香菇多糖的高壓提取工藝研究

香菇多糖的高壓提取工藝研究

香乍得含有各種藥物成分。香提取糖是一種重要的生物反應活性劑。通過刺激免疫細胞的成熟、分化和復制，它可以改善主要身體的平衡。由于它是間接效應，毒副作用小。因此,建立高效的香菇多糖提取方法具有重要的意義。本研究探討了高壓熱水浸提法從香菇中提取活性多糖的最佳工藝條件,以期為開發(fā)利用香菇資源提供依據(jù)。1材料和機器1.1材料表面香菇購于黑龍江省綏化市華辰超市。苯酚、3,5-二硝基水楊酸(DNS)、無水乙醇、三氯乙酸、濃硫酸等試劑均為國產(chǎn)分析純。1.2儀器、設備和試鍋752型紫外可見分光光度計(上海市菁華科技儀器有限公司)、FW100型高速萬能粉碎機(天津市泰斯特儀器有限公司)、DK-98-ⅡA型電熱恒溫水浴鍋(天津市泰斯特儀器有限公司)、YXQ-LS-100SⅢ型立式壓力蒸汽滅菌鍋(上海市博訊實業(yè)有限公司)。1.3總糖含量的測定香菇經(jīng)除雜、干燥、粉碎等預處理后,得到香菇子實體干粉。稱取香菇粉若干份,每份1g。每份香菇粉進行高壓熱水浸提,提取后進行離心,上清液用70℃水浴濃縮到原體積的1/2,按1∶3(體積比)添加15%三氯乙酸溶液后靜置12h,3500r/min離心10min,將上清液適當濃縮后與95%乙醇按1∶3(體積比)混合,4℃下醇沉12h,3500r/min離心10min,所得沉淀用無水乙醇洗滌2~3次,最后用60℃蒸餾水溶解沉淀并定容。以葡萄糖為標準樣,用DNS法測定還原糖含量,用苯酚-硫酸法測定總糖含量。多糖提取率計算方法見公式(1)。1.4在高壓下加熱和提取蘑菇葡萄糖的最佳工藝條件中1.4.1高壓熱水浸提液液比的確定稱取香菇粉5份,將每份香菇粉分別按料液比1∶30、1∶40、1∶50、1∶60、1∶70加蒸餾水,115℃下高壓熱水浸提80min。后續(xù)處理方法同“1.3”。將每份香菇粉按最佳料液比加蒸餾水,分別于115℃下高壓熱水浸提40、60、80、100、120min。后續(xù)處理方法同“1.3”。將每份香菇粉按最佳料液比加蒸餾水,分別于75、90、108、115、121℃下高壓熱水浸提80min。后續(xù)處理方法同“1.3”。1.5不同方法對蘑菇糖進行比較研究分別采用熱水浸提法、超聲波輔助熱水浸提法、復合酶法、高壓熱水浸提法提取香菇多糖。2結(jié)果與分析2.1確定測量方法和試驗參數(shù)2.1.1根據(jù)苯硫酸法測定總糖含量的標準曲線2.1.2dns法測定了還原糖含量的標準曲線2.2在高壓下加熱水中提取蘑菇葡萄糖由表1可知,香菇多糖提取的最佳料液比為1g∶50mL,此時香菇多糖提取率為7.76%。2.2.2高壓熱水浸法提取香菇多糖最佳工藝條件的確定將每份香菇粉按最佳料液比1g∶50mL加蒸餾水,分別于75、90、108、115、121℃下高壓熱水浸提80min。由表3可知,香菇多糖提取的最佳高壓熱水浸提溫度為115℃,此時香菇多糖提取率為7.76%。在單因素試驗基礎上選擇對香菇多糖提取率影響較大的因素進行正交試驗,以確定高壓熱水浸提法提取香菇多糖的最佳工藝條件。試驗因素水平見表4,正交試驗結(jié)果見表5。由表5可知,各因素對香菇多糖提取率的影響由大到小依次為料液比、高壓熱水浸提時間、高壓熱水浸提溫度。香菇多糖最優(yōu)提取條件為A3B1C3,此時香菇多糖提取率為7.83%。2.3不同方法對蘑菇糖進行比較研究用不同方法提取香菇多糖,測定多糖提取率。由圖3可知,高壓熱水浸提法所獲得的香菇多糖提取率最高。3不同工藝條件對香菇多糖提取率的影響本研究采用單因素試驗及正交試驗探討了提取香菇多糖的最適工藝條件,結(jié)果表明,高壓熱水浸提香菇多糖的最佳工藝條件為:料液比為1g∶60mL,高壓浸提溫度為108℃,高壓浸提時間為100min。在此條件下,香菇多糖的提取率為7.83%。與傳統(tǒng)的提取方法相比,高壓熱水浸提法明顯提高了香菇多糖提取率。高壓提取可將被提取物的組織細胞及亞細胞結(jié)構(gòu)解體,使細胞內(nèi)的化學成分與溶媒充分接觸。1.4.1.1.溶液比對蘑菇糖提取率的影響1.4.1.2.2高壓熱提取物時間對蘑菇糖提取率的影響1.4.1.3.3在堿性和高濕的浸泡條件下，對蘑菇糖提取率的影響苯酚硫酸法測定總糖標準曲線見圖1。DNS法測定還原糖含量標準曲線見圖2。2.2.1高壓熱水浸提液將每份香菇粉按最佳料液比1g∶50mL加蒸餾水,分別于115℃下高壓熱水浸提40、60、