DB43-T 959.4-2023 異種移植用無(wú)指定病原體DesignatedPathogen Free,DPF醫(yī)用供體豬 第4部分：病理學(xué)診斷規(guī)范

ICS

70.080CCS

B

43湖南 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB43/T

959.4—2023代替

.異種移植用無(wú)指定病原體（

Free,

DPF）醫(yī)用供體豬第部分：病理學(xué)診斷規(guī)范Medical

grade

DPF

donorpig

for

xenotransplantationPart4:Specification

of

pathological

diagnosis2023

-

11

-

09

發(fā)布

2024

-

-

實(shí)施湖南省市場(chǎng)監(jiān)督管理局

發(fā)

布DB43/T

959.4—2023 前言························································································································

Ⅲ引言························································································································

Ⅴ1

·····················································································································12

規(guī)范性引用文件······································································································13

術(shù)語(yǔ)和定義············································································································14

縮略語(yǔ)··················································································································15

檢查規(guī)則···············································································································26

檢查程序···············································································································37

臨床病理學(xué)檢查······································································································38

解剖病理學(xué)檢查······································································································49

結(jié)果判定···············································································································510 檢查結(jié)論··············································································································6附錄

A（規(guī)范性）

異種移植用

醫(yī)用供體豬的血液學(xué)指標(biāo)正常值參考范圍

···························

7附錄

B（規(guī)范性）

異種移植用

醫(yī)用供體豬的血液生物化學(xué)指標(biāo)正常值參考范圍

··················8附錄

C（規(guī)范性）

異種移植用

醫(yī)用供體豬組織病理學(xué)檢查及標(biāo)本取材規(guī)范

························

9DB43/T

959.4—2023本文件按照

GB/T

—《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第

1

部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件是

《異種移植用無(wú)指定病原體（Designated

Pathogen

Free,

DPF）醫(yī)用供體豬》的第

4

部分。DB43/T

已發(fā)布了以下部分：——第

1

部分：遺傳質(zhì)量控制；——第

2

部分：微生物、寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)與監(jiān)測(cè)；——第

3

部分：配合飼料；——第

4

部分：病理學(xué)診斷規(guī)范；——第

5

部分：環(huán)境與設(shè)施。本文件替代

DB43/T

959.4—2014《異種移植用無(wú)指定病原體（Designated

Pathogen

Free,

）醫(yī)用供體豬

第

4

959.4—2014

主要技術(shù)變化如下：a）

增加了“引言”一章；b）

1

5.2.2，2014

）；c）

1

異種移植用

6，2014

版的

5）；d）

8.1.1，2014

7.1.1）。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由湖南省科學(xué)技術(shù)廳提出并歸口。本文件起草單位：中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院，湖南賽諾生物科技股份有限公司。本文件主要起草人：王維、周智君、胡鵬志、馬小倩、李桑、徐暢、王佳、石興勇。本文件及其所替代文件的歷次版本發(fā)布情況為：——2014

年首次發(fā)布為

959.4—2014；——本次為第一次修訂。IIIDB43/T

959.4—2023 異種移植用無(wú)指定病原體（Designated

Pathogen

Free,

）醫(yī)用供體豬標(biāo)準(zhǔn)化能更好的促進(jìn)異體系中，DB43/T

959《異種移植用無(wú)指定病原體（Designated

Pathogen

DPF）醫(yī)用供體豬》是指導(dǎo)湖南省異種移植用無(wú)指定病原體醫(yī)用供體豬培育的基礎(chǔ)性和通用性的標(biāo)準(zhǔn)。DB43/T

旨在確立環(huán)境設(shè)施的準(zhǔn)則，擬由五個(gè)部分構(gòu)成?！?/p>

1

——第

2

生物安全性?！?/p>

3

部分：配合飼料。目的在于保障異種移植用無(wú)指定病原體醫(yī)用供體豬飼料的安全和營(yíng)養(yǎng)?！?/p>

4

內(nèi)容和方法?！?/p>

5

設(shè)施建設(shè)。感染的可能性，并快速對(duì)感染豬進(jìn)行處理，以杜絕疾病擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)。為了做好這項(xiàng)工作，湖南省在

2014年發(fā)布了有關(guān)異種移植用無(wú)指定病原體醫(yī)用供體豬病理學(xué)診斷的地方標(biāo)準(zhǔn)。DB43/T

959.4

發(fā)布實(shí)施已確有必要修訂完善

959.4，以提升異種移植用無(wú)指定病原體醫(yī)用供體豬感染風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警能力。病理學(xué)診斷需要充分考慮合理的抽樣比例以及動(dòng)物福利。本次對(duì)

的修訂，重點(diǎn)考慮驟，減輕動(dòng)物在采樣過(guò)程中的痛苦，保證了動(dòng)物福利。DB43/T

959.4—2023Designated

DPF

1

本文件規(guī)定了異種移植用無(wú)指定病原體（Designed

Pathogen

Free,

DPF）醫(yī)用供體豬病理學(xué)檢查本文件適用于異種移植用

DPF

醫(yī)用供體豬的病理學(xué)診斷。2

規(guī)范性引用文件本文件沒(méi)有規(guī)范性引用文件。3

術(shù)語(yǔ)和定義3.1

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。異種移植用

DPF

醫(yī)用供體豬

grade

DPF

pig

for

月齡體重宜不超過(guò)

50

織（World

Health

Organization，WHO）指定供體動(dòng)物應(yīng)排除的潛在感染或條件致病和感染性人畜共患體、科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制鑒定以及其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)的小型豬。3.2臨床病理學(xué) clinical

用化學(xué)、微生物學(xué)、血液學(xué)和分子生物學(xué)的方法對(duì)體液（血液和尿液）和組織等進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室分析，從而對(duì)疾病進(jìn)行診斷的醫(yī)學(xué)學(xué)科。3.3解剖病理學(xué)

pathology對(duì)疾病做出診斷的醫(yī)學(xué)學(xué)科。4

縮略語(yǔ)下列術(shù)語(yǔ)、英文簡(jiǎn)寫(xiě)及全稱適用于本文件。ALB（ALT（

AminotransferaseAST（Aspartate

Aminotransferase50

50-100

100-500

10

500

25

DB43/T

959.4—2023BUN（Blood

Urea

CRE（）：肌酐GLU（HCT（HGB（MCH（Mean

Corpusular

MCHC（Mean

Corpusular

Hemoglobin

MCV（Mean

corpusular

MPV（Mean

Platelet

PLT

（PlateletRBC（

Blood

CellRDW（

Cell

Distribution

WidthWBC（White

Blood

Cell

T-BIL（

Total

BilirubinT-CHO（Total

TG（TriglycerideTP（Total

Protein5

檢查規(guī)則5.1檢查頻率無(wú)指定病原體級(jí)異種移植用

DPF

3

個(gè)月至少檢查一次；解剖病理學(xué)檢測(cè)每隔一年至少檢查一次。5.2抽樣要求5.2.1選擇

3

月齡以上異種移植用

DPF

醫(yī)用供體豬用于檢測(cè)，隨機(jī)抽樣。5.2.2 根據(jù)群體大小，抽樣數(shù)量見(jiàn)表

1。表

表

1 抽樣數(shù)量DB43/T

959.4—20236

檢查程序檢查程序見(jiàn)圖

1。圖

1 異種移植用

醫(yī)用供體豬檢查程序7

臨床病理學(xué)檢查7.1外觀檢查7.1.1 檢查項(xiàng)目精神狀態(tài)、被毛、皮膚、天然孔、營(yíng)養(yǎng)狀況、運(yùn)動(dòng)狀態(tài)、飲食情況、呼吸狀態(tài)等。7.2血液學(xué)檢查7.2.1 采樣要求動(dòng)物準(zhǔn)備：空腹

12

h～

h。采血位置：耳靜脈、前腔靜脈或后肢外側(cè)隱靜脈。采血量：

mL，采用相應(yīng)規(guī)格的

抗凝管。標(biāo)本儲(chǔ)存條件：室溫條件下不超過(guò)

8

h。7.2.2 檢測(cè)項(xiàng)目RBC、、MCV、HGB、、MCHC、、、MPV、WBC。DB43/T

959.4—20237.2.3 正常參考值異種移植用

DPF

醫(yī)用供體豬血液學(xué)指標(biāo)正常參考值參見(jiàn)附錄

A。7.3血液生物化學(xué)檢查7.3.1 采樣要求動(dòng)物準(zhǔn)備：空腹

12

h～

h。采血位置：耳靜脈、前腔靜脈或后肢外側(cè)隱靜脈。采血量：

mL。標(biāo)本處理：室溫放置

30

～60

min，3000

5

，取血清用于檢測(cè)。標(biāo)本儲(chǔ)存條件：血清標(biāo)本密封、避光保存，室溫條件下不超過(guò)

12

h，4℃條件下不超過(guò)

24

h。7.3.2 檢測(cè)項(xiàng)目ALT、、CRE、BUN、TP、ALB、GLU、T-BIL、TG、T-CHO。7.3.3 正常參考值異種移植用

DPF

醫(yī)用供體豬血液生物化學(xué)指標(biāo)正常參考值參見(jiàn)附錄

B。8

解剖病理學(xué)檢查8.1 大體解剖8.1.1解剖程序麻醉→體表檢查→皮下檢查→剖開(kāi)腹腔做一般視查→剖開(kāi)胸腔作一般視查→摘出腹腔臟器并檢查官并檢查→剖開(kāi)脊椎管，摘出脊髓并檢查→肌肉、關(guān)節(jié)和淋巴結(jié)檢查→骨和骨髓檢查。8.1.2 檢查內(nèi)容體表：發(fā)育狀態(tài)、營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)、精神狀態(tài)、感覺(jué)器官、呼吸系統(tǒng)、被毛、皮膚、睪丸。頭頸部：口腔、鼻腔、大腦、小腦、腦干、垂體、扁桃體、甲狀腺、甲狀旁腺。胸腔：胸腔液、胸腺、肺和肺門(mén)淋巴結(jié)、心包、心包液和心臟、主動(dòng)脈、氣管和支氣管。腹腔：腹腔液、脾臟和脾門(mén)淋巴結(jié)、肝臟、膽囊、肝門(mén)部位的血管、膽管和淋巴結(jié)、胰腺、腎臟、盆腔：膀胱、輸尿管、前列腺、精囊腺、卵巢、輸卵管、子宮、陰道。8.2組織病理學(xué)檢查8.2.1 組織標(biāo)本取材規(guī)范組織標(biāo)本取材規(guī)范參見(jiàn)附錄

C。8.2.2 檢查內(nèi)容心、肺、肝、脾、腎、胃、空腸、腸系膜淋巴結(jié)、睪丸/卵巢，以及大體解剖檢查發(fā)現(xiàn)異常的器官DB43/T

959.4—2023和組織。9

結(jié)果判定9.1 臨床病理學(xué)檢查結(jié)果判定9.1.1 判定標(biāo)準(zhǔn)個(gè)群體，判定標(biāo)準(zhǔn)如下：a）

未見(jiàn)異常：動(dòng)物外觀無(wú)異常，同時(shí)血液化驗(yàn)指標(biāo)均在正常參考值范圍內(nèi)。b）

輕微異常：動(dòng)物外觀無(wú)明顯異常，但是血液化驗(yàn)指標(biāo)有

1～2

項(xiàng)異常升高或降低，最大變異不超過(guò)正常參考值范圍臨界值的

c）

輕度異常：1）

2

考值范圍臨界值

20％～％；2）

2

常參考值范圍臨界值

20％-50d）

明顯異常：1）

2

考值范圍臨界值的

2）

2

常參考值范圍臨界值的

％；3）

動(dòng)物外觀明顯異常。9.1.2 結(jié)果確認(rèn)為準(zhǔn)。9.2 解剖病理學(xué)檢查結(jié)果判定9.2.1 判定標(biāo)準(zhǔn)整個(gè)群體，判定標(biāo)準(zhǔn)如下：a）

未見(jiàn)異常：未發(fā)現(xiàn)病理形態(tài)學(xué)異常變化；b）

輕微異常：發(fā)現(xiàn)輕微的病理形態(tài)學(xué)變化，推測(cè)動(dòng)物仍然能夠表現(xiàn)正常的生理功能；c）

輕度異常：發(fā)現(xiàn)輕度的病理形態(tài)學(xué)變化，推測(cè)動(dòng)物正常生理功能已經(jīng)出現(xiàn)偏差；d）

明顯異常：有明顯的病理形態(tài)學(xué)變化，推測(cè)動(dòng)物出現(xiàn)生理功能障礙。9.2.2 結(jié)果確認(rèn)解剖病理學(xué)檢查結(jié)果需要有同行復(fù)核，檢查報(bào)告要求由病理專業(yè)高級(jí)職稱的技術(shù)人員簽署。DB43/T

959.4—202310

檢查結(jié)論10.1 動(dòng)物個(gè)體檢查結(jié)論定為不合格。臨床病理學(xué)與解剖病理學(xué)檢查結(jié)果不一致時(shí)，依據(jù)解剖病理學(xué)檢查結(jié)果做出檢查結(jié)論。10.2 動(dòng)物群體檢查結(jié)論感染判定該屏障區(qū)域內(nèi)異種移植用

醫(yī)用供體豬不合格。

RBC

1210

/LHCT

MCV

fLHGB

g/LMCH

pg19.51-21.30MCHC

g/LRDW

fL36.36-39.97PLT

910

/L190.63-396.37MPV

fLWBC

910

/LDB43/T

959.4—2023附

錄 A（規(guī)范性）異種移植用

DPF

醫(yī)用供體豬的血液學(xué)指標(biāo)正常值參考范圍表

表

A.1 異種移植用

DPF

醫(yī)用供體豬的血液學(xué)指標(biāo)正常值參考范圍

ALT

U/L30.72-83.53AST

U/L24.46-219.79CRE

μmol/L86.39-119.86BUN

mmol/L2.46-8.12TP

g/L69.35-80.85ALB

g/L34.60-47.52GLU

mmol/L3.49-5.45T-BIL

μmol/L0.80-2.35TG

mmol/L0.66-1.36T-CHO

mmol/L2.68-4.10DB43/T

959.4—2023附

錄 B（規(guī)范性）異種移植用

DPF

醫(yī)用供體豬的血液生物化學(xué)指標(biāo)正常值參考范圍表

表

B.1 異種移植用

DPF

醫(yī)用供體豬的血液生物化學(xué)指標(biāo)正常值參考范圍DB43/T

959.4—2023附

錄 C（規(guī)范性）異種移植用

DPF

醫(yī)用供體豬組織病理學(xué)檢查及標(biāo)本取材規(guī)范C.1 總則C.1.1 一般用于組織學(xué)取材的動(dòng)物剖殺前應(yīng)先隔離檢疫

d，并詳細(xì)記錄實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源、種類、年齡、性別、原編號(hào)、體重、臨床癥狀等，記錄剖檢時(shí)間、地點(diǎn)、麻醉方法、時(shí)間、麻醉者、處死方法、解剖者、記錄人、溫度、濕度。動(dòng)物剖殺前禁食（不禁水）時(shí)間一致，為

h。C.1.2 病理標(biāo)本應(yīng)及時(shí)取材、及時(shí)固定。病理檢查應(yīng)分層次進(jìn)行，先進(jìn)行一般外觀觀察，然后剖檢觀察，再進(jìn)行光鏡詳細(xì)檢查。C.1.3 取材部位宜選擇正常與病灶交界處、病變特別明顯處以及眼觀變化特殊處。適量包括與病變區(qū)皮質(zhì)、髓質(zhì)、腎盂粘膜及被膜。相同器官取材時(shí)，選材部位應(yīng)盡量一致。C.1.4 大體積和分葉的器官，應(yīng)視不同組織選取多個(gè)部位；小器官可整體取材并固定，如淋巴結(jié)、扁刮抹、壓擠和沖洗（胃腸內(nèi)容除外）。C.1.5

0.5

cm-1.0

cm，不宜太厚或太薄。C.1.6 組織塊放入固定液時(shí)忌卷曲、互相粘貼和貼靠瓶壁，食管、胃、腸、膽囊及膀胱等空腔臟器應(yīng)動(dòng)物的同時(shí)進(jìn)行固定液灌注后再取材，胃腸道組織的取材和固定應(yīng)控制在動(dòng)物死后

20

min

以內(nèi)。C.1.7

4C.1.8如發(fā)現(xiàn)病變組織，在組織取材之前，應(yīng)記錄組織大小，質(zhì)地性質(zhì)及硬度，包膜的厚度和完整性以及與周?chē)渌K器之間位置關(guān)系，必要時(shí)稱重。C.2 體表檢查和取材C.2.1 體表檢查病變，有無(wú)寄生蟲(chóng)和糞便粘著等變化。注意體表淋巴結(jié)有無(wú)腫大、硬結(jié)。C.2.2皮膚取材C.3皮下檢查和取材C.3.1 皮下檢查DB43/T

959.4—2023觀察肌肉組織表面有無(wú)變異，皮下有無(wú)充血、炎癥、出血、淤血、水腫（多呈膠胨樣）等病變。C.3.2淋巴結(jié)取材

狀況，必要時(shí)稱其重量。C.4 腹腔及腹腔臟器的取材和檢查C.4.1 膜及腹腔器官漿膜是否光滑，腸壁有無(wú)粘連，再沿肋骨弓將腹壁兩側(cè)切開(kāi)，使腹腔器官全部暴露。C.4.2脾C.4.2.1脾臟檢查

2

態(tài)，有無(wú)結(jié)節(jié)壞死梗死和膿腫等。C.4.2.2 脾臟取材以刀背刮切面，檢查脾髓的質(zhì)地。以

0.5

cm-1.0

間距對(duì)脾作多個(gè)平行橫切面，檢查每塊脾臟薄片的局部形態(tài)。取材

1

塊

塊。記錄脾臟的形態(tài)、色澤和切面的情況。C.4.3肝、膽囊和胰腺C.4.3.1 肝臟檢查結(jié)構(gòu)是否清晰，有無(wú)膿腫和壞死等。同時(shí)，應(yīng)注意膽囊的大小，膽汁的性狀含量以及黏膜的變化。C.4.3.2肝臟取材左外葉和右外葉各取

1

面經(jīng)過(guò)病變中心，取病變組織

2

塊。記錄肝臟表面和切面情況，門(mén)脈做剖開(kāi)檢查。C.4.3.3 膽囊取材沿長(zhǎng)軸剪開(kāi)膽囊壁，取材

1

塊。記錄膽囊大小、色澤，以及膽囊壁和膽汁的情況。C.4.3.4 胰腺取材胰腺的頭、體、尾各取

1

塊。如有病變，應(yīng)切出病變區(qū)域的最大截面，取

2

塊。C.4.4 腎C.4.4.1 腎臟檢查檢查腎臟的形態(tài)、大小、色澤和韌度。注意包膜的狀態(tài)，是否光滑透明和容易剝離。包膜剝離后，10DB43/T

959.4—2023容積，有無(wú)積尿積膿結(jié)石等，以及黏膜的性狀。C.4.4.2 腎臟取材的不同部位切取

2

2

2

臟表面、皮質(zhì)、髓質(zhì)、腎盂和輸尿管的情況。C.4.5 胃C.4.5.1胃檢查數(shù)量、性狀、氣味、色澤等。最后檢查胃黏膜的色澤，注意有無(wú)水腫出血充血潰瘍肥厚等病變。C.4.5.2 胃取材

1

位

1

塊-3

塊。記錄粘膜的色澤及有無(wú)異常。C.4.6 C.4.6.1 腸道檢查從十二指腸、空腸、大腸、直腸分段進(jìn)行檢查。先檢查腸系膜、淋巴結(jié)有無(wú)腫大、出血等，再檢查腸管漿膜的色澤粘連生蟲(chóng)結(jié)節(jié)后剪開(kāi)腸管查腸內(nèi)容物數(shù)量狀味，有無(wú)血液、異物等除去腸內(nèi)容物，檢查腸黏膜的性狀，注意有無(wú)腫脹、發(fā)炎、充血、出血、寄生蟲(chóng)和其他病變。C.4.6.2 腸道取材

1

2

段的位置，以及腸腔內(nèi)有無(wú)寄生蟲(chóng)或異物。C.5 胸腔及其胸腔臟器的取材和檢查C.5.1 開(kāi)胸腔離咽、喉頭、氣管、食道周?chē)募∪夂徒Y(jié)締組織，將喉頭、氣管、食道等一同采出。C.5.2 肺C.5.2.1 肺臟檢查11DB43/T

959.4—2023有無(wú)病變，切面流出物的