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你能舉例說(shuō)出哪些植物器官的細(xì)胞中富含糖類,脂質(zhì)和蛋白質(zhì)嗎?如何從這些植物器官中提取檢測(cè)這些物質(zhì)?思維拓展:實(shí)驗(yàn):檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)原理:某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反響。如:復(fù)原糖+斐林試劑→磚紅色沉淀脂肪+蘇丹Ⅲ→橘黃色蛋白質(zhì)+雙縮脲→紫色淀粉+碘→藍(lán)色復(fù)原糖檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果脂肪檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果蛋白質(zhì)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果⒈在單糖中葡萄糖、果糖、半乳糖、核糖等具復(fù)原性;在二糖中麥芽糖、乳糖具復(fù)原性,而蔗糖不具復(fù)原性;在多糖中淀粉不具備復(fù)原性。⒉鑒定復(fù)原性糖的常用試劑是________,實(shí)驗(yàn)結(jié)果是出現(xiàn)______沉淀,實(shí)驗(yàn)條件都需要__________,實(shí)驗(yàn)取材常用______________最好;脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)常用試劑是_________,顏色反響是橘黃色,_____顏色反響是紅色,常用實(shí)驗(yàn)材料是_______;蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)的常用試劑是________,顏色反響是_________,常用材料是____________。實(shí)驗(yàn)根底穩(wěn)固:⒊用蘋果組織獲得含糖組織液時(shí)的必要步驟是___和_____,鑒定試劑的組成是______和_______;在制作脂肪鑒定的臨時(shí)裝片時(shí),使用50%的酒精的目的是_______;在鑒定蛋白質(zhì)時(shí),使用鑒定試劑時(shí)要注意的是______________________,試劑的組成是________________和____________________。目的要求:嘗試用化學(xué)試劑檢測(cè)生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)。材料用具:1.實(shí)驗(yàn)材料:蘋果汁、梨研磨液、馬鈴薯研磨液、牛奶、蛋清等2.儀器:雙面刀、試管、試管架、試管夾、大小燒杯、小量筒、滴管、酒精燈、三角架、石棉網(wǎng)、火柴、載玻片、蓋玻片、吸水紙、顯微鏡3.試劑:斐林試劑、碘液、雙縮脲試劑4.實(shí)驗(yàn)步驟:復(fù)原糖的檢測(cè):取樣液2mL于試管中→參加剛配的斐林試劑1mL〔斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再參加〕→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化〔淺藍(lán)色→棕色→磚紅色〕淀粉的鑒定:脂肪的檢測(cè):制作切片〔切片越薄越好〕將最薄的花生切片放在載玻片中央↓染色〔滴蘇丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精〕↓制作裝片〔滴1~2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片〕↓鏡檢鑒定〔顯微鏡對(duì)光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒〕蛋白質(zhì)的檢測(cè):試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL,搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴,搖勻→觀察顏色變化(紫色)被測(cè)樣品待測(cè)樣品成分成分蘋果勻漿馬鈴薯勻漿花生勻漿豆?jié){鮮肝提取液脂肪蛋白質(zhì)淀粉復(fù)原糖脂肪蛋白質(zhì)淀粉復(fù)原糖表一表二二、實(shí)驗(yàn)思考討論題:1、綜合復(fù)原性糖、脂肪、蛋白質(zhì)鑒定實(shí)驗(yàn)所選用的材料,思考生物中物質(zhì)鑒定類實(shí)驗(yàn)的選材原那么?有關(guān)可溶性復(fù)原糖、脂肪、蛋白質(zhì)鑒定的材料的處理與選擇:(1)實(shí)驗(yàn)材料的處理:鑒定可溶性復(fù)原糖時(shí),需要對(duì)生物材料進(jìn)行研磨提取;采用蛋清做實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定時(shí),要進(jìn)行適當(dāng)稀釋;鑒定脂肪時(shí),需要對(duì)花生浸泡后再進(jìn)行切片。(2)材料選擇的根本要求:要滿足實(shí)驗(yàn)要求,易獲取的原那么,不對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾:①由于物質(zhì)鑒定實(shí)驗(yàn)中,要觀察顏色變化,所以選擇的材料最好不帶顏色或顏色淺,或?qū)嶒?yàn)時(shí)對(duì)有色材料進(jìn)行脫色處理。②可溶性復(fù)原糖鑒定中不宜選擇甜菜、甘蔗等,因?yàn)檫@些材料中的主要糖類為不具復(fù)原性的蔗糖。③理論上講,所有生物材料都含有脂肪和蛋白質(zhì),但在鑒定時(shí),應(yīng)該選擇含有脂肪和蛋白質(zhì)比較豐富的生物材料,如脂肪鑒定一般選擇花生、蓖麻等,蛋白質(zhì)鑒定一般選擇雞蛋、大豆等。2、斐林試劑與雙縮脲試劑比較。斐林試劑雙縮脲試劑甲液乙液A液B液成分鑒定物質(zhì)添加順序反應(yīng)條件反應(yīng)現(xiàn)象3、復(fù)原性糖、脂肪、蛋白質(zhì)鑒定實(shí)驗(yàn)的操作中分別有哪些本卷須知?如何正確使用顯微鏡觀察目標(biāo)?換用高倍鏡后如何調(diào)節(jié)使物象清晰?4、從幾個(gè)實(shí)驗(yàn)的操作步驟體會(huì)生物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的根本原那么。〔一〕可溶性糖的鑒定操作方法注意問(wèn)題解釋1.制備組織樣液。(去皮、切塊、研磨、過(guò)濾)蘋果或梨組織液必須臨時(shí)制備。因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,將產(chǎn)生的顏色掩蓋。2.取1支試管,向試管內(nèi)注入2mL組織樣液。3.向試管內(nèi)注入1mL新制的斐林試劑,振蕩。應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲(chǔ)存,使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑;切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進(jìn)行檢測(cè)。斐林試劑很不穩(wěn)定,甲、乙液混合保存時(shí),生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水;甲、乙液分別加入時(shí)可能會(huì)與組織樣液發(fā)生反應(yīng)無(wú)Cu(OH)2生成。4.試管放在盛有50-650C溫水的大燒杯中,加熱約2分鐘,溶液顏色:淺藍(lán)色→棕色→磚紅色(沉淀)最好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不朝向?qū)嶒?yàn)者。也可用酒精燈水浴加熱。防止試管內(nèi)的溶液沖出試管,造成燙傷;縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。〔二〕脂肪的鑒定操作方法注意問(wèn)題解釋花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水。干種子要浸泡3~4小時(shí),新花生的浸泡時(shí)間則可縮短。因?yàn)榻輹r(shí)間短,不易切片,浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng),組織較軟,切下的薄片不易成形。切片要盡可能薄些,便于觀察。在子葉薄片上滴2~3滴蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液,染色1分鐘。染色時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。用吸水紙吸去薄片周圍染液,用50%酒精洗去浮色,再用吸水紙吸去酒精。酒精用于洗去
色,若不洗去,會(huì)影響對(duì)橘黃色脂肪滴的觀察。同時(shí),酒精是脂溶性溶劑,可將花生細(xì)胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上1~2滴
,蓋上蓋玻片。滴上清水可防止蓋蓋玻片時(shí)產(chǎn)生氣泡。低倍鏡下找到花生子葉薄片最薄處,可看到細(xì)胞中有染成橘黃色或紅色圓形小顆粒。裝片不宜久放。時(shí)間一長(zhǎng),油滴會(huì)溶解在乙醇中。〔三〕、蛋白質(zhì)的鑒定操作方法注意問(wèn)題解釋制備組織樣液。(浸泡、去皮研磨、過(guò)濾。)黃豆浸泡1至2天,容易研磨成漿,也可購(gòu)新鮮豆?jié){以節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間。鑒定。加樣液約2ml于試管中,加入雙縮脲試劑A,搖勻;再加入雙縮脲試劑B液3~4滴,搖勻,溶液變紫色。A液和B液也要分開(kāi)配制,儲(chǔ)存。鑒定時(shí)
。CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白質(zhì)反應(yīng)提供一個(gè)堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時(shí)加入,會(huì)導(dǎo)致Cu2+變成Cu(OH)2沉淀,而失效。否則CuSO4的藍(lán)色會(huì)遮蓋反應(yīng)的真實(shí)顏色。可用蛋清代替豆?jié){。蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠,在實(shí)驗(yàn)中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應(yīng)后會(huì)粘固在試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。例1一研究性學(xué)習(xí)小組欲鑒定一植物組織塊是否含有復(fù)原糖。兩位同學(xué)分別選擇了兩種不同的材料用具,請(qǐng)你幫助兩同學(xué)完成各自的實(shí)驗(yàn)〔簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)的方法步驟〕。同學(xué)甲:〔1〕實(shí)驗(yàn)原理:〔略〕〔2〕材料用具:某植物組織塊、斐林試劑、研缽、石英砂、漏斗、紗布、試管、滴管、小燒杯、石棉網(wǎng)、三腳架、酒精燈、火柴等〔3〕方法步驟:同
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