高效氟氯氰菊酯的分離、純化和高效液相色譜-串聯質譜法測定

高效氟氯氰菊酯的分離、純化和高效液相色譜-串聯質譜法測定

1hplc分析方法有效氟氰化鉀（59）是由四種異構體組成的混合化合物，約為1.36。261。它們是：順式Ⅰ∶1R,3R，αR+1S,3S，αS；順式Ⅱ∶1R,3R，αS+1S,3S，αR；反式Ⅰ∶1R,3S，αR+1S,3R，αS；反式Ⅱ∶1R,3S，αS+1S,3R，αR。CAPIC給出的HPLC分析方法使用的流動相特-丁基甲醚和四氫呋喃較為少見；國內定量分析研究的報道很少，而一般的氣相色譜法不能將4個非對映異構體分離。作者最近研究了一種分離氟氯氰菊酯4個非對映異構體的HPLC方法，準確度和精密度都能滿足高效氟氯氰菊酯定量分析的要求。2實驗部分2.1高效氟氯氰菊酯KLC321型高效液相色譜儀（中國科學院上海原子核所科學儀器廠），HP3392A積分儀（美國HP公司）。高效氟氯氰菊酯標準品99.0%，高效氟氯氰菊酯原藥97%（均為本所分離提純），2.5%高效氟氯氰菊酯乳油（自制）。正己烷、乙腈、三氯甲烷（分析純）。2.2氟氯氰菊酯柱溫色譜柱250mm×4.6mm不銹鋼柱，內填Kromasil-Si，粒徑5μm（南開大學生命科學院）；檢測波長254nm；柱溫：室溫；流動相：正己烷+乙腈+乙酸乙酯=98.95+0.8+0.25(V/V/V）；流速：2.0mL/min；量程：0.04AUFS；進樣量：20μL。在上述色譜條件下，氟氯氰菊酯低效順式Ⅰ保留時間約為11.1min，高效順式Ⅱ保留時間約為12.8min，低效反式Ⅰ保留時間約為13.8min，高效反式Ⅱ保留時間約為15.3min。色譜圖（圖1）。3測量步驟3.1正己烷溶液配制稱取高效氟氯氰菊酯標樣0.25g（精確至0.0002g），置于25mL容量瓶中，用4mL三氯甲烷振動溶解后，再用正己烷稀釋至刻度，此溶液濃度為10mg/mL。從上述溶液中分別吸取0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mL溶液于5個5mL容量瓶中，用正己烷稀釋到刻度，搖勻備用。最終高效氟氯氰菊酯系列標準溶液：1.0、2、4、6、8、10mg/mL。3.2氯甲烷溶液稱取高效氟氯氰菊酯標樣0.06g（精確至0.0002g），置于10mL容量瓶中，用1mL三氯甲烷振蕩溶解，加正己烷稀釋至刻度，搖勻備用。3.3高效氟氯氰菊酯乳油的制備稱取含有0.06g高效氟氯氰菊酯原藥或2.5%高效氟氯氰菊酯乳油（精確至0.0002g），于10mL容量瓶中，用1mL三氯甲烷振蕩溶解，加正己烷稀釋至刻度，搖勻做樣品溶液備用。3.4測量按上述色譜條件，連進數針標樣溶液，待相鄰2針的相對響應值變化<1.5%時，按照標樣溶液、樣品溶液、樣品溶液、標樣溶液的順序進樣測定。3.5氟氯氰菊酯含量計算將測得的2針試樣溶液以及其前后2針標樣溶液中氟氯氰菊酯峰面積和分別進行平均。以質量分數表示氟氯氰菊酯的含量W（%）按式（1）計算：式中：Ai—試樣溶液中氟氯氰菊酯（高效順式Ⅱ+高效反式Ⅱ）峰面積的平均值;As—標樣溶液中氟氯氰菊酯峰面積（高效順式Ⅱ+高效反式Ⅱ）的平均值;mi—試樣的質量，單位為g。4結果分析4.1氟氯氰菊酯進樣質量的影響表1為高效氟氯氰菊酯不同進樣質量和峰面積的數據，以氟氯氰菊酯高效順式和高效反式峰面積之和為縱坐標，以進樣質量為橫座標，求出直線回歸式：y=0.0272+0.0105x，相關系數（r）為0.9999，說明當氟氯氰菊酯進樣質量在20.0～200μg時，與峰面積呈較好的線性（圖2）。當高效氟氯氰菊酯定量分析時，進樣質量應在上述范圍內選取。4.2分析的準確度結果統(tǒng)計量通過標準加入量法，測定的平均回收率為100.37%，回收率的范圍為99.88%～100.73%，說明分析的方法準確度能滿足分析的需要。4.3分析方法的精密度通過對高效氟氯氰菊酯原藥和2.5%高效氟氯氰菊酯乳油同一樣品的各自的4次稱樣分析，高效氟氯氰菊酯分析的精密度較好，原藥分析的變異系數為1.13%，乳油分析的變異系數為1.58%，說明本分析方法的精密度能滿足定量分析的要求。5氟氯氰菊酯溶劑5.1氟氯氰菊酯的立體異構體的分離報道很少，本文流動相中加少量乙酸乙酯對基線有穩(wěn)定作用。高效氟氯氰菊酯在正己烷中溶解度較小（1～2g/L），可加少量氯仿或二氯甲烷加速溶解，但應該注意的是不要全部使用三氯甲烷做溶劑，否則會使異構體分離度降低。5.2氟氯氰菊酯和氯氰菊酯化學結構非常相似，只是在氯氰菊酯苯基的4位上增加1個氟原子，所以作者開始試用氯氰菊酯的分析方法來分析氟氯氰菊酯。但結果表明，氟氯氰菊酯的4個非對映異構體不能達到完全分離，同樣本方法也不能用于分析氯氰菊