2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體課件【知識精講精研】高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修3

2.2

動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體導(dǎo)入資料1傳統(tǒng)抗體制備：向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原（如滅活的一、單克隆抗體的制備新冠病毒），使動(dòng)物產(chǎn)生抗體，然后從動(dòng)物血清中分離出所需抗體。

思考：

1.抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生？

2.血清中只有一種抗體嗎？

3.傳統(tǒng)方法制備的抗體有什么缺點(diǎn)？

抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差

如何得到大量的單一抗體？注意：每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。一、單克隆抗體的制備思考：1.B淋巴細(xì)胞能無限增值生產(chǎn)大量的單一抗體嗎？B淋巴細(xì)胞與癌細(xì)胞融合2.哪種細(xì)胞能夠無限增殖？3.可否獲得一種兼具兩者優(yōu)勢的細(xì)胞？資料21975年，英國科學(xué)家米爾斯坦和德國科學(xué)家科勒用綿羊一、單克隆抗體的制備紅細(xì)胞免疫小鼠后，取小鼠脾臟里的B淋巴細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，從而獲得了世界第一株既能大量增殖，又能產(chǎn)生抗綿羊紅細(xì)胞抗體的融合細(xì)胞，即雜交瘤細(xì)胞。通過培養(yǎng)單一雜交瘤細(xì)胞，他們得到了單克隆抗體。由于這一貢獻(xiàn)，米爾斯坦和科勒于1984年獲得了諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。

思考：

仿照該實(shí)驗(yàn)，嘗試說出制備抗新冠病毒單克隆抗體的簡要過程。小鼠單克隆

抗體注射滅活的

B淋巴細(xì)胞新冠病毒

骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤

細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交定義使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。將不同來源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法電融合法、離心法；聚乙二醇（PEG）融合法、2+高Ca-高pH融合法結(jié)果獲得雜交細(xì)胞獲得雜種植株一、單克隆抗體的制備動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)

自主閱讀課本48頁內(nèi)容，完成表格內(nèi)容一、單克隆抗體的制備雜交瘤細(xì)胞的制備

多種B淋巴細(xì)胞思考：1.動(dòng)物細(xì)胞融合完后，培養(yǎng)基中有哪些類型的細(xì)胞？2.其中我們需要的是哪種類型的細(xì)胞？

小組合作，利用材料模擬動(dòng)物細(xì)胞融合的過程（若融合，只考

慮兩個(gè)細(xì)胞融合）滅活新冠病毒資料3哺乳動(dòng)物細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基喋呤阻斷；淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但不能無限增殖；骨髓瘤細(xì)胞中只有D途徑，沒有S途徑，但能不斷分裂增殖。

思考：若在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入氨基喋呤，能否篩選出雜交瘤

細(xì)胞？說出理由。

B淋巴細(xì)胞及同型融合細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞及同型融合細(xì)胞

不能無限增殖，死亡無S途徑，D途徑被阻斷，不能增殖雜交瘤細(xì)胞有淋巴細(xì)胞的S途徑和骨髓瘤細(xì)胞不斷增殖特性

一、單克隆抗體的制備探究一、篩選雜交瘤細(xì)胞第一次篩選思考：根據(jù)課本內(nèi)容及圖2-15，嘗試說出篩選的過程。探究二、篩選分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞一、單克隆抗體的制備第二次篩選有限稀釋法

每一個(gè)孔中盡量只接

種一個(gè)雜交瘤細(xì)胞

側(cè)面模擬圖克隆化培養(yǎng)一段時(shí)間取上清液進(jìn)行抗體檢測

★一、單克隆抗體的制備第二次篩選呈陽性檢測原理：

抗原和抗體特異性結(jié)

合深度探究：如果陽性孔中的細(xì)胞不是來自單個(gè)細(xì)胞，如何進(jìn)行純化呢？

克隆化培養(yǎng)和抗體檢測

重復(fù)多次注射到小鼠腹腔內(nèi)體外培養(yǎng)單克隆抗體分泌所需抗體的

雜交瘤細(xì)胞

體內(nèi)或體外培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)工程師在工作一、單克隆抗體的制備培養(yǎng)液小鼠腹水克隆培養(yǎng)一、單克隆抗體的制備

小組合作，根據(jù)課本圖2-16，利用所給的材料，建構(gòu)單克隆抗體制備流程圖。要求：1.以文字和箭頭的形式建構(gòu)，文字部分用提供的材料貼在白板上，用白板筆畫出箭頭。（篩選的詞條貼在箭頭右側(cè)）2.單克隆抗體制備過程中用到了哪些技術(shù)？一、單克隆抗體的制備

特定

提取

多種B淋巴細(xì)胞

誘導(dǎo)

融合

多種類型的細(xì)胞

用特定的選擇性培養(yǎng)基

克隆化培養(yǎng)、抗體檢測單克隆抗體優(yōu)點(diǎn)：能準(zhǔn)確識別抗原的微小差異，能與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，可以大量制備。資料4女性懷孕后，體內(nèi)會產(chǎn)生人絨毛膜促性腺激素。用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”。在妊娠第8天就可以作出診斷。

新冠病毒檢測試劑盒可以檢測是否感染新冠病毒。

二、單克隆抗體的應(yīng)用1.

作為診斷試劑

——最廣泛的應(yīng)用

二、單克隆抗體的應(yīng)用2.

作為藥物治療疾病張林琦教授團(tuán)隊(duì)資料52021年12月8日晚，由清華大學(xué)張林琦教授團(tuán)隊(duì)及其他公司共同研發(fā)的抗新冠病毒抗體組合藥物——安巴韋單抗注射液及羅米司韋單抗注射液，正式被中國藥監(jiān)局批準(zhǔn)上市，成為我國首個(gè)自主研發(fā)的抗新冠病毒抗體藥物。注入體內(nèi)后馬上起效，可以降低80%新冠患者的住院率與死亡率”思考：ADC的抗體和藥物各具有什么作用？

抗體主要發(fā)揮靶向運(yùn)輸作用；藥物發(fā)揮治療效應(yīng)，如殺傷

靶細(xì)胞。二、單克隆抗體的應(yīng)用

3.

運(yùn)載藥物

資料6

ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細(xì)胞毒素）三部分組成。

閱讀教材50頁誤的是

（）A.

它們的原理都涉及細(xì)胞膜的流動(dòng)性B.

都可以用電融合法或PEG融合法誘導(dǎo)融合C.

融合前都需用纖維素酶或果膠酶處理細(xì)胞D.

前者主要為了獲得細(xì)胞產(chǎn)品，后者主要為了獲得雜種植株C當(dāng)堂訓(xùn)練

一、概念檢測

1.

下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交比較的敘述，錯(cuò)下列相關(guān)敘述正確的是A.

利用該單克隆抗體可以診斷是否感染

SARS病毒B.

體外培養(yǎng)單個(gè)B淋巴細(xì)胞可以獲得針對SARS病毒的單克隆抗體C.

將等量B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合,經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞D.

將純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，從小鼠血清中分離出的抗體為單克隆抗體（A

）

當(dāng)堂訓(xùn)練2.

科學(xué)家以SARS病毒的核衣殼蛋白為抗原，制備出了單克隆抗體。3.下圖是抗新型冠狀病毒的單克隆抗體制備流程示意圖。動(dòng)物細(xì)胞融合選擇滅活的病毒（1）_______________技術(shù)為制造單克隆抗體開辟新途徑。（2）根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類，圖中篩選1的培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。（3）動(dòng)物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)劑外，還可以采用______________。（4）研究發(fā)現(xiàn)這些鼠源性單克隆抗體進(jìn)入人體可能會失效，思考一下為什么？