大窯灣蝦夷扇貝麻痹性貝毒的含量與組分

大窯灣蝦夷扇貝麻痹性貝毒的含量與組分

麻痹性骨關節(jié)炎（psp）是一種廣泛分布于世界沿海水域的生物毒素。它是由藻類和細菌引起的，可能會導致人體麻痹和中毒。它是由氨基甲酸酯類(carbamatetoxins)、N-磺酰氨甲?；?n-sulfo-carbamoyltoxins)、脫氨甲?；?decarbamolytoxins)、脫氧脫氨甲?；?deoxydecarbamoyltoxins)4類毒素20余種化合物組成的生物大分子。由于產(chǎn)毒藻類、環(huán)境條件以及對毒素具有富集功能貝類等的差異,不同海域麻痹性貝毒含量及組分有著明顯的差異。大窯灣位于大連市市區(qū)東南海域,受市政廢水等影響,海域富營養(yǎng)化程度比較嚴重,赤潮時常發(fā)生,麻痹性貝毒一直缺乏研究。本文通過大窯灣海域蝦夷扇貝體內麻痹性貝毒的周年調查,對于科學制定貝毒監(jiān)測方案,以及適時收捕養(yǎng)殖貝類,保障公眾健康,具有切實的指導意義。1普通法上的化合物在大連市大窯灣浮筏養(yǎng)殖區(qū),2007～2008年每月采集蝦夷扇貝,采用高效液相(agilent1200)—柱后衍生(Pickering)方法(highperformanceliquidchromatography,HPLC),檢測麻痹性貝毒含量及組分。色譜條件:C毒素流動相:1mmol/L四丁基磷酸銨,氨水調pH值為5.8,過0.45μm濾膜,色譜柱:phenomenexC185μ250mm×4.6mm;GTX毒素流動相:4.3mmol/L庚烷磺酸鈉與10mmol/L磷酸銨的混合液,磷酸調pH至7.1,過0.45μm濾膜;STX毒素流動相:2mmol/L庚烷磺酸鈉與30mmol/L磷酸銨的混合液,磷酸調pH至7.1,過0.45μm濾膜:乙腈(20:1);GTX和STX毒素檢測使用色譜柱:phenomenexC185μ250mm×4.6mm。所用麻痹性貝毒標準物質購置于加拿大海洋生物科學研究所,有C1,C2;GTX1,GTX2,GTX3,GTX4,GTX5,dcGTX2,dcGTX3,neo-STX,dcSTX,STX等12種。同時,還采用了小白鼠生物法(MouseBiologicalAssay,MBA),進行了麻痹性貝毒毒性的檢測。2月份蝦麻醉性貝毒含量采用高效液相色譜法檢測大窯灣蝦夷扇貝體內麻痹性貝毒結果表明,4～7月份,麻痹性貝毒含量較高,各組分含量也較高;尤其是4月份含量最高,各組分也最高;其它月份含量較低,各組分也較低(圖1、圖2)。1月份,蝦夷扇貝體內麻痹性貝毒平均含量45.46μgSTXeq/100g,其中neoSTX毒素平均含量為32.75μgSTXeq/100g,C2毒素為11.59μgSTXeq/100g,C1毒素為1.13μgSTXeq/100g,其它9種組分均均未檢出。2月份,麻痹性貝毒平均含量為68.21μgSTXeq/100g,其中neoSTX毒素平均含量為54.61μgSTXeq/100g,C2毒素為11.19μgSTXeq/100g,C1毒素為1.33μgSTXeq/100g,GTX5毒素為1.08μgSTXeq/100g,其它8種組分均未檢出。3月份,麻痹性貝毒平均含量71.00μgSTXeq/100g,其中neoSTX毒素平均含量為39.60μgSTXeq/100g,C2毒素為11.81μgSTXeq/100g,C1毒素為1.51μgSTXeq/100g,其它9種組分均未檢出。4月份,蝦麻痹性貝毒平均含量為378.32μgSTXeq/100g,其中C2毒素平均含量為122.42μgSTXeq/100g,GTX1毒素為73.31μgSTXeq/100g,dcGTX2毒素為45.69μgSTXeq/100g,neoSTX毒素為27.19μgSTXeq/100g,GTX3毒素為25.93μgSTXeq/100g,GTX2毒素為24.44μgSTXeq/100g,dcGTX3毒素為20.45μgSTXeq/100g,C1毒素為16.61μgSTXeq/100g,STX毒素為16.21μgSTXeq/100g,GTX5毒素為6.07μgSTXeq/100g,GTX4和dcSTX未毒素檢出。5月份,麻痹性貝毒平均含量為209.98μgSTXeq/100g,其中GTX毒素平均含量為66.28μgSTXeq/100g,neoSTX毒素為50.35μgSTXeq/100g,GTX2毒素為24.96μgSTXeq/100g,dcGTX2毒素為23.29μgSTXeq/100g,GTX3毒素為19.15μgSTXeq/100g,C2毒素為13.94μgSTXeq/100g,dcGTX3毒素為4.96μgSTXeq/100g,C1毒素為3.88μgSTXeq/100g,GTX5毒素為3.17μgSTXeq/100g,GTX4,dcSTX和STX毒素未檢出。6月份,麻痹性貝毒平均含量90.85μgSTXeq/100g,其中neoSTX毒素平均含量為31.26μgSTXeq/100g,GTX1毒素為19.86μgSTXeq/100g,GTX2毒素為15.93μgSTXeq/100g,GTX3毒素為10.33μgSTXeq/100g,dcGTX2毒素為9.78μgSTXeq/100g,C2毒素為2.39μgSTXeq/100g,C1毒素為1.29μgSTXeq/100g,其它4種組分均未檢出。7月份,麻痹性貝毒平均含量92.04μgSTXeq/100g,其中GTX1毒素平均含量為44.36μgSTXeq/100g,neoSTX毒素為23.02μgSTXeq/100g,GTX2毒素為11.26μgSTXeq/100g,GTX3毒素為7.98μgSTXeq/100g,dcGTX毒素為3.73μgSTXeq/100g,C2毒素為1.04μgSTXeq/100g,C1為0.66μgSTXeq/100g,其它5種組分均未檢出。8月份,麻痹性貝毒平均含量44.82μgSTXeq/100g,其中neoSTX毒素平均含量為35.30μgSTXeq/100g,GTX2毒素為5.10μgSTXeq/100g,GTX3毒素為3.68μgSTXeq/100g,C2毒素為0.42μgSTXeq/100g,C1毒素為0.32μgSTXeq/100g,其它7種組分均未檢出。9月份,麻痹性貝毒平均含量58.79μgSTXeq/100g,其中neoSTX毒素平均含量為32.44μgSTXeq/100g,dcGTX2毒素為10.86μgSTXeq/100g,GTX2毒素為5.30μgSTXeq/100g,dcGTX3毒素為4.27μgSTXeq/100g,GTX3毒素為4.15μgSTXeq/100g,C2毒素為1.25μgSTXeq/100g,C1毒素為0.51μgSTXeq/100g,其它5種組分均未檢出。10月份,麻痹性貝毒平均含量58.16μgSTXeq/100g,其中neoSTX毒素平均含量為29.46μgSTXeq/100g,dcGTX2毒素為10.46μgSTXeq/100g,GTX2毒素為9.84μgSTXeq/100g,GTX3毒素為3.91μgSTXeq/100g,dcGTX3毒素為3.82μgSTXeq/100g,C1毒素為0.35μgSTXeq/100g,C2毒素為0.32μgSTXeq/100g,其它5種組分均未檢出。11月份,麻痹性貝毒平均含量18.86μgSTXeq/100g,其中neoSTX毒素平均含量為18.66μgSTXeq/100g,C1毒素為0.20μgSTXeq/100g,其它10種組分均未檢出。12月份,麻痹性貝毒平均含量21.29μgSTXeq/100g,其中neoSTX毒素平均含量為17.36μgSTXeq/100g,C2毒素為3.60μgSTXeq/100g,C1毒素為0.32μgSTXeq/100g,其它9種組分均未檢出(圖2)。2007年大窯灣蝦夷扇貝體內麻痹性貝毒平均含量為126.45μgSTXeq/100g,2008年為66.51μgSTXeq/100g,2a平均含量為96.48μgSTXeq/100g。比較2007年和2008年高效液相檢測結果可看出,麻痹性貝毒組分含量比例很相近,但GTX毒素同比上一年下降,而C毒素含量有所上升,STX毒素基本沒有變化。蝦夷扇貝麻痹性貝毒以GTX毒素為主,占45.74%;其次是STX毒素,35.33%;C毒素占18.94%。采用小鼠生物法(MBA)檢測大窯灣蝦夷扇貝麻痹性貝毒含量結果表明,4月份含量為1026.60Mu/100g,7月份含量為727.50Mu/100g,5月份含量為559.50Mu/100g,6月份含量為380.20Mu/100g,9月份含量為278.00Mu/100g,3月份含量為217.00Mu/100g,8月份含量為213.20Mu/100g,10月份含量為179.00Mu/100g,2月份含量為169.00Mu/100g;1月、11月和12月份均未檢出(圖1)。與高效液相色譜法監(jiān)測結果基本一致,仍然是4～7月份蝦夷扇貝體內麻痹性貝毒含量較高。3大窯灣蝦夷小波藻細胞的誘導表達本文發(fā)現(xiàn)4～7月份大窯灣蝦夷扇貝體內麻痹性貝毒組分和含量最高,11～12月份最低,有著明顯的季節(jié)變化(圖2)。為了比較準確地評估北黃海蝦夷扇貝體內麻痹性貝毒的危害,建議在4～7月份進行麻痹行貝毒監(jiān)測比較適宜;同時這一期間該海域蝦夷扇貝不宜上市,以保障公眾健康。2004年5月和2005年10月份在北黃海蝦夷扇貝體內均檢出GTX3、GTX2、C1、C2、neoSTX和STX等6種毒素組分,麻痹性貝毒總含量分別為54.6μgSTXeq/100g和52.0μgSTXeq/100g。而本文在2007年5月和10月份,大窯灣蝦夷扇貝體內分別檢出9種和7種組分(圖2),麻痹性貝毒總含量分別為243.57μgSTXeq/100g和78.64μgSTXeq/100g(圖1);2008年分別檢出8種和3種組分(圖2),含量分別為243.57μgSTXeq/100g和78.64μgSTXeq/100g。由此可見,2007～2008年比2004～2005年同月份,北黃海海域蝦夷扇貝體內麻痹性貝毒組分顯著增多,含量明顯升高。產(chǎn)生麻痹性貝毒的微藻有亞歷山大藻屬(Alexandrium)、裸甲藻屬(Gymnodinium)等。2006年10月至2007年9月,在大窯灣浮游植物種群中,在1～4月和6月,均有產(chǎn)生麻痹性貝毒的塔瑪亞歷山大藻Alexandriumtamarense出現(xiàn),而這期間大窯灣蝦夷扇貝體內麻痹性貝毒均能檢出,且4月份為全年中最高(圖1),在海域水溫7.5～9℃時,特別適宜