿菌--++
如:
大腸桿菌能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,傷寒沙門菌、痢疾桿菌等腸道致病菌不能分解乳糖,借此可區(qū)分腸道致病菌與非致病菌。
又如:試劑:含有胱氨酸及醋酸鉛(或硫酸亞鐵)的培養(yǎng)基原理:凡能分解含S氨基酸細(xì)菌,可產(chǎn)生H2S,與鉛/鐵離子結(jié)合后產(chǎn)生黑色沉淀結(jié)果判斷:
A:無黑色沉淀-B:有黑色沉淀+(6)硫化氫(H2S)試驗(yàn)(7)尿素酶試驗(yàn)?zāi)蛩孛冈囼?yàn)(+)紅色尿素變形桿菌氨(尿素酶)(酚紅做指示劑)二、合成代謝產(chǎn)物及其在醫(yī)學(xué)上的意義(1)熱原質(zhì)(pyrogen)/致熱原概念:熱原質(zhì)是細(xì)菌合成的、可引起人/動(dòng)物發(fā)生發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。多數(shù)G-菌LPS(2)毒素與侵襲性酶(toxinandinvasiveenzymes)a)毒素內(nèi)毒素外毒素G-菌LPS,菌體死亡游離出來。多數(shù)G+菌,少數(shù)G-菌分泌產(chǎn)生的蛋白質(zhì)。b)侵襲性酶透明質(zhì)酸酶、鏈激酶、鏈道酶等(3)色素(pigment)a)水溶性色素b)脂溶性色素銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌(4)抗生素(antibiotics)概念:大多由真菌和放線菌產(chǎn)生能抑制或殺死其他微生物或腫瘤細(xì)胞的物質(zhì)(5)細(xì)菌素(bacteriocins)概念:對(duì)有親緣關(guān)系的細(xì)菌有殺傷作用(6)維生素(vitamin)大腸埃希菌:VitB、VitK毒素和侵襲性酶熱原質(zhì)色素—細(xì)菌的鑒別細(xì)菌素—細(xì)菌分型、流行病學(xué)調(diào)查抗生素維生素致病性治療第一節(jié)、細(xì)菌的理化性狀
第二節(jié)、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)與生長(zhǎng)繁殖
第三節(jié)、細(xì)菌的新陳代謝
第四節(jié)、細(xì)菌的人工培養(yǎng)第五節(jié)、細(xì)菌的分類
細(xì)菌的生理一、培養(yǎng)細(xì)菌的方法分離培養(yǎng):純培養(yǎng):挑單菌落,移種到另一培養(yǎng)基中,可生長(zhǎng)出來大量的純種細(xì)菌。將標(biāo)本或培養(yǎng)物劃線接種在固體培養(yǎng)基的表面,因劃線的分散作用,使許多原混雜的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基表面上散開。
二、培養(yǎng)基用人工方法配制而成的,專供微生物生長(zhǎng)繁殖使用的混合營(yíng)養(yǎng)物制品常用培養(yǎng)基種類厭氧培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基增菌培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基增菌動(dòng)力檢測(cè),保種分離培養(yǎng),純化半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基細(xì)菌的生長(zhǎng)情況固體培養(yǎng)基中菌落(S型)菌苔菌落(R型)菌落:?jiǎn)蝹€(gè)細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)。菌苔:菌落在固體培養(yǎng)基上連成一片。液體培養(yǎng)基中沉淀生長(zhǎng)混濁生長(zhǎng)表面生長(zhǎng)有動(dòng)力有鞭毛細(xì)菌
半固體培養(yǎng)基中無動(dòng)力沿穿刺線生長(zhǎng),周圍透明擴(kuò)散生長(zhǎng),周圍渾濁無鞭毛細(xì)菌三、人工培養(yǎng)細(xì)菌的用途在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用在基因工程中的應(yīng)用1.感染性疾病的病原學(xué)診斷
2.細(xì)菌學(xué)的研究3.生物制品的制備第一節(jié)、細(xì)菌的理化性狀
第二節(jié)、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)與生長(zhǎng)繁殖
第三節(jié)、細(xì)菌的新陳代謝
第四節(jié)、細(xì)菌的人工培養(yǎng)第五節(jié)、細(xì)菌的分類
細(xì)菌的生理細(xì)菌的分類
細(xì)菌的分類層次界、門、綱、目、科、屬、種
種(species)是細(xì)菌分類的基本單位。生物學(xué)性狀基本相同的細(xì)菌群體構(gòu)成一個(gè)菌種;性狀相近關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬(genus)同一菌種的各個(gè)細(xì)菌,雖性狀基本相同,但在某些方面仍有一定差異,差異較明顯的稱亞種(subspecies,subsp.),差異小的則為型(type)。血清型(serotype)噬菌體型(phage-t
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