含平貝母與紅花梨保健飲料的研制

含平貝母與紅花梨保健飲料的研制

近年來(lái)，由于空氣污染降低、辛辣食品和酒精刺激，喉嚨疾病的發(fā)病率顯著增加，已成為危害人類(lèi)健康的重要因素。因而“貝母燉梨”、“貝母蒸梨”、“鮮梨貝母湯”等民間食用方也逐漸受到人們的歡迎,并取得了良好的功效。為使人們應(yīng)用更加便捷,并拓寬平貝母的銷(xiāo)售市場(chǎng),我們以平貝母及雪花梨為主要原料,研制了平貝雪梨保健飲料,并對(duì)其進(jìn)行清咽功能的研究。1材料和機(jī)器1.1axim、柏拉圖平貝母,采自黑龍江林區(qū),經(jīng)高文遠(yuǎn)教授鑒定為百合科植物平貝母FritillariaussuriensisMaxim的干燥鱗莖。貝母素乙(批號(hào):1023-050102,中國(guó)固體制劑制造技術(shù)國(guó)家工程研究中心)。雪花梨(購(gòu)自山東煙臺(tái)),異Vc鈉,食鹽,檸檬酸,明膠,單寧。蜂蜜,純凈水。二甲苯(天津市贏達(dá)稀貴化學(xué)試劑廠,批號(hào):1320100143),醋酸地塞米松片(天津力生制藥股份有限公司,批號(hào):H12020122),試劑均為分析純。1.2動(dòng)物SD大鼠(雄性,24只,180~220g)。1.3紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)和cp215d型電子天平儀器LDZ5-2離心機(jī)(北京雷勃爾離心機(jī)廠),754紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(天津市普瑞斯儀器有限公司),CP225D型電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)。2方法和結(jié)果2.1采用平貝母提取法研究2.1.1因素水平設(shè)計(jì)選用L9(34)正交表進(jìn)行實(shí)驗(yàn),以加水量、提取時(shí)間及提取次數(shù)為考察因素,以浸膏得率、總生物堿量為考察指標(biāo)優(yōu)選平貝母水提最佳工藝,因素水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。2.1.2平貝母藥材質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測(cè)定精密稱(chēng)取15g平貝母藥材,按表1設(shè)計(jì)9組實(shí)驗(yàn),對(duì)平貝母進(jìn)行加熱提取。合并提取液,過(guò)濾并濃縮至100mL,分別測(cè)定提取液中生物堿的量及干浸膏的得率,并將生物堿的量折算成平貝母藥材質(zhì)量分?jǐn)?shù),即生物堿轉(zhuǎn)移率(Y1%),將干浸膏得率折算成平貝母藥材質(zhì)量分?jǐn)?shù)(Y2%)。2.1.3標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制精密稱(chēng)取貝母素乙對(duì)照品6.2mg,置100mL量瓶中,加三氯甲烷溶解并稀釋至刻度,搖勻,即制成對(duì)照品溶液。分別精密吸取對(duì)照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、8.0mL置于25mL量瓶中,精密加入pH4.2的氫氧化鈉-鄰苯二甲酸氫鉀緩沖液5mL及其配制的0.05%溴麝香草酚藍(lán)溶液2mL,加三氯甲烷至刻度,劇烈振搖3次,移入分液漏斗中,靜置30min,分取三氯甲烷層置預(yù)先放有0.2g無(wú)水硫酸鈉(預(yù)先于105℃加熱1h)的具塞錐形瓶中,密閉搖勻,取上清液,在413nm處測(cè)定吸光度。同法制成空白對(duì)照,測(cè)定吸收度,以吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)(圖1),所得貝母素乙回歸方程為:Y=24.431X+0.031(r=0.998)。試驗(yàn)表明貝母素乙在1.72~27.5μg/mL呈良好的線(xiàn)性關(guān)系。精密吸取貝母水煎液(15g/100mL)30mL,水浴揮干后,精密稱(chēng)定,置具塞錐形瓶中,精密加入濃氨試液4mL,靜置,浸潤(rùn)1h,精密加入三氯甲烷-甲醇(4︰1)的混合溶液100mL,稱(chēng)定質(zhì)量,加熱回流3h,放冷,再稱(chēng)定重量,加上述混合溶液補(bǔ)足減失的質(zhì)量,搖勻,濾過(guò),精密量取續(xù)濾液20mL,蒸干,殘?jiān)尤燃淄榉执稳芙舛恳迫?0mL量瓶中,定容。精密吸取樣品溶液5mL,置25mL量瓶中,按貝母素乙標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)同法操作,取樣品溶液的上清液,以相應(yīng)試劑為空白,在413nm處測(cè)定吸光度,并將測(cè)得樣品吸收度代入回歸方程計(jì)算含量。2.1.4物測(cè)定法即測(cè)定一個(gè)相關(guān)系數(shù),6.精密量取水煎濃縮液(15g/100mL)10mL,按《中國(guó)藥典》(2005年版一部附錄XA)浸出物測(cè)定法項(xiàng)下的方法測(cè)定,即得。2.1.5篩選指標(biāo)的分析根據(jù)表1,選擇L9(34)正交試驗(yàn)表進(jìn)行試驗(yàn)。把總生物堿轉(zhuǎn)移率(Y1%)、干浸膏得率(Y2%)作為篩選指標(biāo)。其結(jié)果見(jiàn)表2,方差分析見(jiàn)表3。由直觀分析可知,影響提取效果的因素順序?yàn)?提取次數(shù)>加水倍數(shù)>提取時(shí)間,以提取次數(shù)影響最大。由方差分析可知,提取次數(shù)對(duì)提取效果有顯著性差異,由此可推斷出最佳提取工藝為A2B3C3,即:以9倍量的水加熱提取3次,每次2h。2.2雪梨汁的制備2.2.1工藝2.2.2果汁、滅酶、濃縮預(yù)處理:選取新鮮雪花梨,浸泡后用流動(dòng)水洗凈,切瓣去果心。護(hù)色:將切好的梨塊以異Vc鈉-食鹽-檸檬酸按一定比例(0.3%:0.2%:0.1%)配制的水溶液浸泡。榨汁:采用噴灑方式加入配制好的異Vc鈉-食鹽-檸檬酸的水溶液,將梨塊用榨汁機(jī)榨汁,并用2層紗布粗濾。滅酶:濾液立即用夾層鍋或管式消毒器加熱滅酶,煮沸約1min,驟冷。澄清:采用明膠-單寧法澄清,用0.5%的明膠水溶液7.5%和1%的單寧水溶液7%混合液加入上述滅酶后的梨汁中,靜置2h,以3500r/min的轉(zhuǎn)速離心15min,取上清液即得澄清梨汁。濃縮:所得梨汁工藝穩(wěn)定,肉眼觀察澄清無(wú)雜質(zhì),密度約為1.05。加入產(chǎn)品前將其濃縮10倍存放。2.3平貝爾油田健康食品的制備2.3.1產(chǎn)品配置2.3.2工藝2.3.3調(diào)配、精濾預(yù)處理:將平貝母進(jìn)行除雜后粉碎,去除雜質(zhì)。提取:將粉碎后的平貝母以9倍量的水加熱提取3次,每次2h。調(diào)配:按配方比例將平貝母提取物、濃縮梨汁、蜂蜜、檸檬酸等一起加入調(diào)配灌,用攪拌器充分?jǐn)嚢璨⒓訜?0min,使各種物質(zhì)充分混勻,過(guò)濾。精濾:為除去飲料中的細(xì)微顆粒及沉淀,使之澄清透明,再進(jìn)行2次過(guò)濾。滅菌:將成品放于恒溫水浴鍋中進(jìn)行滅菌,條件為80℃,30min,然后冷卻至40℃左右。2.4平貝酒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究2.4.1物理和化學(xué)指標(biāo)的測(cè)定本品為淺棕黃色澄清液體,無(wú)肉眼可見(jiàn)的外來(lái)雜質(zhì),久置有微量沉淀物。各項(xiàng)理化指標(biāo)均按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)表5。2.4.2理化指標(biāo)檢查在溫度為40℃,相對(duì)濕度為75%的條件下儲(chǔ)存3個(gè)月,檢查各項(xiàng)理化指標(biāo)。結(jié)果表明,產(chǎn)品在感官上變化不大,略有微量沉淀析出,pH值為5.3,可溶性固形物的量基本保持穩(wěn)定,菌落群數(shù)和大腸桿菌不超標(biāo)。2.4.3氯甲烷分次溶解溶液取平貝雪梨產(chǎn)品150mL(相當(dāng)于平貝母原藥材3g),置具塞錐形瓶中,水浴揮干水分,精密加入濃氨試液4mL,靜置,浸潤(rùn)1h,精密加三氯甲烷-甲醇(4:1)的混合溶液100mL,稱(chēng)定質(zhì)量,加熱回流3h,放冷,再稱(chēng)定質(zhì)量,加上述混合溶液補(bǔ)足減失的質(zhì)量,搖勻,濾過(guò),精密量取續(xù)濾液20mL,蒸干,殘?jiān)尤燃淄榉执稳芙舛恳迫?0mL量瓶中,定容。精密吸取上述樣品溶液5mL,置25mL量瓶中,按貝母素乙標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)同法操作,重復(fù)五次,取樣品溶液的上清液,在413nm處測(cè)定吸光度,測(cè)得吸光度值為0.135,帶入回歸方程計(jì)算總生物堿的量。結(jié)果平貝雪梨產(chǎn)品中總生物堿的量以貝母乙素計(jì)為5.13μg/mL。2.5給藥后水腫率取健康SD大鼠32只,雄性,稱(chēng)重,隨機(jī)分為4組,每組8只,即陰性對(duì)照組(生理鹽水組),平貝雪梨飲高、中、低劑量組(相當(dāng)于平貝母生藥材1,0.5,0.25g/kg)。以上各組給藥方法均為ig給藥,每天1次,連續(xù)5d。于末次給藥1h后,每只大鼠左后足趾sc10%雞蛋清液0.1mL。隨后于致炎后1、3、4、5h分別測(cè)定左后足趾厚度一次(用游標(biāo)卡尺測(cè)量大鼠踝關(guān)節(jié)下0.5cm處足趾中央厚度),計(jì)算腫脹率。結(jié)果見(jiàn)表7。腫脹率=(致炎后足趾厚度-致炎前足趾厚度)/致炎前足趾厚度×100%3食品穩(wěn)定性檢測(cè)19世紀(jì)中期,咸豐年間,東北的漢、朝、滿(mǎn)、回等民族即有“貝母梨”治療肺熱咳喘等民間驗(yàn)方流傳。但是至今仍未有以二者為主要原料的的保健產(chǎn)品上市,本實(shí)驗(yàn)研制出了工藝穩(wěn)定、質(zhì)量可控的清咽保健飲料,檢測(cè)結(jié)果表明所研制出的保健食品工藝穩(wěn)定,各項(xiàng)指標(biāo)均符合保健食品相關(guān)規(guī)定。并對(duì)其主要活性成分進(jìn)行了定量測(cè)定