第八章 芳酸類藥物分析檢驗

第八章

芳酸類藥物分析檢驗

目錄

§8-1

阿司匹林分析檢驗§8-2

丙磺舒分析檢驗§8-3

布洛芬分析檢驗§8-1阿司匹林分析檢驗學習目標1.掌握阿司匹林的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)；阿司匹林的分析方法。2.熟悉阿司匹林的常規(guī)檢查項目，依據(jù)藥品質(zhì)量標準對阿司匹林進行分析檢測，正確記錄處理數(shù)據(jù)，并對結(jié)果進行判斷。3.了解阿司匹林制劑的含量測定方法。案例導入阿司匹林含進嘴里竟是甜的？滁州一名七旬老人的舉報電話，牽出了一個涉及全國21個省份49個地區(qū)的特大假藥案。2018年，滁州市食品藥品稽查支隊、滁州市公安部門成功偵破該起跨省制售假藥案，涉案金額達1000余萬元。目前，涉案的4名犯罪嫌疑人均被滁州市南譙區(qū)檢察院批準逮捕。據(jù)悉，老王有十多年的腦梗病史，長期服用阿司匹林腸溶片以降低腦梗發(fā)病風險。2018年前，老王還在其他藥房買藥，后來改在誠安藥房買藥。不成想，從該店買的藥在服用一個月后，感覺藥效明顯不行了，“走路發(fā)飄、頭腦糊涂”。案例導入“這次買的阿司匹林很奇怪，本來是沒有味道的，但含在嘴里竟然有點甜，用水送服后立馬化了?！崩贤醺械锦柢E后，立即向滁州市食品藥品稽查支隊舉報，稱他在誠安藥房購買的阿司匹林可能有問題。接到舉報后，滁州市食品藥品稽查支隊立即對藥品展開鑒定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)老王這次購買的阿司匹林腸溶片全是淀粉做的。討論：1.阿司匹林腸溶片應該采用什么方法進行鑒別？

2.如何對阿司匹林進行質(zhì)量分析，依據(jù)的標準是什么？水楊酸類藥物包括水楊酸酯類、鹽類或另有取代的水楊酸類，其基本結(jié)構(gòu)為鄰羥基苯甲酸。阿司匹林屬于水楊酸類藥物，為水楊酸和醋酸所成的酯，是臨床上常用的解熱鎮(zhèn)痛藥。本品為2-（乙酰氧基）苯甲酸。按干燥品計算，含C9H8O4不得少于99.5%。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.結(jié)構(gòu)特點阿司匹林是水楊酸和醋酸反應所生成的酯，結(jié)構(gòu)中含有游離羧基、酯鍵和苯環(huán)。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)2.理化性質(zhì)（1）性狀本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無臭或微帶醋酸臭，遇濕氣即緩緩水解。本品在乙醇中易溶，在三氯甲烷或乙醚中溶解，在水或無水乙醇中微溶，在氫氧化鈉溶液或碳酸鈉溶液中溶解，但同時分解。（2）酸性阿司匹林結(jié)構(gòu)中羧基與苯環(huán)直接相連，具有酸性（pKa=3.49）。故可采用酸堿滴定法進行含量測定。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（3）水解反應阿司匹林與碳酸鈉試液共熱，水解生成水楊酸鈉及醋酸鈉，放冷加過量的稀硫酸酸化，即析出白色水楊酸沉淀，并發(fā)生醋酸的臭氣。可用于阿司匹林的鑒別。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（4）和三氯化鐵反應

阿司匹林中的酯鍵受熱水解為水楊酸，水楊酸具有游離酚羥基，在中性或弱酸性條件下可與三氯化鐵反應生成紫堇色配合物，該反應可用于本藥物的鑒別。（5）紅外吸收光譜特征阿司匹林結(jié)構(gòu)中具有苯環(huán)和特征取代基，具有明顯的紅外吸收特征，廣泛用于該藥物的鑒別。二、鑒別試驗（1）取本品約0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。（2）取本品約0.5g，加碳酸鈉試液10ml，煮沸2分鐘后，放冷，加過量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并發(fā)生醋酸的臭氣。（3）本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜（光譜集5圖）一致。三、雜質(zhì)檢查

《中國藥典》采用高效液相色譜法控制阿司匹林原料藥和制劑中游離水楊酸和有關(guān)物質(zhì)的量。阿司匹林片、阿司匹林腸溶片、阿司匹林腸溶膠囊中還需進行溶出度檢查。（1）游離水楊酸照高效液相色譜法（通則0512）測定。臨用新制。溶劑1%冰醋酸的甲醇溶液。供試品溶液取本品約0.1g，精密稱定，置10ml量瓶中，加溶劑適量，振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻。對照品溶液取水楊酸對照品約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加溶劑適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻。三、雜質(zhì)檢查

色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20：5：5：70）為流動相；檢測波長為303nm；進樣體積10/1。

系統(tǒng)適用性要求理論板數(shù)按水楊酸峰計算不低于5000。阿司匹林峰與水楊酸峰之間的分離度應符合要求。

測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

限度供試品溶液色譜圖中如有與水楊酸峰保留時間一致的色譜峰，按外標法以峰面積計算，不得過0.1%。三、雜質(zhì)檢查（2）有關(guān)物質(zhì)照高效液相色譜法（通則0512）測定。溶劑1%冰醋酸的甲醇溶液。供試品溶液取本品約0.1g，置10ml量瓶中，加溶劑適量，振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻。對照溶液精密量取供試品溶液1ml，置200ml量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻。水楊酸對照品溶液見游離水楊酸項下對照品溶液。靈敏度溶液精密量取對照溶液1ml，置10ml量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻。三、雜質(zhì)檢查

色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20：5：5：70）為流動相A，乙腈為流動相B，按下表進行梯度洗脫；檢測波長為276nm；進樣體積10μl。

系統(tǒng)適用性要求阿司匹林峰的保留時間約為8分鐘，阿司匹林峰與水楊酸峰之間的分離度應符合要求。靈敏度溶液色譜圖中主成分峰高的信噪比應大于10。

測定法精密量取供試品溶液、對照溶液、靈敏度溶液與水楊酸對照品溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

限度供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，除水楊酸峰外，其他各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積（0.5%），小于靈敏度溶液主峰面積的色譜峰忽略不計。三、雜質(zhì)檢查（3）阿司匹林片溶出度照溶出度與釋放度測定法（通則0931第一法）測定。溶出條件以鹽酸溶液（稀鹽酸24ml加水至1000ml）500ml（50mg規(guī)格）或1000ml（0.1g、0.3g、0.5g規(guī)格）為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)30分鐘時取樣。供試品溶液取溶出液10ml濾過，取續(xù)濾液。阿司匹林對照品溶液取阿司匹林對照品適量，精密稱定，加溶劑溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.08mg（50mg、0.1g規(guī)格）、0.24mg（0.3g規(guī)格）或0.4mg（0.5g規(guī)格）的溶液。三、雜質(zhì)檢查

水楊酸對照品溶液取水楊酸對照品適量，精密稱定，加溶劑溶解并定量稀釋制成每1ml中約含10μg（50mg、0.1g規(guī)格）、30μg（0.3g規(guī)格）或50μg（0.5g規(guī)格）的溶液。溶劑、色譜條件與系統(tǒng)適用性要求見含量測定項下。

測定法精密量取供試品溶液、阿司匹林對照品溶液與水楊酸對照品溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標法以峰面積分別計算每片中阿司匹林與水楊酸含量，將水楊酸含量乘以1.304后，與阿司匹林含量相加即得每片溶出量。

限度標示量的80%，應符合規(guī)定。

其他應符合片劑項下有關(guān)的各項規(guī)定（通則0101）。四、含量測定

（1）酸堿滴定法阿司匹林結(jié)構(gòu)中具有游離羧基，溶液顯酸性，可與氫氧化鈉直接反應。因此《中國藥典》(2020年版)采用酸堿滴定法測定阿司匹林原料藥的含量。方法：取本品約0.4g，精密稱定，加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當于18.02mg的C9H8O4。四、含量測定

（2）高效液相色譜法

阿司匹林制劑中除了加入少量酒石酸或枸櫞酸穩(wěn)定劑外，制劑工藝過程中也可能有水解產(chǎn)物（水楊酸、醋酸）產(chǎn)生，因此不能采用直接滴定法。《中國藥典》(2020年版)采用高效液相色譜法測定阿司匹林片、阿司匹林腸溶片、阿司匹林腸溶膠囊、阿司匹林泡騰片、阿司匹林栓的含量。四、含量測定

（2）高效液相色譜法

阿司匹林片的含量測定方法如下：照高效液相色譜法（通則0512）測定。溶劑見游離水楊酸項下。

供試品溶液取本品20片，精密稱定，充分研細，精密稱取細粉適量（約相當于阿司匹林10mg），置100ml量瓶中，用溶劑強烈振搖使阿司匹林溶解，并用溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾膜濾過，取續(xù)濾液。

對照品溶液取阿司匹林對照品適量，精密稱定，加溶劑振搖使溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液。四、含量測定

（2）高效液相色譜法

色譜條件見游離水楊酸項下。檢測波長為276nm。

系統(tǒng)適用性要求理論板數(shù)按阿司匹林峰計算不低于3000。阿司匹林峰與水楊酸峰之間的分離度應符合要求。

測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算?！?-2丙磺舒分析檢驗學習目標1.掌握丙磺舒的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)；丙磺舒的分析方法。2.熟悉丙磺舒的常規(guī)檢查項目，依據(jù)藥品質(zhì)量標準對丙磺舒進行分析檢測，正確記錄處理數(shù)據(jù)，并對結(jié)果進行判斷。3.了解丙磺舒片劑的含量測定方法。

苯甲酸類藥物中苯環(huán)與羧基直接相連，代表性藥物主要包括苯甲酸及其鈉鹽以及丙磺舒等，其基本結(jié)構(gòu)為苯甲酸。丙磺舒為抗通風藥，本品為對-[（二丙氨基）磺?；鵠苯甲酸。按干燥品計算，含C13H19NO4S應為98.0%～102.0%。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.結(jié)構(gòu)特點丙磺舒結(jié)構(gòu)中含有游離羧基、苯環(huán)和二丙氨基磺?；Ｒ?、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)2.理化性質(zhì)（1）性狀本品為白色結(jié)晶性粉末；無臭。本品在丙酮中溶解，在乙醇或三氯甲烷中略溶，在水中幾乎不溶；在稀氫氧化鈉溶液中溶解，在稀酸中幾乎不溶。本品的熔點（通則0612）為198?201°C。（2）酸性丙磺舒結(jié)構(gòu)中羧基與苯環(huán)直接相連，具有酸性。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（3）和三氯化鐵反應丙磺舒加少量氫氧化鈉試液生成鈉鹽后，在pH為5.0?6.0的水溶液中與三氯化鐵試液反應，即生成米黃色沉淀，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)：一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（4）分解產(chǎn)物的反應丙磺舒與氫氧化鈉共熔融，可分解生成亞硫酸鈉，經(jīng)硝酸氧化成硫酸鹽而顯硫酸鹽反應。（5）吸收光譜特征丙磺舒結(jié)構(gòu)中具有苯環(huán)和特征團能團，具有明顯的紅外和紫外吸收特征，可用于該藥物的鑒別。二、鑒別試驗

（1）取本品約5mg，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液0.2ml，用水稀釋至2ml（pH值約5.0?6.0），加三氯化鐵試液1滴，即生成米黃色沉淀。

（2）取本品約0.1g，加氫氧化鈉1粒，小火加熱熔融數(shù)分鐘，放冷，殘渣加硝酸數(shù)滴，再加鹽酸溶解使成酸性，加水少許稀釋，濾過，濾液顯硫酸鹽的鑒別反應（通則0301）。

（3）取本品，加含有鹽酸的乙醇[取鹽酸溶液（9→1000）2ml，加乙醇制成100ml]制成每1ml中含20μg的溶液，照紫外-可見分光光度法測定，在225nm與249nm的波長處有最大吸收，在249nm波長處的吸光度約為0.67。

（4）本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜（光譜集73圖）一致。三、雜質(zhì)檢查

《中國藥典》（2020年版）采用高效液相色譜法控制丙磺舒原料藥中有關(guān)物質(zhì)的量。丙磺舒片主要進行溶出度檢查。

（1）有關(guān)物質(zhì)照高效液相色譜法（通則0512）測定。

供試品溶液取本品適量，加流動相溶解并稀釋制成每lml中約含60μg的溶液。

對照溶液精密量取供試品溶液lml，置100ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。

色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.05mol/L磷酸二氫鈉（加1%冰醋酸，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0）-乙腈（50：50）為流動相；檢測波長為245nm；進樣體積20μl。三、雜質(zhì)檢查

（1）有關(guān)物質(zhì)系統(tǒng)適用性要求理論板數(shù)按丙磺舒峰計算不低于3000。測定法精密量取供試品溶液與對照溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分色譜峰保留時間的5倍。限度供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面積的0.5倍（0.5%），各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的2倍（2.0%）。三、雜質(zhì)檢查

（2）丙磺舒片溶出度

照溶出度與釋放度測定法（通則0931第二法）測定。溶岀條件以人工腸液900ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為每分鐘50轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)30分鐘時取樣。測定法取溶出液10ml，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置100ml量瓶中，用0.4%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法（通則0401），在244nm的波長處測定吸光度，按C13H19NO4S的吸收系數(shù)（

）為359計算每片的溶出量。限度標示量的80%，應符合規(guī)定。其他應符合片劑項下有關(guān)的各項規(guī)定（通則0101）。四、含量測定

（1）高效液相色譜法丙磺舒具有羧基結(jié)構(gòu)，可采用酸堿滴定法以氫氧化鈉為滴定劑測定含量。但由于本品結(jié)構(gòu)中存在磺酰胺基，在用氫氧化鈉滴定過程中可發(fā)生水解，故《中國藥典》（2020年版）采用HPLC法測定丙磺舒原料藥的含量。四、含量測定

（1）高效液相色譜法

照高效液相色譜法（通則0512）測定。供試品溶液取本品適量，精密稱定，加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中含60μg的溶液。對照品溶液取丙磺舒對照品，精密稱定，加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中含60μg的溶液。色譜條件與系統(tǒng)適用性要求見有關(guān)物質(zhì)項下。測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算。四、含量測定

（2）紫外分光光度法

《中國藥典》（2020年版）采用紫外-可見分光光度法測定丙磺舒片的含量。具體方法：照紫外-可見分光光度法（通則0401）測定。

供試品溶液取本品10片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于丙磺舒60mg），置200ml量瓶中，加乙醇150ml與鹽酸溶液（9→100）4ml，置70°C水浴上加熱30分鐘，放冷，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→100）2ml，用乙醇稀釋至刻度，搖勻。

測定法取供試品溶液，在249nm的波長處測定吸光度，按C13H19NO4S的吸收系數(shù)（）為338計算。§8-3布洛芬分析檢驗學習目標1.掌握布洛芬的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)；布洛芬的分析方法。2.熟悉布洛芬的常規(guī)檢查項目，依據(jù)藥品質(zhì)量標準對布洛芬進行分析檢測，正確記錄處理數(shù)據(jù)，并對結(jié)果進行判斷。3.了解布洛芬制劑的含量測定方法。

布洛芬為苯乙酸衍生物，屬于苯乙酸等其他芳酸類藥物，是臨床上常用的解熱鎮(zhèn)痛非甾體抗炎藥。本品為α-甲基-4-（2-甲基丙基）苯乙酸。按干燥品計算，含C13H18O2不得少于98.5%。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.結(jié)構(gòu)特點

布洛芬為苯乙酸等其他芳酸類藥物，結(jié)構(gòu)中含有羧基，羧基通過亞甲基與苯環(huán)相連。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)2.理化性質(zhì)

（1）性狀

本品為白色結(jié)晶性粉末；稍有特異臭。本品在乙醇、丙酮、三氯甲烷或乙醚中易溶，在水中幾乎不溶；在氫氧化鈉或碳酸鈉試液中易溶。本品的熔點（通則0612第一法）為74.5?77.5℃。

（2）酸性布洛芬為苯乙酸衍生物，具有羧基，與苯甲酸及水楊酸類比較，酸性相對較弱，但仍具有一定的酸性，溶于中性乙醇后，可用氫氧化鈉直接滴定。

（3）吸收光譜特征布洛芬結(jié)構(gòu)中具有苯環(huán)和特征取代基，具有明顯的紫外和紅外吸收特征，廣泛用于該藥物的鑒別。二、鑒別試驗

（1）取本品，加0.4%氫氧化鈉溶液制成每1ml中約含0.25mg的溶液，照紫外-可見分光光度法（通則0401）測定，在265nm與273nm的波長處有最大吸收，在245nm與271nm的波長處有最小吸收，在259nm的波長處有一肩峰。

（2）本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜（光譜集943圖）一致。三、雜質(zhì)檢查

《中國藥典》（2020年版）采用薄層色譜法控制布洛芬原料藥中有關(guān)物質(zhì)的量。布洛芬片、布洛芬膠囊、布洛芬緩釋膠囊主要進行溶出度檢查。（1）有關(guān)物質(zhì)

照薄層色譜法（通則0502）試驗。

供試品溶液取本品，加三氯甲烷溶解并稀釋制成每lml中含100mg的溶液。

對照溶液精密量取供試品溶液適量，用三氯甲烷定量稀釋制成每lml中含1mg的溶液。

色譜條件采用硅膠G薄層板，以正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸（15：5：1）為展開劑。三、雜質(zhì)檢查

（1）有關(guān)物質(zhì)測定法吸取供試品溶液與對照溶液各5μl，分別點于同一薄層板上，展開，晾干，噴以1%高錳酸鉀的稀硫酸溶液，在120°C加熱20分鐘，置紫外光燈（365nm）下檢視。限度供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點，與對照溶液的主斑點比較，不得更深。三、雜質(zhì)檢查

（2）布洛芬片溶出度

照溶出度與釋放度測定法（通則0931第一法）測定。溶出條件以磷酸鹽緩沖液（pH7.2）900ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)30分鐘時取樣。供試品溶液取溶出液10ml，濾過，精密量取續(xù)濾液適量，用溶出介質(zhì)定量稀釋制成每1ml中約含布洛芬0.1mg的溶液。對照品溶液取布洛芬對照品，精密稱定，加甲醇適量溶解并用溶出介質(zhì)定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液。三、雜質(zhì)檢查

（2）布