細胞因子檢測技術(shù)及其應(yīng)用

細胞因子檢測技術(shù)及其應(yīng)用1整理ppt細胞因子檢測的意義 細胞因子具有極強的生物學(xué)活性,可作為藥物用于臨床許多疾病的治療中。細胞因子發(fā)揮治療作用的濃度非常低,治療指數(shù)也比較低,劑量的增加一般都伴隨明顯的毒副作用。另一方面,細胞因子在體內(nèi)具有重要的病理作用。在感染、炎癥、自身免疫病、AIDS等疾病狀態(tài)下，有些細胞因子明顯增高。 通過檢測血清或組織液中的細胞因子含量,可以對診斷和治療作出評價,具有重要的臨床意義。根據(jù)檢測原理和手段的不同,細胞因子的檢測技術(shù)大致分為三類:免疫學(xué)方法、生物學(xué)方法和分子生物學(xué)方法。2整理ppt一、細胞因子檢測概述一、細胞因子的類型與作用特點二、細胞因子檢測的特點與方法3整理ppt

由非神經(jīng)—內(nèi)分泌細胞產(chǎn)生的一大類與免疫應(yīng)答活動密切相關(guān)的低分子蛋白與多肽。細胞因子4整理ppt細胞因子的類型與作用特點1、細胞因子的分類2、細胞因子的作用特點5整理ppt以生物學(xué)作用進行劃分的分類白細胞介素〔Interleukin〕——IL-1、IL-2、……IL-18干擾素〔Interferon〕——IFN-、IFN-、IFN-腫瘤壞死因子〔Tumornecrosisfactor〕——TNF-、TNF-集落刺激因子〔Colony-stimulatingfactor〕——M-CSF、G-CSF轉(zhuǎn)化生長因子〔Transforminggrowthfactor〕——TGF-趨化因子〔Chemokine〕——IL-8、GROs、MCP-1生長因子〔Growthfactor〕——EGF、FGF、IGF、PDGF6整理pptTNFsILsIFNsTGFsChemokinesCSFs各類細胞因子間關(guān)系7整理ppt1、旁分泌〔paracrine〕、自分泌〔autocrine〕性2、多源與同源性3、高效性4、多效性〔pleiotropy〕5、豐余性〔redundancy〕6、協(xié)同性7、拮抗性8、網(wǎng)絡(luò)性8整理ppt細胞因子細胞因子細胞因子受體細胞因子受體細胞因子的自分泌與旁分泌性9整理ppt

IL-2IFN-TNF-細胞因子的同源性與多源性IFN-

T細胞T細胞NK細胞10整理pptIL-4Th細胞肥大細胞Th細胞B細胞細胞因子的多效性11整理pptTh細胞B細胞細胞因子的豐余性IL-2IL-4IL-512整理pptTh細胞B細胞細胞因子的協(xié)同性IL-4IL-513整理pptTh2細胞B細胞細胞因子的拮抗性Th1細胞IL-4IFN-

14整理ppt細胞因子的網(wǎng)絡(luò)性IL-3、IL-5、IL-4、IL-6、GM-CSFTNFTGFIL-1IFNIL-1IFNTNFIL-1TGFIFNIL2IL-4IFNIL2IL-4IL-5IL-6TNFIFNIL-1TGFTNFIL-1IFNIL-5GM-CSFG-CSFM-GSFTNFTNFIL-1TGFIL-1IL-6GM-CSFG-CSFM-GSFIL-1IL-6IL-1IL-6GM-CSFG-CSFM-GSFIFN內(nèi)皮細胞成纖維細胞TB15整理ppt細胞因子檢測的特點與方法1、檢測的特點2、檢測的方法

16整理ppt細胞因子檢測的特點免疫原性較弱樣品含量低樣品具有時效性生物效應(yīng)特異性差17整理ppt細胞因子檢測的方法免疫學(xué)檢測方法——抗原性檢測細胞生物學(xué)檢測方法——生物活性檢測分子生物學(xué)檢測方法——基因表達檢測18整理ppt二、細胞因子檢測的方法與原理一、細胞因子的細胞生物學(xué)檢測二、細胞因子的免疫學(xué)檢測三、細胞因子的分子生物學(xué)檢測19整理ppt細胞因子的細胞生物學(xué)檢測1、檢測方法與原理2、檢測中的操作注意要點

20整理ppt檢測方法與原理細胞增殖或增殖抑制試驗細胞病變抑制試驗細胞毒試驗細胞趨化試驗21整理ppt濾膜：計數(shù)受趨化細胞趨化因子細胞趨化試驗原理示意22整理ppt檢測中的操作注意要點靶細胞的選擇與培養(yǎng)檢測標(biāo)本的制備顯示檢測結(jié)果23整理ppt靶細胞的選擇與培養(yǎng)1、對所測的細胞因子有特異的敏感性2、易培養(yǎng)、保存、生物學(xué)特性穩(wěn)定3、有良好的生長狀態(tài)4、種屬適配24整理ppt各類細胞因子檢測的常用靶細胞細胞因子實驗系統(tǒng)干擾因素IL-1D10〔M〕增殖法IL-2、IL-4EL-4〔M〕增殖法IL-4A352〔H〕增殖抑制法IL-2CTLL〔M〕增殖法IL-4IL-3KG-1〔H〕增殖法TF-1〔H〕增殖法GN-CSF、IL-5IL-6、EPOIL-4CTLL〔M〕增殖法IL-2IL-5BCL-1〔M〕增殖法IL-425整理ppt各類細胞因子檢測的常用靶細胞細胞因子實驗系統(tǒng)干擾因素IL-6B9〔M〕增殖法IL-4、IL-11BM60〔H〕增殖法IL-7Clone-IXN/2b〔M〕增殖法IL-8中性粒細胞〔M、H〕趨化法GM-CSFTF-1〔H〕增殖法IL-3、IL-5IL-6、IL-5TNF/L929〔M、H〕細胞毒法IFNwish〔H〕病變保護法IFN-、IFN-L929〔M〕病變保護法IFN-、IFN-26整理ppt檢測標(biāo)本的準(zhǔn)備1、別離特定的產(chǎn)生細胞2、對產(chǎn)生細胞進行誘導(dǎo)、激活3、選擇適當(dāng)?shù)氖占瘯r間27整理ppt顯示檢測結(jié)果1、細胞增殖狀態(tài)的顯示：放射性核素摻入法、胞內(nèi)酶活性顯示法活細胞染色法細胞熒光測定法2、細胞毒或細胞病變狀態(tài)的顯示活細胞染色法胞內(nèi)酶活性顯示法

DNA斷片測定法28整理ppt細胞因子的免疫學(xué)檢測分泌型細胞因子的檢測細胞內(nèi)細胞因子的檢測29整理pptELISPOT30整理ppt細胞內(nèi)細胞因子檢測技術(shù)激活膜抗原標(biāo)記細胞內(nèi)細胞因子標(biāo)記31整理ppt細胞因子的分子生物學(xué)檢測原位雜交技術(shù)Rt-PCR技術(shù)32整理ppt三、常用細胞因子的檢測方法一、IL-2的檢測二、IFN-γ的檢測三、TNF的檢測33整理ppt待檢樣品〔細胞上清〕指示細胞〔CTLL-2〕按不同稀釋度參加37oC，16-20小時參加3HTdR〔1-5Ci〕37oC，4-6小時收集細胞測定白細胞介素-2的測定示意圖34整理ppt待檢樣品〔細胞上清〕指示細胞〔L929〕按不同稀釋度參加37oC，4小時37oC，24-48小時棄取上清，參加VSV觀察細胞病變〔鏡檢或比色〕干擾素的測定示意圖35整理ppt腫瘤壞死因子的測定示意圖待檢樣品〔細胞上清〕指示細胞〔L929〕按不同稀釋度參加37oC，24小時棄取上清，洗滌參加結(jié)晶紫染液，洗滌參加細胞裂解液，比色36整理ppt四、細胞因子受體的檢測一、細胞因子受體的類型二、細胞因子受體的檢測37整理ppt

細胞因子受體的類型膜型細胞因子受體分泌型細胞因子受體38整理ppt細胞因子受體的檢測方法膜型細胞因子受體的檢測配體檢測法抗體檢測法分泌型細胞因子受體的檢測標(biāo)記抗體檢測法39整理ppt小結(jié) 細胞因子