局部用藥的毒性研究課件

第十九章

局部用藥的毒性研究局部用藥的毒性研究1

局部用藥的毒性試驗是根據(jù)局部用藥部位的解剖和生理特點設(shè)計的。

涂劑、擦劑皮膚用藥膏劑、凝膠劑

其他透皮吸收制劑常用局部用藥制劑滴眼劑、滴鼻劑噴霧劑、肌內(nèi)注射直腸和陰道制劑局部用藥的毒性研究2第一節(jié)皮膚用藥（制劑）的毒性研究一、皮膚組織結(jié)構(gòu)表皮真皮皮下組織局部用藥的毒性研究3皮膚覆蓋全身。表皮較薄，厚為0.1-0.2mm。角質(zhì)層

表皮顆粒層生發(fā)層真皮依附于皮下組織，厚約2mm。膠原

真皮彈性硬蛋白纖維母細胞局部用藥的毒性研究4二、化學物質(zhì)對皮膚毒性作用的類型皮膚具有一定的保護作用，藥物及其他化學物質(zhì)對皮膚產(chǎn)生的損害損害主要為：一）皮膚原發(fā)性刺激原發(fā)性刺激—--藥物直接作用于皮膚引起的病理性反應(yīng)。紅斑、水腫原發(fā)性刺激的表現(xiàn)水皰瘡潰瘍局部用藥的毒性研究5強堿脂溶性溶劑

原發(fā)性刺激機理

鎘酸鹽銀、汞、砷等金屬鹽

特征

有明確的毒理學量-效關(guān)系。首次接觸即可產(chǎn)生某種特征。局部用藥的毒性研究6二）皮膚致敏皮膚致敏為變態(tài)反應(yīng)，包括藥物致敏和光敏反應(yīng)。作用機制藥物與蛋白以共價鍵結(jié)合，具用免疫原性。藥物在光的作用下，形成半抗原性物質(zhì)。

特征沒有明確的毒理學量-效關(guān)系。再次接觸該藥物才能激發(fā)特定癥狀。局部用藥的毒性研究7三）皮膚致癌有機大分子化合物----多環(huán)芳烴類金屬鹽----無機砷鹽局部用藥的毒性研究8三、皮膚用藥（制劑）毒性研究一）皮膚用藥急性毒性試驗

1、試驗?zāi)康?觀察完整與非完整皮膚短期內(nèi)接觸受試物所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)。

2、實驗材料1）動物-家兔、豚鼠、大鼠2）受試藥物-膏劑、液體或粉末

3、試驗方法1）劑量選擇-3個劑量組2）給受試物方法和觀察-涂敷固定

4、結(jié)果判斷局部用藥的毒性研究9二）皮膚用藥長期毒性試驗

1、試驗?zāi)康?觀察動物皮膚長期接觸受試物，對機體產(chǎn)生的異常毒性反應(yīng)。

2、實驗材料1）動物-家兔、豚鼠或大鼠2）受試藥物-膏劑、液體幾粉末

3、試驗方法1）劑量選擇-3個劑量計對照組2）給受試物方法及時間-涂敷固定、每日一次至少6小時，按臨床用藥時間的3倍時間。局部用藥的毒性研究103）檢測項目-每日觀察皮膚臨床癥狀、皮膚病力學檢查；一般癥狀、血液學、血液生化指標及病理學檢查。

4、結(jié)果判斷

進行統(tǒng)計學計算，并應(yīng)寫明安全劑量、中毒劑量、中毒的靶器官以及中毒的可逆性。局部用藥的毒性研究11三）皮膚刺激性試驗

1、試驗?zāi)康?觀察動物皮膚接觸受試物后所產(chǎn)生的刺激反應(yīng)情況。

2、實驗材料1）動物-家兔、豚鼠2）受試藥物-膏劑、液體或粉末

3、試驗方法-1g或1ml涂敷固定、于去除受試物后1、24、48和72小時觀察涂敷部位紅腫、紅斑以及上述變化的恢復情況和時間。局部用藥的毒性研究12皮膚刺激反應(yīng)評分反應(yīng)分值反應(yīng)分值紅斑水腫無紅斑0無水腫0略見紅斑1稍有水腫1中度紅斑2明顯可見(邊緣高出皮膚)2嚴重紅斑3皮膚隆起水腫輪廓清晰3紫色紅斑并有焦痂形成4水中隆起＞1mm4

總分8局部用藥的毒性研究134、結(jié)果判斷與評價強度平均分值無刺激＜0.5(0-0.5)輕度刺激＜2.0(0.5-2.0)中度刺激＜4.0(0.5-4.0)嚴重刺激＜6.0(0.5-6.0)極嚴重刺激＞6.0(6.0-8.0)局部用藥的毒性研究14四）皮膚過敏試驗1、試驗?zāi)康?通過動物皮膚重復接觸受試物，觀察機體免疫系統(tǒng)反映在皮膚上的表現(xiàn)。2、實驗材料1）動物-豚鼠2）受試藥物-膏劑、液體不稀釋直接涂敷3）陽性致敏物-2,4-而硝基氯代苯1%-致敏濃度0.1%-激發(fā)濃度局部用藥的毒性研究153、試驗方法1）試驗分組隨機分成三組，給藥組、賦形劑組、陽性對照組2）致敏接觸0.1-0.2ml(g)涂于脫毛區(qū)，接觸6小時，第七天和14天亦同樣方法重復。3）激發(fā)接觸末次給藥后第14天，激發(fā)給藥，6、24、48和72小時觀察皮膚過敏情況。局部用藥的毒性研究164、結(jié)果判斷與評價皮膚過敏反應(yīng)評分標準刺激反應(yīng)程度分值刺激反應(yīng)程度分值紅斑形成水腫形成無紅斑0無水腫0輕度紅斑1輕度水腫1中度紅斑2中度水腫2重度紅斑3重度水腫3水腫性紅斑4最高總分值7局部用藥的毒性研究17致敏率分類過敏反應(yīng)強度致敏率%弱致敏性0-10輕度致敏性10-30中度致敏性30-60高度致敏性60-80極度致敏性80-100紅斑形成總分+水腫形成總分反應(yīng)平均值=合計動物總數(shù)局部用藥的毒性研究18皮膚涂抹致癌試驗1、試驗?zāi)康?、實驗材料1）動物-敏感品系鼠2）受試物3）陽性對照藥-苯比、巴豆油3、試驗方法1）試驗分組-陰性、陽性、實驗組2）給藥量-每周1-2次局部用藥的毒性研究193）給藥方法4）給藥后觀察4、結(jié)果判斷與評價1）皮膚損傷程度2）組織病理學檢查3）皮膚腫瘤發(fā)生率計發(fā)生率與時間的關(guān)系，評定皮膚致癌的效應(yīng)。局部用藥的毒性研究20五）皮膚吸收試驗1、整體皮膚吸收試驗

化合物經(jīng)皮滲透的量同皮膚微灌流量直接相關(guān)，通過測量與皮膚灌流量相關(guān)的電壓，測算出化學經(jīng)皮吸收速率。

1）LDV法

用643.8nm氦-氖激光，照射血管中流動中的紅細胞，測量用藥前后變化，測定出皮膚吸收速度。局部用藥的毒性研究212）PPG法

LED射出的800-940nm紅外線照射，收集反射光轉(zhuǎn)變成電壓波譜，通過電壓波譜變化，計算皮膚吸收量的大小。局部用藥的毒性研究222、離體皮膚吸收試驗1）靜態(tài)滲透裝置上室防藥劑，下室接受液，下室中間方皮膚并密封，藥劑放于皮膚之上，每隔一定時間后，測定接受液，計算皮膚滲透率。2）流動滲透裝置上述方法的改進，接受液為血漿或白蛋白，以5ml/小時的速度灌流，測定不同時間灌流液的藥量。以次測定皮膚的透過率。局部用藥的毒性研究23六）皮膚光敏試驗1、試驗?zāi)康?觀察受試物接觸皮膚后遇光照是否有光敏反應(yīng)2、試驗方法1）光敏反應(yīng)試驗評價標準2）光毒性試驗評價標準局部用藥的毒性研究24第二節(jié)眼睛用藥刺激性試驗眼睛的結(jié)構(gòu)局部用藥的毒性研究25

角膜結(jié)膜炎炎癥角膜表面水腫上皮脫落刺激作用結(jié)膜充血、水腫灼痛、流淚、畏光

慢性結(jié)膜炎、瞼腺炎、分泌物增多局部用藥的毒性研究26

試驗?zāi)康慕悄啙岽碳ば栽囼炘囼灧椒ê缒そY(jié)果與評價結(jié)膜水腫分泌物局部用藥的毒性研究27一）試驗?zāi)康?觀察動物眼睛接觸受試物所產(chǎn)生的刺激反應(yīng)二）試驗方法家兔，原液（原膏）加入眼睛腫0.1ml(0.1g)，閉合5-10分鐘。6、24、48和72小時至7天眼刺激情況。三）結(jié)果與評價局部用藥的毒性研究28眼刺激反應(yīng)評分眼刺激反應(yīng)分值角膜渾濁0-4虹膜0-2結(jié)膜0-3水腫0-4分泌物0-3總分16局部用藥的毒性研究29眼刺激性評價標準刺激程度積分無刺激性0-3輕度刺激性4-8中度刺激性9-12重度刺激性13-16局部用藥的毒性研究30第三節(jié)肌內(nèi)注射用藥局部刺激性試驗試驗?zāi)康?肌內(nèi)注射后藥物對肌肉的刺激性反應(yīng)情況。試驗方法

家兔6只，一側(cè)骨四頭肌注射供試物，另一側(cè)注射生理鹽水1-2ml作為對照，48小時處死動物，取骨四頭肌縱向剖開，肉眼觀察，觀察注射部位刺激情況，必要時作組織病理學檢查。局部用藥的毒性研究31家兔股四頭肌肌肉組織局部用藥的毒性研究32結(jié)果與評價肌內(nèi)注射刺激反應(yīng)評分標準反應(yīng)級數(shù)刺激反應(yīng)0給藥部位無明顯反應(yīng)1給藥部位輕度充血，直徑0.5cm以下2給藥部位中度充血，直徑1.0cm以下3給藥部位中度充血，紅腫，肌肉有變性4出現(xiàn)肌肉褐色變性，壞死0.5cm以下5肌肉嚴重變性，出現(xiàn)大片壞死超過2認為不符合規(guī)定，不可進行肌內(nèi)注射局部用藥的毒性研究33第四節(jié)靜脈給藥局部刺激性試驗

見第十七章：全身用藥毒性試驗中-血管刺激性試驗局部用藥的毒性研究34第五節(jié)滴鼻劑和吸入劑的毒性試驗一、滴鼻劑和吸入劑急性毒性試驗

1、試驗?zāi)康抹C觀察受試物一次滴入或吸入后對動物產(chǎn)生的毒性反應(yīng)或死亡情況。2、試驗方法3個劑量組，組距0.65-0.85,滴入或吸入4小時后即可以及7-14天觀察動物。3、結(jié)果評價局部用藥的毒性研究35二、滴鼻劑和吸入劑刺激性試驗

1、試驗?zāi)康?觀察受試物一次滴入或吸入后對動物產(chǎn)生的刺激反應(yīng)。