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選修3第十一單元現(xiàn)代生物科技專題1精品課件第40講基因工程2精品課件3精品課件4精品課件目的基因體外5精品課件分子基因重組受體遠(yuǎn)緣雜交不親和遺傳性狀6精品課件原核核苷酸序列磷酸二酯鍵黏性末端拼接成DNA分子7精品課件常用類型E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶來源________T4噬菌體功能只縫合________縫合________________結(jié)果恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的___________大腸桿菌黏性末端黏性末端和平末端磷酸二酯鍵8精品課件質(zhì)粒限制酶切割位點(diǎn)標(biāo)記基因9精品課件名稱作用部位作用底物形成產(chǎn)物限制酶磷酸二酯鍵DNA分子帶黏性末端或平末端的DNA片段DNA連接酶磷酸二酯鍵DNA分子重組DNA分子DNA聚合酶磷酸二酯鍵脫氧核苷酸子代DNA分子10精品課件熱穩(wěn)定DNA聚合酶磷酸二酯鍵脫氧核苷酸子代DNA分子DNA(水解)酶磷酸二酯鍵DNA分子游離的脫氧核苷酸解旋酶堿基對(duì)間的氫鍵DNA分子脫氧核苷酸長(zhǎng)鏈RNA聚合酶磷酸二酯鍵核糖核苷酸單鏈RNA分子11精品課件編碼蛋白質(zhì)的基因基因文庫(kù)PCR技術(shù)化學(xué)12精品課件受體細(xì)胞表達(dá)13精品課件啟動(dòng)子標(biāo)記基因目的基因14精品課件15精品課件生物種類植物動(dòng)物微生物常用方法____________________________________受體細(xì)胞體細(xì)胞受精卵________細(xì)胞或酵母菌轉(zhuǎn)化過程將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上→轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→整合到受體細(xì)胞的____________上→表達(dá)將含有目的基因的表達(dá)載體提純→取卵(受精卵)→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動(dòng)物________處理細(xì)胞→感受態(tài)細(xì)胞→重組表達(dá)載體DNA分子與感受態(tài)細(xì)胞混合→感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法Ca2+處理法原核染色體DNACa2+
16精品課件DNA分子抗原—抗體分子17精品課件DNA雙鏈復(fù)制DNA母鏈Taq酶單鏈相應(yīng)序列脫氧核苷酸18精品課件90℃~95解旋55℃~60引物70℃~75Taq酶19精品課件不相同。DNA連接酶連接的是兩個(gè)DNA片段,而DNA聚合酶連接的是單個(gè)的脫氧核苷酸20精品課件21精品課件基因A有內(nèi)含子,在大腸桿菌中,其初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的RNA序列不能被切除,無法表達(dá)出蛋白A噬菌體噬菌體的宿主是細(xì)菌,而不是家蠶22精品課件繁殖快、容易培養(yǎng)蛋白A的抗體DNA可以從一種生物個(gè)體轉(zhuǎn)移到另一種生物個(gè)體23精品課件24精品課件25精品課件嫩葉組織細(xì)胞易破碎防止RNA降解26精品課件在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以mRNA為模板按照堿基互補(bǔ)配對(duì)的原那么可以合成cDNA目的基因無復(fù)制原點(diǎn);目的基因無表達(dá)所需啟動(dòng)子27精品課件磷酸二酯鍵目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常28精品課件29精品課件30精品課件31精品課件EcoRⅠ和BamHⅠE1
55Kda抑制P53基因的活性切下片段有可能與原基因重新結(jié)合32精品課件233精品課件34精品課件35精品課件36精品課件37精品課件38精品課件生長(zhǎng)速度藥物供體抗逆品質(zhì)39精品課件項(xiàng)目原理操作過程進(jìn)展基因治療利用_________導(dǎo)入有基因缺陷的細(xì)胞中,以表達(dá)出正常性狀來治療(疾病)臨床實(shí)驗(yàn)基因診斷制作特定_________與病人樣品DNA混合,分析雜交帶情況臨床應(yīng)用基因表達(dá)正?;驂A基互補(bǔ)配對(duì)DNA探針40精品課件轉(zhuǎn)錄翻譯分子設(shè)計(jì)多肽鏈預(yù)期功能新的蛋白質(zhì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)41精品課件42精品課件全部局部篩選43精品課件乙表達(dá)產(chǎn)物耐旱性44精品課件同源染色體的一條上45精品課件46精品課件47精品課件48精品課件編碼乙的DNA序列起始端無ATG,轉(zhuǎn)錄出的mRNA無起始密碼子49精品課件模板dNTP50精品課件51精品課件進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)維持培養(yǎng)液的pHC52精品課件53精品課件54精品課件55精品課件基因表達(dá)
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