鹽酸莫西沙星注射液雜質(zhì)含量測(cè)定

鹽酸莫西沙星注射液雜質(zhì)含量測(cè)定

鹽酸莫沙星注射液的有效成分是莫沙星，它是一種新型的第四代八-羥色胺類藥物。這是一種類似于抗炎藥的藥物之一，可以廣泛地用作抗菌譜。在已完成的20余項(xiàng)臨床實(shí)驗(yàn)中,莫西沙星體現(xiàn)了良好的安全性和藥動(dòng)力特性,具有口服吸收良好的特點(diǎn),平均絕對(duì)生物利用度達(dá)到90%,血漿蛋白結(jié)合率則為50%,組織穿透性也較良好。在鹽酸莫西沙星原料的合成過程中會(huì)有相關(guān)物質(zhì)的引進(jìn),并且鹽酸莫西沙星注射液在配制和儲(chǔ)存的過程中可能有不同程度的降解,從而可能產(chǎn)生以下幾種雜質(zhì):雜質(zhì)A分子式為C20H21F2N3O3,分子量為389.40;雜質(zhì)B分子式為C22H27N3O5,分子量為413.47;雜質(zhì)C分子式為C22H26FN3O4,分子量為415.46;雜質(zhì)D分子式為C21H24FN3O4,分子量為401.43;雜質(zhì)E分子式為C20H22FN3O4,分子量為387.40。采用適當(dāng)?shù)姆治龇椒?實(shí)現(xiàn)對(duì)以上5種雜質(zhì)的分析檢測(cè)并進(jìn)行逐一控制,對(duì)鹽酸莫西沙星注射液在用藥過程中能發(fā)揮安全有效的作用具有重要意義。分析方法主要采用HPLC法,作者采用苯基硅烷鍵和硅膠作為填充劑HPLC方法,通過工藝調(diào)整,使得該方法易操作,以滿足莫西沙星供試樣測(cè)定使用。1材料和方法1.1莫西瓜星雜質(zhì)的制備鹽酸莫西沙星雜質(zhì)A(AUSPCertificate);鹽酸莫西沙星雜質(zhì)B,C,D,E(MolcavCorporation);莫西沙星標(biāo)準(zhǔn)液,甲醇(色譜純,美國(guó)HONEYWELLB&J);水(二次蒸餾);四丁基硫酸氫銨,磷酸二氫鉀,磷酸,均為分析純。莫西沙星雜質(zhì)A儲(chǔ)備液:取莫西沙星雜質(zhì)A2.5mg,置于25mL容量瓶中,加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度,搖勻。莫西沙星雜質(zhì)A樣品:量取上述雜質(zhì)A儲(chǔ)備液1mL置于100mL容量瓶中,加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度,搖勻。雜質(zhì)B,C,D,E儲(chǔ)備液及樣品的配制同上。1.2紫外檢測(cè)儀器所使用的儀器主要有:高效液相色譜儀(LC-10ATVP溶劑輸送泵,CTO-10AVP柱溫箱,SPD-M10AVP紫外檢測(cè)器,CLASS-VP色譜工作站,均為日本島津公司產(chǎn)品;苯基硅烷鍵和硅膠色譜柱(天津博納艾杰爾科技有限公司),FA2004電子天平(上海天平儀器廠),PHS-3C=酸度計(jì)(上海佑科儀器儀表有限公司)。1.3丁基硫酸氫銨檢測(cè)條件色譜柱是苯基硅烷鍵和硅膠色譜柱,以甲醇∶混合液(0.5g/L四丁基硫酸氫銨,1.0g/L磷酸二氫鉀和3.4g/L磷酸等體積混合)=28:72(體積比)為流動(dòng)相,檢測(cè)流速是1.3mL/min,波長(zhǎng)293nm,柱溫是45℃。1.4關(guān)于雜質(zhì)的線性試驗(yàn)方法1.5測(cè)定不同時(shí)間點(diǎn)點(diǎn)穩(wěn)定性分別將鹽酸莫西沙星雜質(zhì)樣品在室溫下放置,經(jīng)0,1,2,4,6,8h,在不同時(shí)間點(diǎn)分別取樣10μL,注入液相色譜儀,測(cè)定其峰面積,考查其穩(wěn)定性。1.6莫-沙星標(biāo)準(zhǔn)樣的取樣方法稱取5mg莫西沙星用流動(dòng)相配制成5mL溶液,搖勻。量取10μL注入液相色譜儀,記錄相關(guān)數(shù)據(jù)。2結(jié)果與討論2.1雜質(zhì)的線性回歸分析以表1中的濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)(見圖1),再對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行線性回歸分析,零點(diǎn)強(qiáng)制通過,可以得到線性回歸方程和相關(guān)系數(shù),由圖1中的曲線可以得到結(jié)論,在一定濃度范圍(0.6~1.4μg/mL)內(nèi),雜質(zhì)的線性關(guān)系良好,可以滿足鹽酸莫西沙星注射液對(duì)雜質(zhì)的線性要求。2.2測(cè)定峰面積、穩(wěn)定性分別將鹽酸莫西沙星雜質(zhì)樣品在室溫下放置,經(jīng)0h,1h,2h,4h,6h,8h,在不同時(shí)間點(diǎn)分別取樣10μL注入液相色譜儀,測(cè)定峰面積,考查其穩(wěn)定性,結(jié)果見表2。通過表2中的數(shù)據(jù)所得峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差s為0.29%~0.72%,而在1.3中規(guī)定的色譜條件下,峰面積s的正常波動(dòng)范圍是在0.2%~0.9%之內(nèi),由此可知在室溫下放置8h后雜質(zhì)溶液仍然穩(wěn)定,能夠滿足鹽酸莫西沙星注射液對(duì)雜質(zhì)溶液穩(wěn)定性的要求。2.3雜質(zhì)的含量莫西沙星標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試條件同2.1和2.2,結(jié)果如表2所示。由表2數(shù)據(jù)可知,雜質(zhì)A,B,C,D,E的含量均低于莫西沙星含量的0.15%,由線性試驗(yàn)和穩(wěn)定性試驗(yàn)可知,標(biāo)準(zhǔn)品雜質(zhì)濃度均在線性范圍內(nèi),且可穩(wěn)定存在,由保留時(shí)間可知,在所設(shè)置的測(cè)試條件下,峰分離度良好,可用于供試樣的測(cè)試。3莫沙地星標(biāo)準(zhǔn)品溶液在所設(shè)置的實(shí)驗(yàn)條件下,當(dāng)雜質(zhì)濃度在0.6~1.4μg/mL時(shí),雜質(zhì)的線性關(guān)系良好。在室溫下放置8h后雜質(zhì)溶液仍然穩(wěn)定。莫西沙星標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試結(jié)果顯示,對(duì)于1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液,雜質(zhì)A,B,C,D,E的含量均低于莫西沙星含量的0.15%,穩(wěn)定性和線性均能滿足測(cè)試要求