拉曼光譜法測定藥品中的亞硝酸酯

拉曼光譜法測定藥品中的亞硝酸酯

1新方法的提出中國對假藥的現(xiàn)場抽樣工作量大，人員少，大部分缺乏用于靶場泵的技術(shù)和信息資源。化學(xué)法、機(jī)器分析法和生物檢驗(yàn)法等藥物的傳統(tǒng)鑒定方法對于快速現(xiàn)場提取和評價(jià)的藥物有一定的局限性，需要進(jìn)一步發(fā)展。因此能夠快速、準(zhǔn)確、便捷對藥品進(jìn)行初篩是目前藥品抽檢迫切需要解決的問題。本課題組多年致力于研究光纖傳感技術(shù)在藥物檢測方面的研究應(yīng)用,進(jìn)行藥品抽檢新方法的探究。由于光纖具有體積小、方便攜帶、傳輸損耗低等優(yōu)點(diǎn),適用于現(xiàn)場分析及藥品快速檢驗(yàn)。課題組前期嘗試將光纖傳感技術(shù)與紫外光譜相結(jié)合應(yīng)用于注射液、滴眼液的檢測,光纖探頭可直接浸入藥液中進(jìn)行檢測,但對于片劑和膠囊劑等固體制劑仍需配制成溶液進(jìn)行檢測。課題組在原有工作基礎(chǔ)上,進(jìn)一步嘗試直接對固體制劑進(jìn)行無損檢測,由于拉曼光譜具有分析速度快,特征性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),本文提出將光纖技術(shù)與拉曼光譜相結(jié)合,將光纖探頭直接放在藥片上進(jìn)行檢測。先建立藥品對照品的拉曼特征譜圖,對其進(jìn)行峰歸屬,再對待檢樣品進(jìn)行快速識(shí)別,為藥品快速無損鑒別建立一個(gè)新方法。對今后藥品的相關(guān)研究和鑒別提供重要的參考依據(jù)。2實(shí)驗(yàn)部分2.1美國海洋光學(xué)測試儀Peakseeker型集成式結(jié)合光纖的拉曼系統(tǒng),內(nèi)置檢測器為QE65000型科學(xué)級光譜儀(美國海洋光學(xué)公司)。甲硝唑?qū)φ掌?中國藥品生物制品檢定所,50mg,批號(hào):100191-200305);甲硝唑片(山西津華暉星制藥有限公司,200mg/片,批號(hào):091109、091111、100102、110302、10307、110313)。2.2試驗(yàn)條件激發(fā)波長785nm;分辨率8cm-1,在0—4000cm-1波數(shù)之間進(jìn)行拉曼光譜掃描,積分時(shí)間為10s;光柵狹縫0.22μm。2.3實(shí)驗(yàn)方法2.3.1藥品檢測圖譜的建立每個(gè)批次藥品選取10個(gè)藥片檢測,將樣品放在樣品架上,采用光纖探頭直接對藥品進(jìn)行檢測(見圖1),取藥品平均光譜。所得圖譜均未進(jìn)行平滑處理。數(shù)據(jù)處理和圖譜標(biāo)識(shí)通過Grams分析軟件程序完成。2.3.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)譜庫的建立對甲硝唑?qū)φ掌愤M(jìn)行掃描,建立對照品譜庫。對照圖譜如圖2所示。結(jié)果表明,甲硝唑?qū)φ掌防鼒D譜峰形良好。2.3.3拉曼光譜檢測直接測定樣品的拉曼譜圖,譜峰判別:信噪比大于3,該位置有拉曼峰。如圖3所示:甲硝唑樣品在1539、1492、1382、1358、1185cm-1處有較強(qiáng)的吸收峰,在2942、995、831cm-1處有特征吸收峰,甲硝唑?qū)φ掌吩?539、1492、1383、1359、1185cm-1處有較強(qiáng)的吸收峰,在2940、996、831cm-1處有特征吸收峰。從甲硝唑?qū)φ掌泛蜆悠繁容^的譜圖來看,能夠準(zhǔn)確識(shí)別出主成分,拉曼光譜與其主成分對應(yīng)很好,即使在輔料的存在下,所受到的干擾也較小,不影響其識(shí)別。從樣品的特征拉曼位移峰歸屬可見甲硝唑有多個(gè)拉曼特征位移峰,且每個(gè)峰的信噪比較高,得到的譜圖質(zhì)量較高,結(jié)果見表1。表明用拉曼光譜法對甲硝唑片進(jìn)行真?zhèn)舞b別方法可行。3結(jié)果與討論3.1不隔鋁塑包裝甲硝唑片的檢測采用光纖探頭隔著藥品包裝鋁塑泡罩對藥片進(jìn)行拉曼光譜檢測,然后把藥品取出來直接進(jìn)行檢測。每批次樣品,采集20張譜圖,取平均光譜進(jìn)行比較。如圖4所示:不隔鋁塑包裝甲硝唑片在1539、1492、1382、1358、1185cm-1處有較強(qiáng)的吸收峰,在2942、995、831cm-1處有特征吸收峰,隔鋁塑包裝甲硝唑片在1538、1493、1382、1357、1185cm-1處有較強(qiáng)的吸收峰,在2941、995、830cm-1處有特征吸收峰,比較同種樣品通過兩種方法測得拉曼光譜,圖譜無明顯差異,鋁塑包裝不影響識(shí)別(見圖4)。說明鋁塑包裝泡罩對拉曼光譜測定沒有影響,可以直接透過鋁塑包裝進(jìn)行測量。3.2光譜的比較采用光纖探頭直接對藥片進(jìn)行檢測,每個(gè)批次選取10片藥品進(jìn)行測定,然后刮除薄膜再進(jìn)行檢測,分別掃描10次,取平均光譜進(jìn)行比較。如圖5所示:未刮除包膜甲硝唑片在1539、1492、1382、1358、1185cm-1處有較強(qiáng)的吸收峰,在2942、995、831cm-1處有特征吸收峰,刮除包膜甲硝唑片在1538、1491、1382、1359、1186cm-1處有較強(qiáng)的吸收峰,在2943、995、832cm-1處有特征吸收峰,圖譜無明顯差異,包膜不影響識(shí)別。3.3實(shí)際樣品檢測實(shí)驗(yàn)考察鋁塑包裝和包膜對藥品識(shí)別不影響,便于藥品快速檢驗(yàn)。因?yàn)榭紤]在假藥篩查現(xiàn)場中具體情況不同,實(shí)驗(yàn)中考察了掃描時(shí)外界光線的影響,分別在避光、自然光及日光燈下測試,圖譜的峰形和峰位沒有明顯差異。不影響識(shí)別結(jié)果。因此,在實(shí)際藥品抽檢中,建立對照品圖譜和掃描樣品時(shí),對環(huán)境光線沒有特殊要求,并且可不破壞鋁塑包裝進(jìn)行。本實(shí)驗(yàn)主要為甲硝唑片的定性分析,較低波數(shù)區(qū)熒光雖有干擾,但不會(huì)影響它的峰位,所以不需要對樣品特殊處理。如果在定量分析時(shí),要考慮熒光對拉曼圖譜的影響,需要采取適當(dāng)措施消除熒光:如提純樣品;添加熒光熄滅劑;測定前將樣品用激光照射一定時(shí)間,通過降解高吸收物質(zhì),固態(tài)物質(zhì)的熒光也可得到減弱,即光致漂白等。4光纖探針檢測光纖傳感技術(shù)結(jié)合拉曼光譜分析法測定固體樣品