蛋白質(zhì)和酶的分離與純化_第1頁(yè)
蛋白質(zhì)和酶的分離與純化_第2頁(yè)
蛋白質(zhì)和酶的分離與純化_第3頁(yè)
蛋白質(zhì)和酶的分離與純化_第4頁(yè)
蛋白質(zhì)和酶的分離與純化_第5頁(yè)
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化學(xué)辦法：通過多個(gè)化學(xué)試劑對(duì)細(xì)胞膜的作用，使細(xì)胞破碎的辦法如：甲苯、丙酮、氯仿和非離子型的表面活性劑（Triton粗分：將得到的蛋白溶液先運(yùn)用簡(jiǎn)樸、快速、易解決的辦法除去大部分雜蛋白。如:鹽析、離心、有機(jī)溶劑沉淀等。避免蛋白質(zhì)的變性（pH、適合的溫度和緩沖體系等（一）蛋白質(zhì)屬于生物大分子之一，分子量從1100萬之巨，其分子的直徑可達(dá)（25℃時(shí)的飽和度為4.1mol/L，767g/L；03.9mol/L676g/L；在這一溶解度范疇內(nèi)，許多蛋白都能pH4.5-5.5之間，影響鹽析的因素：①溫度：②pH（二）①葡聚糖凝膠（Sephadex)（>120℃）,②瓊脂糖凝膠（Sepharose)：是一種天然多孔凝膠，孔徑大，合用于大分子量分子的（三）------

團(tuán)

H+團(tuán)團(tuán)團(tuán)

R-SO-- R-SO--Na 強(qiáng)堿型陰離子交換劑：季胺[R-N+(CH3)3-OH (R-N+HH2-OH-(R-N+HCH3H-OH-[R-N(CH3)2H-OH-

++++++R-N+(CH3)3-OH- R-N+(CH3)3-Cl-（四）根據(jù)蛋白質(zhì)特異性進(jìn)行分離-

實(shí)驗(yàn) IgIgG70%。7070余種血清蛋白中分離出γ-酸銨飽和度在50%下列時(shí)，可采用飽和硫酸銨溶液法，飽和硫酸銨溶液的加入量按下式計(jì)V=V0（C2-C1）/(100-C2)V=V0（C2-C1）/(1-V:應(yīng)加入飽和硫酸銨溶液的體積；5①正常血清（人、兔、狗0.0175mol/LDEAE-⑤納氏試劑：碘化汞和碘化鉀的堿性溶液，與氨氮反映生成淡紅棕色的化合物（410-425nm)⑥20%2201A1.0ml（pH6.3）復(fù)溶。 10-15cm。0.0175mol/L磷酸緩沖液（pH6.3）滴/min2min11滴于C樣。

實(shí)驗(yàn)二γ-55種蛋白質(zhì)β9.0-γ6.85-15.6-55種蛋白質(zhì)β9.0-γ6.85-15.6-響，下表是血（pH8.610B31cmA，B，C電泳：粗糙面對(duì)下置于電泳架上，

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