離子對(duì)色譜法測(cè)定磷酸肌酸鈉的穩(wěn)定性

離子對(duì)色譜法測(cè)定磷酸肌酸鈉的穩(wěn)定性

磷酸鈉（pcs）是一種高效的肌腱保護(hù)藥物。臨床多采用注射用水、5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液溶解后靜注,或在4℃停搏液中用于心臟手術(shù)。但如果使用不當(dāng)易產(chǎn)生肌酐、肌酸和磷酸肌酸酐等降解物,所以PCS在上述液體中的穩(wěn)定性對(duì)保證用藥安全至關(guān)重要。1試劑與儀器ShimadzuHPLC系統(tǒng)(10AD泵,10A紫外檢測(cè)器,5.03版工作站、10A控制器);7725-I進(jìn)樣器(RheodyneUSA);對(duì)照品:PCS(Merck公司,批號(hào)725k2712950);肌酸(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院,批號(hào)950613);肌酐(上?；瘜W(xué)試劑公司,批號(hào)F2001215);磷酸肌酸酐(Sigma公司,批號(hào)61K1218)。受試品:PCS粉針劑(哈爾濱博萊制藥有限公司,批號(hào)20001101,20001102,20001103)。受試液:注射用水(密陽神達(dá)藥業(yè)公司,批號(hào)020318);5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液(青島金海制藥廠,批號(hào)0206072,02082207);停搏液(中國人民解放軍總醫(yī)院,批號(hào)011224112);四丁基季銨磷酸鹽(Sigma公司,批號(hào)13677/112502);其余試劑為AR。2測(cè)量2.1對(duì)照溶液的制備精密稱取PCS、肌酐、肌酸和磷酸肌酸酐各15.0mg,用純化水制成各為0.3g·L-1的使用液。2.2組之間的注射液取PCS溶于下列溶液中:(1)2.0g于12.0mL注射用水中;(2)4.0g于500mL5%葡萄糖注射液中;(3)2.0g于12.0mL0.9%氯化鈉注射液中;(4)2.5g于1000mL停搏液中。最終分別用相應(yīng)的受試液稀釋成0.3g·L-1供測(cè)定用。2.3流動(dòng)相、流動(dòng)相、總酸鈉h色譜柱:Shim-VPC18(4.6mm×150mm,5μm),流動(dòng)相:0.2%磷酸二氫鉀+0.08%四丁基季銨磷酸鹽水溶液(用冰醋酸調(diào)pH3.3),流速:0.9mL·min-1檢測(cè)波長(zhǎng):210nm,進(jìn)樣量:20μL,用峰面積和外標(biāo)法定量。2.4pcs含量和ph值受試品溶液在室溫(25℃,停搏液在4℃,25℃)放置,于0,1,2,4,6,8,12及24h取樣測(cè)定不同時(shí)間PCS的含量和pH值(每點(diǎn)測(cè)定2次,共3個(gè)批號(hào))。以0h峰面積含量的均值為100%,來計(jì)算不同時(shí)間各被測(cè)組分的百分比含量。3重量測(cè)定3.1方法研究3.1.1分n/1.5測(cè)定要求對(duì)照品分離度測(cè)定的結(jié)果表明,4種組分R>1.5符合測(cè)定要求,見圖1。同時(shí)對(duì)4種受試液進(jìn)行空白與添加PCS對(duì)照品測(cè)定,結(jié)果未發(fā)現(xiàn)干擾,見圖2。3.1.2pcs在不同受試液中的精密度和準(zhǔn)確度(1)PCS及其降解物的精密度:取濃度為0.3g·L-1對(duì)照品溶液(n=5),每次進(jìn)樣20μL,測(cè)定值RSD依次為:肌酐0.31%;肌酸0.47%;磷酸肌酸酐0.85%和PCS0.74%。(2)PCS在不同受試液中的精密度:進(jìn)樣20μL0.3g·L-1的受試品溶液(n=6),其測(cè)定值RSD依次為注射用水0.32%;0.9%氯化鈉注射液0.26%;5%葡萄糖注射液0.31%和停搏液0.74%。3.1.3線性實(shí)驗(yàn)在0.075～1.2g·L-1范圍內(nèi),PCS線性良好,回歸方程為:Y=1012935+17847335Xr=0.9977。3.2受試液的ph值變化按“實(shí)驗(yàn)步驟”操作。PCS在不同受試液中0～24h間的含量變化,以0h含量為100%(n=6),24h的測(cè)定值依次為:(92.2±0.4)%(注射用水)、(82.3±2.0)%(5%葡萄糖注射液)、(90.4±0.5)%(0.9%氯化鈉注射液)、(96.2±1.2)%(25℃停搏液)、(99.7±3.3)%(4℃停搏液)。不同受試品溶液0～24h的pH變化(n=6)依次為:(8.39±0.18)～(8.02±0.38)(注射用水)、(7.81±0.06)～(7.42±0.05)(5%葡萄糖注射液)、(8.00±0.07)～(7.60±0.10)(0.9%氯化鈉注射液)、(8.76±0.00)～(8.76±0.00)(25℃停搏液)、(8.62±0.00)～(8.62±0.00)(4℃停搏液)。測(cè)定結(jié)果表明受試液的溫度、pH對(duì)PCS的穩(wěn)定性有直接影響。其降解產(chǎn)物的含量隨著PCS含量的降低而升高,主要降解物為肌酸。PCS在偏堿性和低溫下的受試液里穩(wěn)定,沒有降解物生成。4pcs在0.9%氯化鈉注射液和停采血液中tr值的測(cè)定采用離子對(duì)色譜法考察了PCS在臨床使用條件下的穩(wěn)定性。該法可同時(shí)測(cè)定PCS和其3種降解物的含量