子宮肌瘤患者er、pr表達(dá)情況及其臨床意義

子宮肌瘤患者er、pr表達(dá)情況及其臨床意義

子宮腫瘤是罕見的子宮腫瘤。病理類型主要包括子宮平滑肌瘤、子宮內(nèi)膜間質(zhì)腫瘤和子宮惡意苗樂管混合瘤。子宮肉瘤臨床診斷困難、復(fù)發(fā)率高、預(yù)后差,5年生存率較低,約為32.0%~64.5%。由于子宮肉瘤病例少見,病理類型多樣,對(duì)治療的反應(yīng)不一,對(duì)子宮肉瘤的治療存在較多爭(zhēng)議。本研究針對(duì)臨床常見的三種類型子宮肉瘤中ER、PR的臨床生物學(xué)特性進(jìn)行研究,以探討子宮肉瘤與性激素受體的關(guān)系,為子宮肉瘤的內(nèi)分泌治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。對(duì)象和方法一、研究主題1.平滑肉瘤,藥物代謝和年齡選取1991年9月~2001年9月我院及北京大學(xué)第三醫(yī)院收治的子宮肉瘤患者44例,其中子宮內(nèi)膜間質(zhì)肉瘤(ESS)16例(36.4%),平滑肌肉瘤(LMS)22例(50.0%),子宮惡性苗勒管混合瘤(MMMT)6例(13.6%)。平均年齡47.4歲(19~72歲)。按UICC-AJCCS(1970年)的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期。其中Ⅰ期30例(68.2%),Ⅱ期3例(6.8%),Ⅲ期9例(20.5%),Ⅳ期2例(4.5%)。2.平血釋細(xì)手術(shù)44例子宮肉瘤患者均行手術(shù)治療。1例行子宮肌瘤切除術(shù),13例行子宮及雙附件切除術(shù),6例行次廣泛子宮、雙附件及盆腔淋巴結(jié)清掃術(shù),其余均行子宮、雙附件及盆腔淋巴結(jié)活檢術(shù)或切除術(shù)或(和)闌尾及部分大網(wǎng)膜切除術(shù)。29例術(shù)后行化療,1例術(shù)后行放療,13例術(shù)后行內(nèi)分泌治療。3.術(shù)后隨訪及隨訪術(shù)后系統(tǒng)治療后進(jìn)行隨訪,隨訪方法為第1年每月1次;第2~3年每3~6個(gè)月1次;3年后每年1次。隨訪內(nèi)容包括癥狀、婦科查體、婦科B超等以觀察瘤灶有無。隨訪期限至2001年4月,除1例失訪(2.3%)外,所有患者進(jìn)行隨訪。其中29例無瘤存活(65.9%),7例有復(fù)發(fā)存活(15.9%),7例因瘤死亡(15.9%)。二、免疫、局部檢測(cè)手術(shù)標(biāo)本經(jīng)10%甲醛固定后石蠟包埋備用。選取診斷明確的子宮肉瘤手術(shù)標(biāo)本蠟塊,共44例。每例標(biāo)本連續(xù)切取4張5μm厚的切片,其中1張用于HE染色核實(shí)病理診斷,1張不加一抗作為陰性對(duì)照,2張切片分別用于測(cè)定ER和PR,同時(shí)取乳腺導(dǎo)管癌組織切片作為陽性對(duì)照。二甲苯脫蠟、梯度乙醇溶液入水;PBS洗片5min;加入0.01M枸櫞酸鈉抗原修復(fù)液,98℃水浴箱內(nèi)修復(fù)15min,自然降至室溫;PBS平衡pH值;10%羊血清中室溫孵育15min封閉非特異位點(diǎn);一抗分別應(yīng)用鼠抗人單抗特異性識(shí)別ER的1D5(1:50,購(gòu)自美國(guó)Zymed公司);識(shí)別hPR-A和hPR-B的1A6(1∶50,購(gòu)自美國(guó)Zymed公司)。另一張不加任何一抗(作為陰性對(duì)照),4℃濕盒內(nèi)過夜;室溫復(fù)溫20min,PBS洗片;加入二抗,即生物素化羊抗鼠IgG1,室溫孵育30min,PBS洗片;加入三抗,即過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素,室溫孵育30min,PBS洗片;用3,3-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色10~20min,水洗終止反應(yīng);蘇木素淺染細(xì)胞核;切片脫水、晾干、封片,通過普通光鏡觀察定位。癌細(xì)胞胞漿、胞膜及胞核內(nèi)有清晰的橘黃色或棕黃色顆粒者為陽性細(xì)胞。高倍鏡(×400)下各計(jì)數(shù)100個(gè)癌細(xì)胞,計(jì)算5個(gè)高倍視野中的陽性癌細(xì)胞均數(shù)。雌、孕激素受體染色陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)≤20%者為受體陰性,>20%者為陽性。三、統(tǒng)計(jì)處理采用SPSS10.0軟件包。本研究為分類數(shù)據(jù),采用卡方檢驗(yàn),P<0.05為差異有顯著性。結(jié)果一、種類型蓮子瘤er表達(dá)情況44例子宮肉瘤患者ER陽性表達(dá)21例(47.7%)。在16例子宮內(nèi)膜間質(zhì)肉瘤中12例ER陽性(75%),22例子宮平滑肌肉瘤中7例ER陽性(31.8%),6例子宮惡性苗勒管混合瘤中2例ER陽性(2/6)。三種類型子宮肉瘤的ER表達(dá)差異有顯著性(P=0.024)。其中子宮內(nèi)膜間質(zhì)肉瘤ER表達(dá)陽性率顯著高于子宮平滑肌肉瘤(P=0.009),而二者與惡性苗勒管混合瘤比較差異均無顯著性(P=0.07及0.944)。PR陽性表達(dá)34例(77.3%),其中子宮內(nèi)膜間質(zhì)肉瘤PR均陽性(100%),子宮平滑肌肉瘤中PR陽性率為68.2%,子宮惡性苗勒管混合瘤中PR陽性3例(3/6)。三種類型子宮肉瘤的PR表達(dá)差異有顯著性(P=0.016)。其中子宮內(nèi)膜間質(zhì)肉瘤與另外兩種肉瘤PR表達(dá)陽性率比較差異有顯著性(P=0.012及0.002),而平滑肌肉瘤與惡性苗勒管混合瘤PR表達(dá)陽性率比較差異無顯著性(P=0.410),見表1。二、er+、pr244例子宮肉瘤ER和PR均陽性21例(47.7%),ER和PR均陰性10例(22.7%),ER(+)、PR(-)占0%;ER(-)、PR(+)13例(29.5%)。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示ER與PR間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)。三、er表達(dá)率與藥物離子表達(dá)的關(guān)系由表2顯示,核分裂相<10個(gè)/10HPs的子宮肉瘤PR表達(dá)率顯著高于核分裂相≥10個(gè)/10HPs的子宮肉瘤(P=0.038),ER表達(dá)率與子宮肉瘤核分裂無顯著相關(guān)性(P>0.05)。ER、PR與子宮肉瘤侵肌范圍無顯著相關(guān)性(P>0.05)。四、瘤存及因瘤死亡關(guān)聯(lián)由表3顯示,ER、PR與患者絕經(jīng)狀態(tài)、腫瘤分期關(guān)聯(lián)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與無瘤存活及因瘤死亡的關(guān)聯(lián)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。無瘤存活者ER、PR表達(dá)率分別高于因瘤死亡者(P=0.035及0.013)。子骨髓炎對(duì)pr表達(dá)的影響子宮肉瘤是較少見的子宮惡性腫瘤,病理類型主要有子宮平滑肌肉瘤、子宮內(nèi)膜間質(zhì)肉瘤和子宮惡性苗勒管混合瘤,三者占子宮肉瘤的95%以上,因缺乏特征性的癥狀和體征,術(shù)前診斷較為困難。治療以手術(shù)為主,預(yù)后較差。腫瘤細(xì)胞中ER和PR的表達(dá)為激素輔助治療提供了理論基礎(chǔ)。近年來,有文獻(xiàn)報(bào)道子宮內(nèi)膜間質(zhì)肉瘤有較高的ER、PR表達(dá)率,內(nèi)分泌治療有一定療效,但系統(tǒng)的研究較少。因此,本文研究不同類型子宮肉瘤ER、PR免疫組化表達(dá)狀況并與臨床病理特征、預(yù)后進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)16例ESS的PR-AB陽性表達(dá)率100%,其中包括15例LG-ESS和1例HG-ESS,顯著高于LMS和MMMT。孕激素在LG-ESS中的作用機(jī)制,可能與乳腺癌中孕激素抑制雌激素的作用不同,即子宮內(nèi)膜間質(zhì)腫瘤可能是非雌激素依賴性的。Tseng提出高濃度的孕酮與其受體結(jié)合在細(xì)胞中產(chǎn)生大量結(jié)合蛋白,結(jié)合蛋白與生長(zhǎng)因子作用使其失活,這種拮抗作用可導(dǎo)致腫瘤生長(zhǎng)減慢或停止。Sabini等研究發(fā)現(xiàn)LG-ESSPR高表達(dá)和ER低表達(dá),證實(shí)了孕酮在LG-ESS中的作用機(jī)制。作者發(fā)現(xiàn)5例LG-ESSPR均為強(qiáng)陽性,HG-ESSPR和ER表達(dá)均為陰性,此研究提示在子宮內(nèi)膜間質(zhì)腫瘤中PR的表達(dá)可能用于區(qū)分LG-ESS和HG-ESS。但本研究中1例HG-ESS的PR、ER表達(dá)均為陽性,有待進(jìn)一步研究。許多臨床觀察發(fā)現(xiàn)LG-ESS對(duì)性激素敏感。Katz等報(bào)道4例對(duì)激素治療完全或部分有反應(yīng)。該4例患者均無瘤存活或在初次診斷后2~6年保持病情穩(wěn)定。Baggish等報(bào)道雙側(cè)卵巢切除后轉(zhuǎn)移病灶縮小。Krieger等報(bào)道雙側(cè)卵巢切除后復(fù)發(fā)率低、生存期延長(zhǎng)。Rand等和Horowitz等發(fā)現(xiàn)孕激素可成功治療復(fù)發(fā)病灶。Scribiner報(bào)道對(duì)LG-ESS患者術(shù)前加用孕激素治療。Reich等研究提示LG-ESS激素治療的可行性,同時(shí)提出應(yīng)對(duì)LG-ESS患者常規(guī)進(jìn)行ER、PR免疫組化方法的評(píng)價(jià)。在本研究中有1例LG-ESS患者術(shù)后5年腹壁轉(zhuǎn)移,免疫組化ER、PR均陽性,術(shù)后予三苯氧胺及安宮黃體酮治療,現(xiàn)隨訪3年無復(fù)發(fā),說明大劑量孕激素治療有一定的治療意義。目前報(bào)道的子宮肉瘤中PR陽性率為55.8%,LG-ESS中PR陽性率可達(dá)100%。本研究中PR陽性率為77.3%,其中子宮內(nèi)膜間質(zhì)肉瘤中16例PR均陽性(100%),22例子宮平滑肌肉瘤中15例PR陽性(68.2%),子宮惡性苗勒管混合瘤中PR陽性及陰性各占50%。三種類型子宮肉瘤的PR表達(dá)有顯著性差異(P=0.016)。其中,子宮內(nèi)膜間質(zhì)肉瘤與另外兩種肉瘤PR表達(dá)陽性率差異有顯著性(P=0.012及0.002),而平滑肌肉瘤與惡性苗勒管混合瘤PR表達(dá)陽性率差異無顯著性(P=0.410)。以往研究提示PR水平不受腫瘤分期、程度或核分裂相影響。與該研究結(jié)果類似,本研究中PR與患者年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、腫瘤分期無顯著相關(guān)性(P>0.05)。但無瘤存活者PR表達(dá)率顯著高于因瘤死亡者(P=0.013)。核分裂相<10個(gè)/10HPs的子宮肉瘤PR表達(dá)率顯著高于核分裂相≥10個(gè)/10HPs的子宮肉瘤(P=0.038)。目前,對(duì)于子宮肉瘤內(nèi)分泌治療的研究結(jié)果尚存在爭(zhēng)議。Tseng等通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),子宮肉瘤組織含有較高的芳香化酶活性,可以合成雌激素。孕激素能夠誘導(dǎo)ER、PR陽性患者的芳香化酶活性,從而認(rèn)為孕激素對(duì)子宮肉瘤患者的治療有潛在益處。本研究從免疫組織化學(xué)角度說明ER及PR狀態(tài)與子宮肉瘤患者預(yù)后的關(guān)系,同時(shí)也證實(shí)了PR與ER在子宮肉瘤中有顯著的相關(guān)性。本研究中共有29例(65.9%)患者術(shù)后輔助化學(xué)治療,有1例(2.3%)患者術(shù)后輔助放射治療。有學(xué)者認(rèn)為化療并沒有使子宮肉瘤的5年生存率提高。Aaron等認(rèn)為,手術(shù)病理分期,核異型性及核分裂相、DNA指數(shù)均為影響預(yù)后的因素。期別早、核異型性及核分裂相少的預(yù)后較好。二倍體腫瘤較非二倍體腫瘤預(yù)后好。有研究認(rèn)為生存時(shí)間與病理類型、臨床分期和年齡有一定相關(guān)性,而與術(shù)式、是否化療無關(guān)。本