微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)七

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)七枯草桿菌石炭酸復(fù)紅

染色圖片枯草桿菌呂氏美藍(lán)染色圖片實(shí)驗(yàn)7放線菌的形態(tài)觀察霉菌的形態(tài)觀察一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)并掌握觀察放線菌、霉菌形態(tài)的基本方法2、初步了解放線菌、霉菌的形態(tài)特征放線菌的形態(tài)觀察一實(shí)驗(yàn)?zāi)康谋尘爸R（一）放線菌的菌落形態(tài)

放線菌的菌落由菌絲體組成。放線菌菌絲纖細(xì)，生長緩慢，相互交錯，所以形成的菌落較小而且質(zhì)地致密，表面干燥、多皺、“絨狀”。放線菌基內(nèi)菌絲長在培養(yǎng)基內(nèi)，菌落與培養(yǎng)基結(jié)合較緊，不易挑起

。幼齡菌落因氣生菌絲尚未分化成孢子絲，所以不易與細(xì)菌菌落相區(qū)分。當(dāng)放線菌形成大量的分生孢子而布滿菌落表面后，形成表面呈“細(xì)粉狀”或“顆粒狀”的典型放射狀菌落。由于放線菌的菌絲和孢子常產(chǎn)生各種色素，所以菌落正反兩面有時會呈現(xiàn)不同色澤。

二實(shí)驗(yàn)材料菌種：GHSS-Y蓋玻片、載玻片、顯微鏡、解剖刀、鑷子、解剖針、石炭酸復(fù)紅或美藍(lán)染液。三實(shí)驗(yàn)步驟1菌落形態(tài)及菌苔特征：觀察菌落的表面形狀、大小、顏色（菌絲、孢子）和邊緣、在基質(zhì)上著生緊密與否2個體形態(tài)觀察--PlanIPlanII（菌絲直徑孢子絲形狀）注意事項印片過程中，用力適中，不要錯動，水洗時水流應(yīng)緩慢，以免破壞孢子絲形態(tài)。實(shí)驗(yàn)報告菌落或菌苔特征描述、繪圖霉菌的形態(tài)觀察一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.觀察霉菌菌落形態(tài)。2.學(xué)習(xí)并掌握霉菌的制片方法。3.觀察霉菌個體形態(tài)及各種無性孢子及有性孢子的形態(tài)。背景知識—菌落形態(tài)較大、質(zhì)地較疏松，顏色各異由于霉菌的菌絲較粗而長，因而霉菌的菌落較大，有的霉菌的菌絲蔓延，沒有局限性，其菌落可擴(kuò)展到整個培養(yǎng)皿，有的種則有一定的局限性，直徑1-2厘米或更小。菌落質(zhì)地一般比放線菌疏松，外觀干燥，不透明；菌落與培養(yǎng)基的連接緊密，不易挑??；菌落正反面的顏色和邊緣與中心的顏色常不一致。霉菌的菌絲。構(gòu)成霉菌營養(yǎng)體的基本單位是菌絲。菌絲是一種管狀的細(xì)絲，把它放在顯微鏡下觀察，很像一根透明膠管，它的直徑一般為3-10微米，比細(xì)菌和放線菌的細(xì)胞約粗幾倍到幾十倍。菌絲可伸長并產(chǎn)生分枝，許多分枝的菌絲相互交織在一起，就叫菌絲體。在固體基質(zhì)上生長時，部分菌絲深入基質(zhì)吸收養(yǎng)料，稱為基質(zhì)菌絲或營養(yǎng)菌絲；向空中伸展的稱氣生菌絲，氣生菌絲生長到一定階段分化產(chǎn)生繁殖菌絲，由繁殖菌絲產(chǎn)生孢子。根據(jù)菌絲中是否存在隔膜，可把霉菌菌絲分成兩種類型：無隔膜菌絲和有隔膜菌絲。無隔膜菌絲中無隔膜，整團(tuán)菌絲體就是一個單細(xì)胞，其中含有多個細(xì)胞核。這是低等真菌所具有的菌絲類型（如毛霉、根霉）。有隔膜菌絲中有隔膜，被隔膜隔開的一段菌絲就是一個細(xì)胞，菌絲體由很多個細(xì)胞組成，每個細(xì)胞內(nèi)有1個或多個細(xì)胞核（如青霉、曲霉）。

霉菌有著極強(qiáng)的繁殖能力，而且繁殖方式也是多種多樣的。雖然霉菌菌絲體上任一片段在適宜條件下都能發(fā)展成新個體，但在自然界中，霉菌主要依靠產(chǎn)生形形色色的無性或有性孢子進(jìn)行繁殖。孢子有點(diǎn)像植物的種子，不過數(shù)量特別多，特別小。

霉菌繁殖方式（一）無性孢子1、厚垣（yuán

）孢子2、節(jié)孢子3、分生孢子4、孢囊孢子（二）有性孢子1、卵孢子2、接合孢子3、子囊孢子子囊果類型：閉囊殼、子囊殼、子囊盤。毛霉菌Mucor孢囊孢子（Sporangiospore）（Conidium）黃曲霉Aspergillusflavus青霉菌Penicillum青霉的分生孢子頭厚垣（yuan）孢子

節(jié)孢子二、材料與器材

曲霉、毛霉、青霉和根霉永久制片；霉菌SWXX、CCSJ、LSG-2菌株培養(yǎng)物平皿、吸管、蓋玻片、玻璃涂棒、載玻片、解剖針、解剖刀、顯微鏡、乳酸石炭酸棉藍(lán)等。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及步驟（一）菌落特征的觀察用肉眼觀察生長在瓊脂平板上的各種霉菌菌落，并根據(jù)下列要求對每種霉菌的菌落特征加以描述。1.菌落的大小：局限生長或蔓延生長，菌落的直徑和高度。2.菌落的顏色：正面和背面的顏色，培養(yǎng)基的顏色變化。3.菌落的形態(tài)：”絨毛狀”、”棉絮狀”、”網(wǎng)狀”、疏松或緊密、同心輪紋、放線狀的皺褶等。（二）用顯微鏡觀察霉菌裝片。

1）毛霉和黑根霉的孢子的形狀、大小、孢子囊、中軸體的形狀，有無假根和匍匐菌絲。2）曲霉的分生孢子的形狀、大小、頂囊的形狀、小梗排列、隔膜。3）青霉的分生孢子的形狀、大小、小梗的排列方式，菌絲的隔膜。（三）制作霉菌裝片并觀察其個體形態(tài)。1.直接制片法觀察（1）制片：在干凈的載玻片上加一滴乳酸石炭酸棉藍(lán)染液，用解剖針從菌落邊緣處取小量帶有孢子的菌絲置于液體中，再小心地把菌絲放開，去掉培養(yǎng)基，然后用蓋玻片蓋上，注意不要產(chǎn)生氣泡。（省略酒精和水浸潤，洗滌）（2）鏡檢：菌絲體經(jīng)制片后可用低倍或高倍鏡觀察。在觀察時要注意菌絲直徑的大小，菌絲體有無隔膜，營養(yǎng)菌絲有無假根，無性繁殖或有性繁殖時形成的孢子種類及著生方式。各種霉菌都有其特征性的特化結(jié)構(gòu)。注意事項取菌絲或孢子等樣品時應(yīng)小心操作，盡量減少菌絲斷裂及形態(tài)破壞。蓋蓋玻片時盡量避免產(chǎn)生氣泡。注意無菌操作，取樣量不宜太大。孢子數(shù)量巨大，請小心操作，皿蓋敞開時間盡可能短，避免孢子四處飛散。六、實(shí)驗(yàn)報告

1、分別繪青霉(Penicilliumsp.)、根霉（Rhizopussp.